1、霉菌毒素的危害及解決措施,一、霉菌知識(shí)簡(jiǎn)介,霉菌是“絲狀真菌”的統(tǒng)稱。凡是在基質(zhì)上長(zhǎng)成絨毛狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀絲體的真菌，稱為霉菌。,（一）飼料常見(jiàn)的霉菌,飼料中常見(jiàn)的霉菌包括曲霉屬、青霉屬、鐮刀菌屬等十幾個(gè)種屬。,曲霉屬,黃曲霉,黑曲霉,灰綠曲霉,米曲霉,土曲霉,煙曲霉,曲霉屬,雜色曲霉,棒曲霉,曲霉屬,青霉屬,柑桔青霉污染,圓弧青霉,鐮刀菌屬,粉紅鐮刀菌,玉米中的霉菌(白色為鐮刀菌),常見(jiàn)霉菌的顯微結(jié)構(gòu),曲霉的顯微結(jié)構(gòu),鐮刀菌的顯微結(jié)構(gòu),青霉的顯微結(jié)構(gòu),常見(jiàn)霉菌的顯微結(jié)構(gòu),電子顯微鏡下的青霉,電子顯微鏡下的黃曲霉,（二）霉菌生長(zhǎng)的四個(gè)基本條件,適宜的溫度 總的來(lái)說(shuō)，大多數(shù)霉菌屬于中溫性微生

2、物。一般危害谷物的霉菌孢子在7即可發(fā)芽生長(zhǎng)，低溫時(shí)生長(zhǎng)緩慢，在2432時(shí)生長(zhǎng)最快。 適宜的水分和濕度 大多數(shù)霉菌的發(fā)芽需要約75的相對(duì)濕度，在85 以上的相對(duì)濕度時(shí)生長(zhǎng)迅速。 氧氣 氮和能源,（三）飼料霉變的危害,1. 適口性降低； 2. 飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值降低； 3. 動(dòng)物霉菌毒素中毒； 4. 動(dòng)物霉菌感染； 5. 影響畜產(chǎn)品安全,二、霉菌毒素危害（一）霉菌毒素危害的特點(diǎn),1. 群發(fā)性和無(wú)傳染性2. 無(wú)免疫性3. 地域性和季節(jié)性 4. 引起損害的多樣性5. 中毒癥狀復(fù)雜多樣,（二）相應(yīng)的霉菌毒素,霉菌毒素是霉菌在基質(zhì)生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物。 霉菌毒素聯(lián)合作用往往造成危害增強(qiáng)。,（三）飼料

3、霉變與霉菌毒素污染間的關(guān)系,1.自然界中只有很少一部分霉菌可以產(chǎn)毒； 2.霉菌毒素與其產(chǎn)毒菌株間無(wú)嚴(yán)格對(duì)應(yīng)關(guān)系； 3.飼料霉變霉菌毒素污染； 4.飼料中霉菌總數(shù)不超標(biāo)飼料安全,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,1 黃曲霉毒素 1.1 概述 黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2。主要存在于花生粕、玉米、棉菜粕等。,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,1. 2 危害 1.2.1 靶器官 肝臟。 1.2.2 危害特點(diǎn) 豬：臨床表現(xiàn)為精神沉郁厭食，生長(zhǎng)受阻，體重減輕，被毛粗糙，進(jìn)一步發(fā)展為黃疸，貧血及出血性腹瀉，并出現(xiàn)以低凝血酶原血為特征的凝血病。肝臟損傷，各種酶含量升高，包括丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶，堿性磷酸酶等。當(dāng)豬出

4、現(xiàn)急性黃疸、出血或凝血病不能以其他原因解釋時(shí)，應(yīng)考慮為黃曲霉素素中毒;出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢、營(yíng)養(yǎng)不良等慢性征兆以及持續(xù)發(fā)生輕度傳染病時(shí)，也應(yīng)提示黃曲霉毒素中毒;當(dāng)出現(xiàn)特征性肝損傷和臨床化學(xué)變化時(shí)，應(yīng)明確提示為黃曲霉毒素中毒。,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,雞：臨床表現(xiàn)為食欲不振，生長(zhǎng)緩慢，產(chǎn)蛋率下降，皮下出血，死亡率提高。剖檢可見(jiàn)肝腎腫大蒼白，心包積水，膽囊擴(kuò)張，卡他性腸炎。顯微鏡檢可見(jiàn)肝臟脂肪變性，膽管增生,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,1.3 國(guó)家相關(guān)限量標(biāo)準(zhǔn) 黃曲霉毒素B1允許量（GB 13078-2001 ） 玉米花生餅（粕）、棉籽餅（粕）、菜籽餅（粕） 50g/kg 豆粕 30g/kg

