1、腸 桿 菌 科,概 述,腸桿菌科細(xì)菌是一大群居住在人和動(dòng)物腸道中生物學(xué)性狀近似的G-桿菌，多為腸道正常菌群，其中部分大腸埃希菌、志賀菌屬與沙門菌屬細(xì)菌對(duì)人類有致病作用。,腸桿菌科中與醫(yī)學(xué)有關(guān)的常見菌屬,埃希菌屬 大腸埃希菌 志賀菌屬 痢疾志賀菌 沙門菌屬 傷寒沙門菌 耶爾森菌屬 小腸結(jié)腸炎耶爾森菌 枸櫞酸菌屬 佛勞第枸櫞酸菌 克雷伯菌屬 肺炎克氏菌 腸桿菌屬 產(chǎn)氣腸桿菌 哈夫尼亞菌屬 蜂窩哈夫尼亞菌 沙雷菌屬 粘質(zhì)沙雷菌 變形桿菌屬 普通變形桿菌 摩根菌屬 摩氏摩根菌屬 普羅威登斯菌屬 雷氏普羅威登斯菌 愛德華菌屬 遲鈍愛德華菌,菌屬代表種,致病菌：如傷寒沙門菌、志賀菌等。 機(jī)會(huì)致病菌：一部分

2、細(xì)菌屬于正常菌群，但當(dāng)宿主免疫力降低或細(xì)菌移位至腸道以外部位時(shí)，即可引起機(jī)會(huì)性感染，如大腸埃希菌等。 由正常菌群轉(zhuǎn)變而來(lái)的致病菌：如引起胃腸炎的大腸埃希菌，即是由于獲得位于質(zhì)粒、噬菌體或毒力島上的毒力因子基因后而成為致病菌。,腸桿菌科的細(xì)菌與人類的關(guān)系：,腸桿菌科細(xì)菌的共同特性,1. 相似的形態(tài)染色 中等大小，G桿菌，無(wú)芽胞，多數(shù)有動(dòng)力。,2. 簡(jiǎn)單的培養(yǎng)條件 形成中等大小、S型菌落。,普通瓊脂平板：圓形、凸起、灰白色、S型菌落。,乳糖發(fā)酵試驗(yàn),3. 活潑的生化反應(yīng) 能分解多種糖類和蛋白質(zhì)，形成不同代謝產(chǎn)物，常用以區(qū)分不同菌屬和菌種。,初步鑒別腸道致病桿菌和腸道非致病桿菌,腸道致病桿菌,腸道非

3、致病桿菌,不發(fā)酵乳糖,發(fā)酵乳糖,4. 抗原構(gòu)造復(fù)雜,菌體抗原（O）,鞭毛抗原（H）,K（莢膜-capsule）抗原-位于O抗原表面，能阻止O抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合的物質(zhì)。,5. 抵抗力：不強(qiáng)。 膽鹽、煌綠等染料對(duì)非致病腸道桿菌有選擇性抑制作用，故常加入選擇培養(yǎng)基中，分離糞便中致病菌。, SS平板：含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠、 硫代硫酸鈉等。 Mac平板：含乳糖、中性紅指示劑、膽鹽等。 EMB平板：含乳糖、伊紅和美藍(lán)指示劑。 中國(guó)藍(lán)平板：含乳糖、中國(guó)藍(lán)和玫瑰紅酸指示劑。,常用的腸道選擇鑒別培養(yǎng)基,均含有乳糖和酸堿指示劑： 細(xì)菌分解乳糖產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基pH降低，指示劑呈酸性變色，指示劑不同，菌落呈

4、現(xiàn)不同的顏色。分解乳糖的細(xì)菌呈有色菌落，不分解乳糖的細(xì)菌為無(wú)色菌落。 含有不同的抑制劑： 對(duì)非致病菌腸道桿菌有不同程度的抑制作用，因此可以選擇性的培養(yǎng)腸道致病桿菌。,腸道選擇鑒別培養(yǎng)基的特點(diǎn),大腸埃希菌乳糖發(fā)酵（+），呈有色菌落。SS平板紅色菌落；Mac平板紅色菌落；EMB平板紫黑色有金屬光澤菌落。,EMB平板,Mac平板,糞 便,增菌培養(yǎng),腸道選擇鑒別培養(yǎng)基,革蘭染色,生化反應(yīng),取可疑菌落,血清學(xué)鑒定,腸道桿菌微生物學(xué)檢查原則,腸外標(biāo)本,腸道桿菌生化反應(yīng)活潑，抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，是其相關(guān)檢測(cè)的基本內(nèi)容。,第一節(jié) 埃希菌屬（Escherichia） 埃希菌屬有6個(gè)種，只有大腸埃希菌（E.coli）是

