1、02真核微生物一、 什么是真病毒、亞病毒、類病毒、擬病毒和朊病毒？*二、 病毒粒有哪幾種對稱形式？每種對稱又有幾類特殊外形？試各舉一例。*三、 什么是包涵體、空斑、枯斑和噬菌斑？它們各有何實踐意義？*四、 試以煙草花葉病毒為代表，圖示并簡述螺旋對稱的桿狀病毒的典型構(gòu)造。*五、 試以腺病毒為例，圖示并簡述二十面體對稱的球狀病毒的典型構(gòu)造。*六、 試以E.coli T偶數(shù)噬菌體為例，圖示并簡述復(fù)合對稱病毒的典型構(gòu)造，并指 出其各部分的 特點和功能。*七、 什么叫烈性噬菌體？簡述其裂解性生活史。*八、 什么是效價？其測定方法有幾？*九、 試簡述測定噬菌體效價的雙層平板法。十、 什么是一步生長曲線？它

2、可分幾期？各期有何特點？*十一、 試解釋溶源性、溶源菌、溫和噬菌體。*十二、 試列表比較動、植物病毒與T偶數(shù)噬菌體在增殖過程中的不同點。參考答案：一、真病毒：由核酸和/或蛋白質(zhì)等成分組成的超顯微非細(xì)胞生物。亞病毒：僅由核酸或蛋白兩種組分中的一種組成的病毒，包括類病毒(Viroids)、衛(wèi)星病毒（Satellite virus）、衛(wèi)星核酸、缺陷干擾顆粒、朊病毒。類病毒：是一類只含RNA，專性寄生在活細(xì)胞內(nèi)的分子病原體。擬病毒：類類病毒或者殼內(nèi)類病毒，一類包裹在真病毒粒中的有缺陷的類病毒。朊病毒：又稱普利昂，或者蛋白侵染子，是一類不含核酸的傳染性蛋白質(zhì)分子，能夠引起宿主體內(nèi)現(xiàn)成的同類蛋白質(zhì)分子（P

3、rPc）發(fā)生與其類似的感應(yīng)性構(gòu)想變化。二、三、包涵體：宿主細(xì)胞核內(nèi)或者細(xì)胞質(zhì)中毒?；蛘邅唵挝痪奂慕Y(jié)果，也有可能包含有細(xì)胞成分，如核糖體或者染色質(zhì)。他們都會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)?？瞻撸河蓜游锊《驹谒拗鲉螌蛹?xì)胞培養(yǎng)物上形成?？莅撸河芍参锊《驹谥参锶~片上形成的枯斑。噬菌斑：噬菌體在菌苔上形成的“負(fù)菌落”?？瞻摺⒖莅吆褪删哌@類“群體形態(tài)”有助于對病毒的分離、純化、鑒別和計數(shù)等許多實際工作。四、TMV外形呈直桿狀，長300nm，寬15nm，中空（內(nèi)徑4nm）。由95%衣殼蛋白和5%單鏈RNA（ssRNA）組成。衣殼含2130個皮鞋狀的蛋白亞基即衣殼粒，每個亞基含158個氨基酸，相對分子質(zhì)量為17500.（這

4、里的亞基叫衣殼粒，其實在這里用原體更加貼切）亞基以逆時針方向做螺旋狀排列，共圍繞130圈。五、規(guī)則的多面體，具有20個等邊三角形和12個頂點，42個殼粒。衣殼粒（capsomer）五鄰體 含五個亞基，位于12個頂點上六鄰體 含六個亞基，構(gòu)成棱和面。每個亞基叫做原體。六、雙對稱Binal symmetry頭端：二十面體, 雙鏈DNA 170kbp；頸部；尾端：螺旋狀，由部分組成：尾鞘、尾管、基板、刺突、尾絲。七、烈性噬菌體：在短時間內(nèi)能夠完成吸附、侵入、增殖、成熟和裂解五個過程而實現(xiàn)其繁殖的噬菌體叫做烈性噬菌體。裂解性生活史： 吸附 侵入 增殖 成熟 裂解八、效價：每毫升病毒懸液的感染單位數(shù)量。

5、測定方法：形成噬菌斑單位數(shù)（感染中心數(shù)）；雙層平板法。九、雙層平板法：預(yù)先分別配制含2%和1%瓊脂的底層培養(yǎng)基和上層培養(yǎng)基。先用底層培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿澆上一層平板，待凝固后，再把預(yù)先融化并冷卻到45以下，加有較濃的敏感宿主和一定體積待測噬菌體樣品的上層培養(yǎng)基，在試管中搖勻后，立即倒在底層培養(yǎng)基上鋪平待凝，然后在37下保溫。一般經(jīng)過10余小時后即可對噬菌體進(jìn)行計數(shù)。十、一步生長曲線：定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的試驗曲線。分為三個大期即潛伏期、裂解期（上升期）和平穩(wěn)期。而潛伏期又可分為隱晦期（隱蔽期）和胞內(nèi)累積期。潛伏期之隱晦期：宿主不含有任何完整的具有侵染性的毒粒，此時正在進(jìn)行噬菌體核酸復(fù)制和蛋白質(zhì)