5、仔豬配合飼料及濃縮飼料 10g/kg 生長(zhǎng)肥育豬、種豬配合飼料及濃縮飼料 20g/kg 肉用仔雞前期、雛雞配合飼料及濃縮飼料 10g/kg 肉用仔雞后期、生長(zhǎng)雞、產(chǎn)蛋雞配合飼料及濃縮飼料 20g/kg 肉用仔鴨前期、雛鴨配合飼料及濃縮飼料 10g/kg 肉用仔鴨后期、生長(zhǎng)鴨、產(chǎn)蛋鴨配合飼料及濃縮飼料 15g/kg 鵪鶉配合飼料及濃縮飼料 20g/kg 奶牛精料補(bǔ)充料 10g/kg 肉牛精料補(bǔ)充料 50g/kg,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,2 玉米赤霉烯酮（F-2毒素） 2.1 概述 是結(jié)構(gòu)相似的一類化合物，種類多. 主要存在于玉米、大麥、小麥及谷物加工副產(chǎn) 品等。,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素

6、的危害,2.2 危害 2.2.1 靶器官 生殖系統(tǒng)。 2.2.2 危害特點(diǎn) 玉米赤霉烯酮主要表現(xiàn)為雌激素樣作用，動(dòng)物表現(xiàn)為雌激素亢進(jìn)證。 急性中毒時(shí)，母豬和去勢(shì)母豬乳腺增生，陰戶紅腫，子宮肥大和卵巢萎縮；公豬，包皮長(zhǎng)，陰莖腫大，乳腺腫脹。亞急性中毒時(shí)母豬不育，流產(chǎn)，死胎，木乃伊，產(chǎn)仔數(shù)減少及仔豬體弱，存活的小豬出現(xiàn)睪丸萎縮，乳腺增大等雌性化征象。母牛癥狀與豬相似。雞可見(jiàn)泄殖腔外翻，輸卵管擴(kuò)張，產(chǎn)蛋率下降等。 2.2.3 不同動(dòng)物對(duì)玉米赤霉烯酮的敏感性 豬禽反芻動(dòng)物。,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,3、T-2 毒素（單端孢霉烯族化合物） 、嘔吐毒素（DON） 3.1 危害特點(diǎn) 谷物及其加工副產(chǎn)

7、品特別是霉玉米是此類毒素主要來(lái)源。 靶器官是肝臟和腎臟，屬于組織刺激因子和致炎物質(zhì)，可直接損傷消化道黏膜。 具有使動(dòng)物嘔吐的作用。 動(dòng)物接觸此類毒素或產(chǎn)毒菌株的培養(yǎng)物，可引起局部皮膚刺激、炎癥甚至壞死。,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,4.2 相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 4.2.1 嘔吐毒素的允許量（GB 13078.3-2007 ） 豬、犢牛、泌乳期動(dòng)物配合飼料： 1 mg/kg 家禽、牛配合飼料 ：5 mg/kg 4.2.2 T-2毒素的允許量（GB 21693-2008 ） 豬、禽配合飼料 ： 1 mg/kg,（四）飼料中常見(jiàn)霉菌毒素的危害,4、赭曲霉素 主要由青霉菌、曲霉菌產(chǎn)生 易感動(dòng)物：豬、家禽

8、靶器官：腎臟 主要毒性作用：抑制蛋白質(zhì)合成 危害：增重減少、生產(chǎn)性能下降； 其他癥狀：腹瀉、飲水量增加、多尿、脫水等 產(chǎn)蛋下降，破蛋增多；腎臟腫大，尿酸鹽分泌增多；腺胃肌胃受影響,黃曲霉毒素、赭曲霉毒素和T2毒素 的致病作用及對(duì)免疫作用影響的比較,三、霉菌毒素的解決措施（一）霉菌毒素的預(yù)防,1. 控制水分 控制飼料絕對(duì)水分（一般要求玉米、高粱、稻谷等的含水量應(yīng)不超過(guò)14%；大豆及其餅粕、麥類、糠麩類、甘薯干、木薯干等的含水量應(yīng)不超過(guò)13%；棉籽餅粕、菜籽餅粕、向日葵餅粕、亞麻仁餅粕、花生仁餅粕、魚粉、骨粉及肉骨粉等的含水量應(yīng)不超過(guò)12%） 飼料存儲(chǔ)環(huán)境的濕度 防止寄生蟲、昆蟲污染,（一）飼料防