5、臨床最常見、最重要的一個(gè)菌種。 是人類和動(dòng)物腸道中的正常菌群，出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道，并終生伴隨。 在宿主免疫力下降或細(xì)菌侵入腸外組織器官后即可成為機(jī)會(huì)致病菌，引起腸道外感染。 一些血清型的大腸埃希菌具有致病性，能導(dǎo)致人類胃腸炎。,一、生物學(xué)性狀,G、中等大小桿菌、周鞭毛、有菌毛。 乳糖發(fā)酵試驗(yàn)+ 腸道選擇鑒別培養(yǎng)基形成有色菌落 膽鹽、煌綠等對(duì)大腸桿菌有抑制作用。,抗原結(jié)構(gòu) 主要有三種 菌體抗原（O-Ag）：170多種，存在于細(xì)胞壁脂多糖層。 鞭毛抗原（H-Ag）：56種以上。 莢膜抗原（K抗原）：多糖性質(zhì)，有100種以上。 大腸桿菌血清型表示法：O：K：H，例如O111：K58（B4）：H2

6、。,正常菌群，一般不致病。,1. 條件致病,某些帶有毒力因子基因的血清型，引起腸道感染。,兩大原因可以致病,細(xì)菌居住部位改變引起的腸外感染：尿路感染最常見。,2. 致病菌株,二、致病性,（一）致病物質(zhì),其他 內(nèi)毒素、莢膜等。,腸毒素,粘附素 包括：定植因子抗原、； 菌毛等。,不耐熱腸毒素和 耐熱腸毒素a、b 志賀毒素和,（1）不耐熱腸毒素（LT），分LT-I和LT-兩型。 對(duì)熱不穩(wěn)定。LT-與人類疾病無(wú)關(guān)；LT-I 是A-B型毒素，結(jié)構(gòu)與作用與霍亂腸毒素相似。 B亞單位 與腸上皮細(xì)胞受體結(jié)合 A亞單位 毒性成分激活腺苷酸環(huán)化酶,ATP cAMP,小腸液過(guò)度分泌,腸腔積液、腹瀉。,（2）耐熱腸毒

7、素（ST），分STa、STb兩型。 為低分子多肽，對(duì)熱穩(wěn)定。 STb與人類疾病無(wú)關(guān)。 機(jī)制為激活細(xì)胞鳥苷酸環(huán)化酶，使cGMP導(dǎo)致腹瀉。 （3）志賀毒素（Vero毒素），對(duì)腸黏膜細(xì)胞有毒性，引起腸黏膜細(xì)胞變性壞死。,（二）所致疾病,腸外感染 內(nèi)源性感染，多見于女性，如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎及其他化膿性炎癥。 胃腸炎 外源性感染，表現(xiàn)為急性腹瀉。根據(jù)其致病機(jī)制不同，可分為五種類型：腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）、腸致病性大腸桿菌（EPEC）、腸出血性大腸桿菌（EHEC）、腸集聚性大腸桿菌（EAggEC）。,菌株,作用部位,疾病癥狀,致病機(jī)制,引起胃腸炎的大腸埃希菌,腸

8、產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）,腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）,腸致病性大腸桿菌（EPEC）,腸出血性大腸桿菌（EHEC）,腸集聚性大腸 桿菌（EAggEC）,小腸,大腸,小腸,大腸,小腸,嬰幼兒、旅游者輕度或霍亂樣腹瀉,LT和（或）ST腸毒素導(dǎo)致腸分泌增加,兒童、成人痢疾樣膿血便,內(nèi)毒素破壞結(jié)腸上皮細(xì)胞致炎癥潰瘍,嬰兒非血性腹瀉,內(nèi)毒素破壞小腸上皮細(xì)胞致功能紊亂,出血性結(jié)腸炎，血便,志賀毒素引起腸黏膜細(xì)胞變性壞死,嬰兒持續(xù)性腹瀉,集聚性粘附上皮細(xì)胞，阻止液體吸收,標(biāo)本,選擇培養(yǎng)基,生化反應(yīng),血平板,腸內(nèi)感染：腸毒素、毒力因子和血清型。,血,增菌,可疑菌落,涂片,腸內(nèi),腸外,三、微生物學(xué)檢查法（一）

