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文檔簡介
1、1.繼代培養(yǎng) 繼代培養(yǎng)是指愈傷組織在培養(yǎng)基上生長段時間后,營養(yǎng)物枯竭,水分散失,并已經(jīng)積累了一些代謝產(chǎn)物,此時需要將這些組織轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上,這種轉(zhuǎn)移稱為繼代培養(yǎng)或傳代培養(yǎng)。2全能細胞 全能細胞是能夠表達生物體基因組的任何一種基因,并能分化出該生物體內(nèi)任何一種類型的細胞,進而發(fā)育為一個完全相同生物體。 3顯微化學鑒定: 顯微化學鑒定法是利用化學試劑處理植物器官,組織,細胞,通過化學反應,在顯微鏡下直接觀測,鑒別細胞壁的組分以及細胞中含有物的性質(zhì)和分布的一種快速定性及定位方法。4酶的活性中心(active center): 與底物接觸并且發(fā)生反應的部位就稱為酶的活性中心。5內(nèi)生真菌的涵義 內(nèi)生
2、真菌(Endophytes)是指其在生活史的某一階段營表生的腐生真菌,對宿主暫時沒傷害的潛伏性病原真菌或菌根真菌,一方面植物為真菌提供光合產(chǎn)物和礦物質(zhì);另一方面內(nèi)生真菌的代謝物能刺激植物生長發(fā)育,提高寄主植物對生物脅迫和非生物脅迫的抵抗能力6抗原 抗原(antigen Ag)是指能刺激機體免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應答,并能與其產(chǎn)生的抗體和(或)致敏淋巴細胞在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。7. 細胞的固定化利用物理或化學的手段將游離的細胞定位于限定的空間區(qū)域并使其保持活性和可反復使用的一種技術(shù)稱之為細胞的固定化,該細胞呈為固定化細胞。8. 外植體 外植體是指植物組織培養(yǎng)中用來進行離體無菌培養(yǎng)的離體材料
3、,可以是器官、組織、細胞和原生質(zhì)體等。 9. DNA免疫的導入方式直接肌肉注射微離子轟擊介導的DNA免疫其他途徑以下內(nèi)容為百度搜索結(jié)果DNA芯片定義1: 可在同一時間對大量樣品進行高通量分析的技術(shù)。即利用類似于大規(guī)模集成電路的技術(shù)手段,借助光刻技術(shù)及化學固相合成法,將DNA探針陣列分布于玻璃或硅基片上,與液相中待測組分進行雜交,通過檢測熒光或其他標記物而分析反應結(jié)果。所屬學科: 免疫學(一級學科);應用免疫(二級學科);免疫學檢測和診斷(三級學科)定義2: 高密度的DNA陣列,是DNA陣列的發(fā)展。幾平方厘米的面積中可以包含幾萬個不同序列的寡核苷酸或互補DNA點陣等,可用于大規(guī)模的核酸分子雜交分
4、析。所屬學科: 生物化學與分子生物學(一級學科);方法與技術(shù)(二級學科)定義3: 高密度的DNA陣列,是DNA陣列的發(fā)展。幾平方厘米的面積中可以包含幾萬個不同序列的寡核苷酸或cDNA點陣等,可用于大規(guī)模的核酸分子雜交分析。所屬學科: 細胞生物學(一級學科);細胞生物學技術(shù)(二級學科)定義4: 一種將大量DNA片段按預先設計的方式密集排列在指蓋大小的硅片、玻片或塑料片上以便進行高通量檢測的系統(tǒng)。所屬學科: 遺傳學(一級學科);基因組學(二級學科)酶抑制劑酶抑制劑是一類可以結(jié)合酶并降低其活性的分子。由于抑制特定酶的活性可以殺死病原體或校正新陳代謝的不平衡,許多相關藥物就是酶抑制劑。一些酶抑制劑還被