9、霉,2. 使用防霉劑 目前普遍使用的防霉劑為有機(jī)酸（丙酸，山梨酸，苯 丙酸，膽氫醋酸，富馬酸等）及其鹽類。 3、抗霉育種 目前國(guó)外在花生抗霉育種方面已取得一定進(jìn)展 4、其它 輻射處理 低溫儲(chǔ)藏 低氧儲(chǔ)藏,霉菌數(shù)量與產(chǎn)生毒素量的關(guān)系,霉菌毒素污染現(xiàn)狀,FAO國(guó)際糧農(nóng)組織報(bào)道： 全球25%的谷物受到污染。 中國(guó)飼料檢測(cè)中心報(bào)道： 1、我國(guó)玉米、麩皮、飼料霉菌毒素檢出率100%； 2、玉米、麩皮、飼料霉菌毒素超標(biāo)率90%； 3、主要檢出的霉菌毒素是：玉米赤霉烯酮、T-2/DAS毒素（單端孢霉烯族）、黃曲霉毒素、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、煙曲霉毒素。,霉菌毒素檢測(cè)方法,飼料中霉菌及霉菌毒素的檢測(cè)方法主要有

10、目測(cè)法、 薄層色譜法(T LC) 、 高效液相色譜法(HP LC) 、 酶聯(lián)免疫法(E LISA) 、 放射免疫法(KIA)及氣相色譜法等。 快速試紙檢測(cè)法,（二）霉菌毒素脫毒處理,常用的脫毒方法 1、物理脫毒 2、化學(xué)脫毒法 3、吸附劑法 4、生物轉(zhuǎn)化脫毒劑,1、物理脫毒法,物理脫毒主要包括挑選霉粒、水洗法、晾曬法、輻射法等。這些方法耗時(shí)耗力，且水洗法對(duì)于難溶解于水的黃曲霉素、玉米赤霉烯酮、雜交曲霉毒素等效果不理想，需反復(fù)搓洗或粉碎水洗除毒。因此，這些方法主要針對(duì)農(nóng)戶和小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)用。目前此法已普遍使用,2、化學(xué)脫毒法,化學(xué)脫毒主要包括：氨水去毒法、堿煮去毒法。化學(xué)脫毒法效果較好，但有一定

11、的腐蝕性，也不適用于大批量的飼料原料。,3、吸附劑法,為了減少損失， 很多學(xué)者采用一些物質(zhì)作為霉菌毒素的吸附劑來(lái)處理霉變飼料， 即在飼料中添加可以吸附霉菌毒素物質(zhì)， 使毒素在經(jīng)過(guò)動(dòng)物腸道時(shí)不被動(dòng)物所吸收， 直接排出體外。這是目前應(yīng)用較廣,較為成熟、經(jīng)濟(jì)可行的一種毒素脫毒方法。,3、吸附劑法,1）無(wú)機(jī)吸附劑 活性碳 硅鋁酸鹽:是以蒙脫石、沸石、膨潤(rùn)土為主的一大類天然礦物質(zhì)吸附材料,吸附質(zhì)離子由于靜電引力作用聚集到吸附劑表面上 硅酸鹽進(jìn)入胃腸后,還可在消化道黏膜上形成一層保護(hù)性覆蓋膜,并與黏液糖蛋白結(jié)合,改善消化道黏膜的修復(fù)能力,提高黏膜屏障對(duì)攻擊因子的防御功能,阻止有害毒素、細(xì)菌、病毒進(jìn)入血液,

12、并連同所固定的攻擊因子隨消化道自身蠕動(dòng)排除體外。 霉可脫、 脫霉霸、 驅(qū)霉素,3、吸附劑法,2）有機(jī)吸附劑 目前主要是酵母細(xì)胞壁、甘露聚糖、葡甘聚糖及其衍生物等。,有機(jī)吸附劑對(duì)不同霉菌毒素的吸附率,霉菌毒素 吸附效率 (%) 總的黃曲霉毒素 （B1+B2+G1+G2） 85.23 玉米赤霉烯酮 Zeralenone 66.66 脫氧血腐鐮刀菌烯醇 （嘔吐毒素）DON 12.58 赭曲霉毒素 Ochratoxin 12.49 桔霉素 Citrinin 18.41 T-2 毒素 33.39 二乙酸藨草鐮刀菌烯醇 DAS 12.72 鐮刀菌毒素 Fusariotoxin X 7.87 伏馬菌素 Fu