9、臨床標(biāo)本的檢查,腸外感染：尿路感染每毫升細(xì)菌數(shù)10萬(wàn),在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的檢測(cè)指標(biāo)。, 3個(gè)大腸菌群/1L飲水 5個(gè)大腸菌群/100ml飲料 100個(gè)細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水,（二）衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查,大腸菌群指數(shù),每1000ml水中大腸菌群數(shù),我國(guó)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：,細(xì)菌總數(shù),每1ml或1g樣品中細(xì)菌總數(shù),預(yù) 防, 尿道插管和膀胱鏡檢查嚴(yán)格無(wú)菌操作 加強(qiáng)食品和水的衛(wèi)生管理 人用疫苗正在研制中,治 療, 耐藥普遍，依據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇。 針對(duì)腹瀉及時(shí)糾正水和電解質(zhì)平衡,四、防治原則,第二節(jié) 志賀菌屬,一、生物學(xué)性狀 G、中等大小桿菌、有菌毛、無(wú)鞭毛。 不分解乳糖（宋內(nèi)志賀菌可分解乳糖） SS

10、平板上呈無(wú)色半透明菌落， 葡萄糖+、不產(chǎn)生H2S。,一、生物學(xué)性狀 O抗原（分類依據(jù)）包括群和型特異性抗原 K抗原是自患者新分離的某些菌株的菌體表面抗原。無(wú)分類意義。 抵抗力弱，對(duì)熱、酸敏感，糞便標(biāo)本立即送檢；對(duì)抗生素敏感，但易形成耐藥性。,抗原結(jié)構(gòu)與分類,志賀菌屬細(xì)菌有O和K兩種抗原，O抗原是分類的依據(jù)。 O抗原：群特異性、型特異性。,二、致病性,（一）致病物質(zhì) 侵襲力 菌毛：志賀菌首先通過(guò)菌毛粘附于回、結(jié)腸交接部位的腸粘膜上皮細(xì)胞。 型分泌系統(tǒng)：志賀菌通過(guò)型分泌系統(tǒng)向M細(xì)胞輸入侵襲蛋白，誘導(dǎo)M細(xì)胞細(xì)胞膜凹陷、內(nèi)吞。,M細(xì)胞：是存在于淋巴濾泡上皮之間，與腸上皮細(xì)胞排列在一起形成上皮屏障，并與

11、其內(nèi)陷成穹隆中的淋巴細(xì)胞、M和DC緊密接觸，能將抗原由腸腔轉(zhuǎn)運(yùn)到上皮下淋巴組織的細(xì)胞。 上皮細(xì)胞、M。,結(jié)果：志賀菌進(jìn)入上皮細(xì)胞使其免疫逃逸并在其間傳播、上皮細(xì)胞死亡；進(jìn)入M致其不完全吞噬并釋放IL1、M死亡，引起局部炎癥反應(yīng)。膿血粘液便,志賀菌侵襲腸粘膜上皮細(xì)胞過(guò)程 1.侵入M細(xì)胞；2.誘導(dǎo)吞噬；34.不完全吞噬；57.從粘膜上皮細(xì)胞基底部侵入胞漿中并增殖；810.侵入鄰近粘膜上皮細(xì)胞胞漿中，免疫逃逸。,回腸粘膜上皮細(xì)胞,8,IL1,內(nèi)毒素：強(qiáng)烈內(nèi)毒素，作用于局部，并可入血引起全身癥狀。 外毒素：由A群（、型）產(chǎn)生，又稱志賀毒素、Vero毒素，對(duì)腸黏膜細(xì)胞有毒性，引起腸黏膜細(xì)胞變性壞死。,腸