5、用作除草劑或農(nóng)藥。并非所有能和酶結(jié)合的分子都是酶抑制劑,酶激活劑也可以與酶結(jié)合并提高其活性。載體定義1:可以插入核酸片段、能攜帶外源核酸進入宿主細胞,并在其中進行獨立和穩(wěn)定的自我復制的核酸分子?;蚬こ讨袕V泛應用的載體多來自人工改造的細菌質(zhì)粒、噬菌體或病毒核酸等。多數(shù)載體是DNA分子,但某些RNA分子也能用做載體。所屬學科:生物化學與分子生物學(一級學科);方法與技術(shù)(二級學科)定義2:能夠承載活性物質(zhì),改善其分散性,并有良好化學穩(wěn)定性的可飼物質(zhì)。所屬學科:水產(chǎn)學(一級學科);水產(chǎn)飼料與肥料(二級學科)定義3:在分子克隆中攜帶外源DNA的質(zhì)粒、噬菌體或重組體。所屬學科:細胞生物學(一級學科);
6、細胞培養(yǎng)與細胞工程(二級學科)定義4:在分子克隆中攜帶外源DNA的質(zhì)粒、噬菌體或重組體。所屬學科:遺傳學(一級學科);分子遺傳學(二級學科)抗體定義1:能與相應抗原(表位)特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。所屬學科:免疫學(一級學科);免疫系統(tǒng)(二級學科);免疫分子(三級學科)定義2:在人和動物體內(nèi),由于抗原或半抗原入侵刺激機體而在細胞中產(chǎn)生的免疫球蛋白。能可逆、非共價、特異地與相應抗原結(jié)合,形成抗原-抗體復合體。所屬學科:生物化學與分子生物學(一級學科);總論(二級學科)定義3:機體內(nèi)B細胞在抗原刺激下所產(chǎn)生的具特異性免疫功能的球蛋白。所屬學科:水產(chǎn)學(一級學科);水產(chǎn)生物病害及防治(二級學
7、科)定義4:具有抗原結(jié)合部位,能與抗原分子上相應表位發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。所屬學科:細胞生物學(一級學科);細胞免疫(二級學科)發(fā)酵工程發(fā)酵工程,是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段,利用微生物的某些特定功能,為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品,或直接把微生物應用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面?;虮磉_定義1:使基因所攜帶的遺傳信息表現(xiàn)為表型的過程。包括基因轉(zhuǎn)錄成互補的RNA序列。對于結(jié)構(gòu)基因,信使核糖核酸(mRNA)繼而翻譯成多肽鏈,并裝配加工成最終的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。所屬學科:生物化學與分子生物學(一級學科);基
8、因表達與調(diào)控(二級學科)定義2:通過轉(zhuǎn)錄和翻譯,從DNA分子編碼的遺傳信息產(chǎn)生RNA和蛋白質(zhì)的過程。所屬學科:細胞生物學(一級學科);細胞分化與發(fā)育(二級學科)定義3:基因通過轉(zhuǎn)錄和翻譯呈現(xiàn)表型效應的過程。所屬學科:遺傳學(一級學科);分子遺傳學(二級學科)酶的抑制劑有幾種?1、不可逆抑制劑:如烷化劑、有機磷、重金屬鹽、氰化物等2、可逆抑制劑:包括a、競爭性抑制劑,抑制劑與底物競爭性結(jié)合酶反應中心,使Km增大,而Vmax不變 b、非競爭性抑制劑,酶與抑制劑結(jié)合后還能與底物結(jié)合,但活性降低,使Vmax減小,而Km不變c、反競爭性抑制劑,酶只能與底物結(jié)合后才能與抑制劑結(jié)合,Vmax與Km都減小可逆
9、抑制劑可用透析等方法除去,使酶恢復作用生物技術(shù)學科、范圍定義:應用生命科學研究成果,以人們意志設計,對生物或生物的成分進行改造和利用的技術(shù)?,F(xiàn)代生物技術(shù)綜合分子生物學、生物化學、遺傳學、細胞生物學、胚胎學、免疫學、化學、物理學、信息學、計算機等多學科技術(shù),可用于研究生命活動的規(guī)律和提供產(chǎn)品為社會服務等。生物技術(shù)(biotechnology)也譯成生物工程,生物學研究與應用的技術(shù)方面,包括,基因工程、細胞工程、發(fā)酵工程和酶工程,現(xiàn)代生物技術(shù)發(fā)展到高通量組學(omics)芯片技術(shù)、基因與基因組人工設計與合成生物學等系統(tǒng)生物技術(shù)。PCR的反應條件PCR反應條件為溫度、時間和循環(huán)次數(shù)。溫度與時間的設置
