1、動物細胞工程動物細胞與組織培養(yǎng),燒傷病人圖片,異體皮膚移植圖片,動物細胞培養(yǎng),動物細胞融合,單克隆抗體制備,細胞核移植,動物細胞工程技術,動物細胞工程的基礎,動物細胞培養(yǎng),1、概念（人教版） 動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。,討論,1、動物細胞培養(yǎng)的原理是什么？ 2、從動物機體中要取出哪些相關組織？并解釋原因。,3、組織分散成單個細胞的方法是什么？其理論依據(jù)是什么？ 4、動物細胞體外培養(yǎng)需要滿足哪些條件？,閱讀課本觀察圖片，簡述動物細胞培養(yǎng)的基本過程,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,胰蛋白酶,剪碎,單個細胞,加培養(yǎng)

2、液,制成,細胞懸浮液,10代 細胞,部分細胞“癌變”，遺傳物質(zhì)改變，無限傳代,動物細胞培養(yǎng)不能 最終培養(yǎng)成動物體,50代細胞,細胞貼壁,剝離、分瓶,細胞株,細胞,細胞系,2、過程,動物細胞生長特性,細胞貼壁： 懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上， 稱為細胞貼壁。 要求： 培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。 細胞的接觸抑制： 當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。,細胞貼壁過程,50代細胞,無限傳代,細胞株,細胞系,如何界定細胞株和細胞系？,多數(shù)組織細胞固定在表面生長和分裂。,隨細胞增多，細胞就會停止分裂增殖,遺傳物質(zhì)改變,思考討論,1.

3、動物細胞培養(yǎng)取材時，一般是取胚胎組織或幼齡動物的組織或器官，請解釋原因。,細胞的衰老與動物機體的衰老有著密切的關系，細胞的增殖能力與供體的年齡有關，幼齡動物細胞增殖能力強，有絲分裂旺盛，老齡動物則相反。所以，一般來說幼年動物的組織細胞比老年動物的組織細胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細胞的分化程度越低，則增殖能力越強，所以更容易培養(yǎng)。,腫瘤組織或細胞 正常組織或細胞,拓展-動物組織或細胞培養(yǎng)的難易程度,幼體組織或細胞 老齡組織或細胞,分化程度低的組織或細胞 分化程度高的組織或細胞,2、人類一般保存的是哪類細胞呢？為什么？,保存10代以內(nèi)的細胞，因為其生物學特性未發(fā)生大的變化，最接近于體內(nèi)組織或細胞的生長

4、特性，很適合用于藥物測試、基因表達等實驗研究。,3、在動物細胞培養(yǎng)過程中，為什么要用胰蛋白酶對取出的動物組織進行處理？,胰蛋白酶處理動物組織，可以使動物組織細胞間的膠原纖維和細胞外的其他成分酶解，獲得單個細胞;成塊的組織細胞靠在一起,彼此限制了細胞的生長和增殖.,.植物組織培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞的嗎？ .胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細胞間的物質(zhì)是什么成份？ .細胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能將細胞消化掉嗎？ .既然胰蛋白酶能將細胞消化掉，那將動物組織分散成單個細胞要注意什么問題呢？能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？為什么？,進一步思考：,否,胰蛋白酶水解蛋白質(zhì),蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)和磷脂,

5、能,注意時間的控制,不能，因為兩者的最適PH不同，而正常組織細胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適PH較接近,多細胞動物和人體的細胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學的知識，認為體外培養(yǎng)細胞應該模擬內(nèi)環(huán)境的哪些內(nèi)容呢？,動物細胞培養(yǎng)條件：,1、無菌、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）,2、必須的營養(yǎng)物質(zhì) （葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生長因子、動物血清等。）,保證細胞順利的生長增殖,3、適宜的溫度和pH 36.50.5; pH：7.2-7.4,4、充足的氧氣和適宜的酸堿度 O2和CO2（95%空氣和5% CO2 ）,問題：,1、培養(yǎng)基的類型,合成培養(yǎng)基：成分明確，

6、便于控制試驗條件,2、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組織培養(yǎng)基有何獨特之處？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。,獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基（動物體細胞大都生活在液體的環(huán)境） 2、成分中有動物血清等,獲得細胞,細胞的全能性,細胞株、細胞系,植物體,培養(yǎng)結果,或細胞產(chǎn)物,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細胞增殖,原理,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項目,植物組織和動物細胞培養(yǎng)的比較,動物細胞培養(yǎng)應用,大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體） 獲得大量自身的皮膚細

7、胞，用于植皮 培養(yǎng)的動物細胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性 為治療和預防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù),課堂小結,動物細胞和組織培養(yǎng)（原理、材料選擇及原因、一般過程、培養(yǎng)條件、主要應用）,注意： 概念理解：原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、細胞株 、細胞系 胰蛋白酶處理的原因、目的和注意事項 動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的區(qū)別,1、在動物細胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細胞是 -（ ） A細胞系 B細胞株 C原代細胞 D傳代細胞,2、動物細胞工程技術的基礎是 -（ ） A.動物細胞融合 B.單克隆抗體 C.胚胎移植 D.動物細胞培養(yǎng),A,D,課堂反饋練習,3、用于動物細胞培養(yǎng)的組織和細胞大都取自胚胎或出

8、生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織細胞 （ ）A.容易產(chǎn)生各種變異 B具有更強的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力強,D,4、下列屬于動物細胞工程中的工具是（ ） A限制性內(nèi)切酶 BDNA連接酶 C胰蛋白酶 D果膠酶,C,5、在動物細胞培養(yǎng)的有關敘述中，正確的是（ ） A動物細胞培養(yǎng)的目的就是為了獲得大量的細胞分泌蛋白 B動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶處理使細胞分散 C細胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中 D培養(yǎng)至50代后繼續(xù)傳代的細胞是細胞株 6、在動物細胞培養(yǎng)中有部分細胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱之為（ ）A原代培養(yǎng) B傳代培養(yǎng) C細胞株 D細胞系,B,D,7、動物細胞培養(yǎng)的正確過程是（ ） A.原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞系 B. 原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞系細胞株 C.傳代培養(yǎng)細胞系原代培養(yǎng)細胞株 D. 原代培養(yǎng)細胞系傳代培養(yǎng)細胞株 8、下列與動物細胞培養(yǎng)有關的表述中，不正確的是（ ） A培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清 B原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長停滯 C動物細胞培養(yǎng)一般能夠傳到4050代，但其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變 D動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細胞,A,C,動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng) 基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。 右圖是