12、粘膜,內(nèi)毒素,腸壁植物神經(jīng),通透性增加,破壞,對(duì)內(nèi)毒素的吸收,內(nèi)毒素血癥,炎癥、潰瘍形成。,腸粘膜,膿血粘液便,腸功能紊亂,腸蠕動(dòng)失調(diào)、痙攣。,直腸擴(kuò)約肌痙攣： 腹痛、里急后重。,促進(jìn),（二）所致疾病,1. 急性細(xì)菌性痢疾 （1）典型的急性菌?。喊l(fā)熱、腹痛、膿血粘液便、里急后重。 （2）急性中毒性菌?。盒簽槎嘁?， 無(wú)明顯消化道癥狀，主要表現(xiàn)為全身性中毒癥狀。 2. 慢性細(xì)菌性痢疾：病程遷移兩個(gè)月以上 3. 帶菌者,型別多,感染灶局限于回、結(jié)腸粘膜層，一般不入血。,三、免疫性,主要靠消化道黏膜表面的SIgA，病后免疫期短。,四、微生物學(xué)檢查,及時(shí)送檢/暫用30%甘油緩沖鹽水保存,SS平板（無(wú)色

13、透明小菌落）,血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集）,最后診斷,分離培養(yǎng),新鮮膿血便/肛拭,雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng)）,快速診斷,協(xié)同凝集試驗(yàn)、熒光菌球試驗(yàn),熒光球大而發(fā)亮呈園球狀或多形性，結(jié)構(gòu)較疏松，周圍近似卷發(fā)狀。,（一）預(yù)防： 1. 對(duì)患者及時(shí)診斷、隔離、徹底治療。 2. 加強(qiáng)衛(wèi)生管理 3. 活疫苗： 減毒突變株：鏈霉素依賴株活疫苗 雜交株 營(yíng)養(yǎng)缺陷減毒株,（二）治療：易引起耐藥性，聯(lián)合用藥。,五、防治原則,一大群人與動(dòng)物腸道中的寄生菌 菌群菌型甚多，血清型在2463種以上。 僅少數(shù)對(duì)人致病，如傷寒、副傷寒。 其中部分為人畜共患病的病原菌,第三節(jié) 沙門菌屬（Salmonella）,對(duì)人致病 傷寒沙門菌 副傷

14、寒沙門菌 腸熱癥 （甲型、肖氏、希氏） 對(duì)動(dòng)物致病鼠傷寒沙門菌 食物中毒 豬霍亂沙門菌 敗血癥 腸炎沙門菌 （人畜共患?。?一、生物學(xué)性狀 G、中等大小桿菌、周鞭毛、有菌毛。 不分解乳糖；分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（除傷寒沙門菌）；多產(chǎn)生H2S。 SS平板上形成無(wú)色半透明的S型菌落,沙門菌抗原結(jié)構(gòu),O抗原：化學(xué)成分為脂多糖；耐熱；是沙門菌分組依據(jù)；相應(yīng)抗體為IgM抗體；與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)顆粒狀凝集。,H抗原：化學(xué)成分為蛋白質(zhì)；不耐熱；有雙相鞭毛抗原；是沙門菌分型依據(jù)；相應(yīng)抗體為IgG抗體；與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)絮狀凝集。,Vi抗原：能阻止O抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，即沙門菌K抗原。,4.抗原結(jié)構(gòu)： （1）O抗原

15、：即菌體抗原。沙門菌屬的O抗原有58種，以阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)記。每型沙門菌含一種或多種O抗原，將有共同抗原的細(xì)菌歸為一組，這就使沙門菌分成42個(gè)組（A、B、CZ和O16O67）。引起人類疾病的沙門菌大多在A-E組。 （2）H抗原：即鞭毛抗原，是定型的依據(jù)。 沙門菌H抗原有兩相，第一相為特異性抗原，用a、b、c表示；第二相為共同抗原，用1、2、3表示。,常見沙門菌的抗原成份,沙門菌屬細(xì)菌的抗原,菌體抗原O：由數(shù)個(gè)成分組成 傷寒沙門菌和副甲、肖氏沙門菌有交叉的抗原成分，如12抗原。 刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM 鞭毛抗原H：分第1相和第2相 第1相特異性高 刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG,具有抗吞噬作用，與毒力 （virul