10、: 基于PCR原理三步驟而設置變性-退火-延伸三個溫度點。在標準反應中采用三溫度點法,雙鏈DNA在9095變性,再迅速冷卻至40 60,引物退火并結(jié)合到靶序列上,然后快速升溫至7075,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物鏈沿模板延伸。對于較短靶基因(長度為100300bp時)可采用二溫度點法, 除變性溫度外、退火與延伸溫度可合二為一,一般采用94變性,65左右退火與延伸(此溫度Taq DNA酶仍有較高的催化活性)。變性溫度與時間:變性溫度低,解鏈不完全是導致PCR失敗的最主要原因。一般情況下,9394min足以使模板DNA變性,若低于93則需延長時間,但溫度不能過高,因為高溫環(huán)境對酶的活
11、性有影響。此步若不能使靶基因模板或PCR產(chǎn)物完全變性,就會導致PCR失敗。退火(復性)溫度與時間:退火溫度是影響PCR特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至4060,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。由于模板DNA 比引物復雜得多,引物和模板之間的碰撞結(jié)合機會遠遠高于模板互補鏈之間的碰撞。退火溫度與時間,取決于引物的長度、堿基組成及其濃度,還有靶基序列的長度。對于20個核苷酸,G+C含量約50%的引物,55為選擇最適退火溫度的起點較為理想。引物的復性溫度可通過以下公式幫助選擇合適的溫度:Tm值(解鏈溫度)=4(G+C)2(A+T)復性溫度=Tm值-(510)在Tm值允許范圍內(nèi), 選擇較高的復性溫度可大
12、大減少引物和模板間的非特異性結(jié)合, 提高PCR反應的特異性。復性時間一般為3060sec,足以使引物與模板之間完全結(jié)合。延伸溫度與時間:Taq DNA聚合酶的生物學活性:7080 150核苷酸/S/酶分子70 60核苷酸/S/酶分子55 24核苷酸/S/酶分子高于90時, DNA合成幾乎不能進行。PCR反應的延伸溫度一般選擇在7075之間,常用溫度為72,過高的延伸溫度不利于引物和模板的結(jié)合。PCR延伸反應的時間,可根據(jù)待擴增片段的長度而定,一般1Kb以內(nèi)的DNA片段,延伸時間1min是足夠 的。34kb的靶序列需34min;擴增10Kb需延伸至15min。延伸進間過長會導致非特異性擴增帶的出
13、現(xiàn)。對低濃度模板的擴增,延伸時間要稍長些。質(zhì)粒DNA的提取方法堿裂解法:此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增、銀染序列分析。煮沸法,酚氯仿裂解法,堿解法,還有堿變性法、SDS法、 羥基磷灰石層析法等受體特點 特異性:受體只存在于某些特殊的細胞中。如激素作用的靶細胞,神經(jīng)末梢遞質(zhì)作用的效應器細胞。黃體生成素可作用于睪丸的間質(zhì)細胞,就是因為間質(zhì)細胞有其受體;而卵泡刺激素只能作用于曲細精管的支持細胞。受體還能識別配體,并能與其活性部位發(fā)生特異性結(jié)合。如子宮細胞中的雌激素受體只能與17羥二醇結(jié)合,而不能與17- 羥雌二醇結(jié)合,更不能與睪酮和孕酮結(jié)合。親和性:受體與其相應的配體有高度的親和性。一般血液中激素的濃度很低,每升只有1010摩爾。但仍足以同其受體結(jié)合,發(fā)揮正常的生理作用。這說明受體對激素的親和力很強。飽和性:受體可以被配體飽和。特別是胞漿受體,數(shù)量較少,少量激素就可以達到飽和結(jié)合。如在對甾體激素敏感的細胞中胞漿受體的數(shù)目最高每個細胞含量為10萬個,雌激素受體,每個細胞中含量只有
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