13、monisin 67.00,3、吸附劑法,3）吸附劑法的局限性 任何一種單一的吸附劑都不能將所有霉菌毒素都吸附。 它們表現(xiàn)出了對(duì)維生素及礦物質(zhì)的非選擇性吸附能力，一旦把它們加入谷物或飼料中，某些營(yíng)養(yǎng)成份也可被它們吸附，而這些營(yíng)養(yǎng)成份的含量遠(yuǎn)高于毒素，結(jié)果吸附劑被營(yíng)養(yǎng)成份飽和吸附而不能吸附毒素。 一般來(lái)說(shuō)它們?cè)陲暳现械奶砑恿恳容^大，有的甚至要添加1%以上才有比較明顯的效果，這一方面會(huì)降低飼料的適口性，縮小飼料的配方空間，另一方面也會(huì)造成對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)特別是礦物質(zhì)、氨基酸、維生素和藥物的損失。,4、生物轉(zhuǎn)化脫毒劑,采用某些特殊的酶或者由某些微生物產(chǎn)生這些酶，將霉菌毒素進(jìn)行生物降解或者生物轉(zhuǎn)化而脫毒

14、對(duì)于單端孢菌霉烯族毒素，其12，13-環(huán)氧基是其毒性中心，采用脫環(huán)氧基酶將這個(gè)環(huán)氧基消除 被命名為BBSH 797(Heidler和Schatzmayr，2003)的優(yōu)桿菌，可以在動(dòng)物胃腸道內(nèi)定植并繁殖，并產(chǎn)生脫環(huán)氧基酶,4、生物轉(zhuǎn)化脫毒劑,Schatzmayr等(2006)從白蟻腸道分離出一種毛霉菌，命名為Trichosporon mycotoxinivorans(MTV)，可以產(chǎn)生將玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化脫毒所需要的酶。,4、生物轉(zhuǎn)化脫毒劑,這種技術(shù)的先進(jìn)性在于： 這種方法能將毒素徹底分解而不會(huì)有毒性物質(zhì)殘留。 采用吸附法脫毒時(shí)毒素雖然與吸附劑結(jié)合而被排出動(dòng)物體外，不會(huì)對(duì)動(dòng)

15、物造成損害，但是因?yàn)槎舅胤肿臃浅７€(wěn)定而不會(huì)被破壞，它們會(huì)在畜舍內(nèi)或者土壤中蓄積，并且在一定的溫度濕度和酸堿條件下會(huì)從吸附劑中解離出來(lái)而變成游離的毒素分子，人或者動(dòng)物接觸或食入這些毒素后又會(huì)產(chǎn)生危害。而生物轉(zhuǎn)化法則將毒素分子轉(zhuǎn)化成無(wú)毒的產(chǎn)物，無(wú)殘留，不會(huì)對(duì)環(huán)境造成有害影響； 這種脫毒方法特異性高 只針對(duì)霉菌毒素起作用而不會(huì)破壞飼料和原料中的其它成分，不會(huì)降低飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。生物轉(zhuǎn)化是通過(guò)酶的催化而進(jìn)行的，酶的催化作用具有高度的專一性，一種酶只能催化一個(gè)或者一類反應(yīng)的發(fā)生；,4、生物轉(zhuǎn)化脫毒劑,其局限性： 但實(shí)際應(yīng)用中,一是酶不耐熱,在飼料的制作過(guò) 程,尤其在顆粒飼料壓制的高溫過(guò)程中易于失活;二是酶脫毒法成本較高,難以接受。 微生物還有通過(guò)微生物的發(fā)酵來(lái)去除霉菌毒素, 但這種生物轉(zhuǎn)化過(guò)程往往存在緩慢及不完全的缺點(diǎn),5、營(yíng)養(yǎng)解毒法,抗氧化物質(zhì)的添加 飼料中添加一些抗氧化劑, 如維生素A、維生素C、維生素E和硒、色素等會(huì)緩解霉菌毒素對(duì)細(xì)胞的作用 蛋氨酸的添加 肝臟解毒的基礎(chǔ)是谷胱甘肽,蛋氨酸和胱氨酸是谷胱甘肽的組成部分。,小結(jié)