6、衣殼的合成；潛伏期之胞內(nèi)累積期：有侵染性的毒粒增加，但是不裂解出胞。裂解期：游離毒粒變多。平穩(wěn)期：感染后的宿主細(xì)胞已經(jīng)完全裂解，效價達(dá)到最高值。十一、溶源性：溫和噬菌體侵入并不引起宿主細(xì)胞裂解，而是將基因組整合到宿主基因組上，隨宿主基因的復(fù)制而復(fù)制。溶源菌：被溫和噬菌體侵染而不裂解的宿主。溫和噬菌體：引起溶源性的噬菌體。十二、比較項目動物病毒植物病毒T偶噬菌體生活史吸附侵入生物合成裝配成熟與組裝被動侵入脫殼生物合成組裝出胞吸附侵入增殖成熟裂解圖示生活周期增殖過程dsDNA復(fù)制周期：（1）病毒與細(xì)胞結(jié)合；（2）病毒進(jìn)入細(xì)胞，去包膜；（3）脫殼；（4）病毒DNA進(jìn)入細(xì)胞核；（5）病毒基因組復(fù)制，合

7、成子代病毒及病毒mRNA；（6）以病毒基因轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)；（7）病毒mRNA翻譯病毒子代蛋白，包括早期蛋白和晚期蛋白；（8）裝配子代病毒；（9）出核，同時披上包膜；（10）釋放到胞外絲狀，正鏈RNA 病毒RNA 復(fù)制依賴于宿主或病毒編碼的反轉(zhuǎn)錄酶蛋白質(zhì)合成病毒基因組作為mRNA新的病毒粒子自裝配早期轉(zhuǎn)錄早期翻譯次早期轉(zhuǎn)錄次早期翻譯DNA復(fù)制晚期轉(zhuǎn)錄晚期翻譯裝配出大量子代噬菌體RNA反轉(zhuǎn)錄病毒：（1）病毒體與細(xì)胞受體（CD4）結(jié)合；（2）病毒進(jìn)入細(xì)胞，去包膜；（3）脫衣殼；（4）以病毒基因組（RNA）為模板，由病毒逆轉(zhuǎn)錄酶作用逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，形成中間體；（5）以cDNA為模板合成雙

8、鏈DNA；（6）雙鏈DNA進(jìn)入細(xì)胞核；（7）整合到宿主細(xì)胞染色體，成為原病毒(provirus)；（8）原病毒被激活，轉(zhuǎn)錄出子代RNA；（9）一部分子代RNA與核糖體結(jié)合，翻譯子代蛋白，另一部分直接裝配為子代病毒體；（10）翻譯子代結(jié)構(gòu)蛋白和酶蛋白；（11）合成的酶蛋白參與逆轉(zhuǎn)錄；（12）子代病毒體形成；（13）子代病毒獲包膜并釋放簡單概括DNA和RNA病毒各采用不同的策略，DNA病毒策略和噬菌體的基本相同；RNA病毒采用四種不同的策略：+RNA病毒直接自己翻譯出蛋白質(zhì)（該蛋白質(zhì)行使特定功能，它的加工修飾由宿主和病毒編碼的酶進(jìn)行切割），它同時復(fù)制出RNA，然后該RNA復(fù)制出+RNA。RNA病毒

9、在依賴RNA的RNA聚合酶（轉(zhuǎn)錄酶）的轉(zhuǎn)錄下轉(zhuǎn)錄出+mRNA，然后翻譯出蛋白質(zhì)，同時+mRNA在依賴RNA的RNA聚合酶（復(fù)制酶）的復(fù)制下復(fù)制出RNA。-RNA病毒通過轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)錄出+mRNA，+mRNA翻譯出蛋白質(zhì)；同時-RNA復(fù)制出RNA，它再復(fù)制出-RNA。逆轉(zhuǎn)錄病毒則是先弄出+RNA/-DNA雜交雙鏈，然后核糖核酸酶H將+RNA降解掉，留下的-DNA復(fù)制出另一條DNA變成DNA，該DNA一方面轉(zhuǎn)錄出毒粒+RNA一方面轉(zhuǎn)錄出+mRNA用于合成蛋白質(zhì)。（圖如下）以TMV為例，它是一個+RNA，可以如左側(cè)所述，直接做mRNA翻譯蛋白質(zhì)，但是mRNA的產(chǎn)生很復(fù)雜，其他過程如左側(cè)的，外殼蛋白和RNA基因組合成后，以一種高度有序的過程完成組裝：原體聚集成雙圓盤，然后重排呈螺旋管，RNA通過中心的管道在生長末端形成環(huán)，以這種方式RNA很