16、ence）有關(guān)，故稱為Vi抗原。,（3）Vi抗原，即沙門菌K抗原。,免疫原性弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生短暫低效價(jià)抗體伴隨活菌一起存在。,測(cè)定Vi抗體有助于檢出 傷寒沙門菌、希氏沙門菌的帶菌者。,因?yàn)?所以,本質(zhì),腸系膜淋巴結(jié),M細(xì)胞,小腸粘膜上皮細(xì)胞,二、致病性與免疫 （一）致病物質(zhì),1. 侵襲力： 沙門菌的Vi抗原的具有抗吞噬作用 沙門菌通過(guò)菌毛粘附于M細(xì)胞并通過(guò)2個(gè)型分泌系統(tǒng)被內(nèi)吞 進(jìn)入M，不完全吞噬 細(xì)菌在毗鄰細(xì)胞間擴(kuò)散、腸系膜淋巴結(jié)增殖 血液,派伊爾淋巴結(jié),2. 內(nèi)毒素：體溫、WBC下降、相對(duì)緩脈，其他中毒性癥狀肝脾腫大、玫瑰疹。 3. 腸毒素： 某些沙門菌，如鼠傷寒沙門菌。 類似ETEC產(chǎn)生的

17、腸毒素,M細(xì)胞,小腸粘膜上皮細(xì)胞,1. 傷寒與副傷寒（腸熱癥） 由傷寒或副傷寒沙門菌所致，表現(xiàn)為持續(xù)發(fā)熱、相對(duì)緩脈、肝脾腫大、玫瑰疹、白細(xì)胞減少等。,（二）所致疾病,腸系膜淋巴結(jié),派伊爾淋巴結(jié),膽囊-腸道-糞排菌 皮膚-血栓、出血-玫瑰疹 腎-尿排菌 肝、脾-腫大 骨髓-受抑制,傷寒和副傷寒的致病過(guò)程,傷寒和副傷寒桿菌,小腸粘膜上皮細(xì)胞,腸系膜淋巴結(jié),派伊爾淋巴結(jié),進(jìn)入血液,再次進(jìn)入血液,第一次菌血癥,第二次菌血癥,傷寒沙門菌 副傷寒沙門菌,派伊爾淋巴結(jié) 腸系膜淋巴結(jié),胸導(dǎo)管,第一次菌血癥,肝、脾、腎及膽囊等 吞噬細(xì)胞內(nèi)繁殖 骨髓,第二次 菌血癥,持續(xù)高熱、肝脾腫大、相對(duì)脈緩、玫瑰疹,膽囊,糞

18、便,進(jìn)入腸壁淋巴組織 -壞死潰瘍,腎臟,尿,23W,腸熱癥（典型病例病程為34W）,并發(fā)癥： 腸出血 腸穿孔,第1周取靜脈血,23周取糞、尿,第13周取骨髓,第1W,玫瑰疹,腸壁病灶,2. 食物中毒 由鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌所致。表現(xiàn)為惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉和發(fā)熱等。 3. 敗血癥 主要由豬霍亂沙門菌、鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌和希氏沙門菌所致。 4. 無(wú)癥狀帶菌者 癥狀消失后1年仍可在糞便中檢出相應(yīng)沙門菌，這些菌留在膽囊中，為傷寒和副傷寒病原菌儲(chǔ)存場(chǎng)所。,（三）免疫性 腸熱癥病后有牢固的免疫力，因傷寒沙門菌是胞內(nèi)寄生菌，故特異性細(xì)胞免疫是主要的防御機(jī)制?？贵w對(duì)感染無(wú)明顯的保護(hù)作用，但可用于感染的診斷。 胃腸炎的恢復(fù)與腸道局部產(chǎn)生SIgA有關(guān)。,三、微生物學(xué)檢查 查病原菌,傷寒和副傷寒 食物中毒 敗血癥 第1周取靜脈血 可疑食物 血 第1-3周取骨髓 嘔吐物 第2周起取糞、尿 糞,標(biāo)本,腸熱癥不同標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)情況,方法,標(biāo)本,SS平板,生化反應(yīng),血清學(xué)鑒定,已知Ab檢測(cè)未知Ag （玻片凝集試驗(yàn)）,雙糖管等,三、微生物學(xué)檢查 查抗體,血清學(xué)診斷 肥達(dá)試驗(yàn)（Widal） （1）概念：用已