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1、移液器的原理及使用,講述人:吳 昊,移液器的結(jié)構(gòu) 移液器的分類 移液器的使用方法 移液器使用的注意事項 移液器的維護(hù)和保養(yǎng),移液器的結(jié)構(gòu),移液器的分類,移液器按工作原理可分為: 氣體活塞式移液器 外置活塞式移液器,氣體活塞式移液器,1 原理: 活塞通過彈簧的伸縮運動來實現(xiàn)吸 液和放液。 2 加樣體積范圍: 1L10mL 3 缺點: 不適宜移取高粘稠度液體、揮發(fā)性較大的液體 易發(fā)生交叉污染 錯誤的使用習(xí)慣易造成移液器精度不準(zhǔn)甚至移液器內(nèi)部腐蝕等等,外置活塞式移液器,這種移液器是采用外置式活塞,活塞設(shè)計在吸頭內(nèi)部,直接與液體接觸,活塞與液體之間沒有空氣段 適用于粘度比較大或者產(chǎn)生氣泡的液體的操作。
2、 無空氣間隔,避免了樣品于空氣接觸可能發(fā)生的氣霧交叉污染,因此也非常適合是珍貴的試劑、生物樣品的移取。,三、移液器的使用方法,一個完整的移液循環(huán): 槍頭安裝 容量設(shè)定 預(yù)洗吸頭 吸液 放液 卸去吸頭,1、槍頭安裝,正確的安裝方法叫旋轉(zhuǎn)安裝法 把移液器頂端插入槍頭(無論是散裝槍頭還是盒裝槍頭都一樣),在輕輕用力下壓的同時,左右微微轉(zhuǎn)動,上緊即可。,切記用力不能過猛,更不能采取剁槍頭的方法來進(jìn)行安裝,因為這樣會導(dǎo)致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住,嚴(yán)重情況下會將白套筒折斷。,多道移液器裝配槍頭時,將移液器的第一道對準(zhǔn)第一個吸頭,傾斜插入,前后稍
3、許搖動上緊,吸頭插入后略超過O型環(huán)即可。,2、移液體積設(shè)定,正確的體積設(shè)定分為兩個步驟: 粗調(diào):通過旋轉(zhuǎn)按鈕將體積值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值; 細(xì)調(diào):當(dāng)體積值接近自己的預(yù)想值之后,應(yīng)將移液器橫置,水平放至自己的眼前,通過調(diào)節(jié)輪慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值,從而避免視覺誤差所造成的影響;,從大體積調(diào)節(jié)至小體積時,為正常調(diào)節(jié)法,調(diào)節(jié)到剛好就行; 從小體積調(diào)節(jié)至大體積時,就需要先調(diào)節(jié)超過設(shè)定體積的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,可保證最佳的精確度。(這是由于計數(shù)器里面有一定的空隙,需要彌補(bǔ))。,3、預(yù)洗槍頭,在我們安裝了新的槍頭或增加了容量值以后,應(yīng)該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放兩到三次,這樣做是為了讓槍頭內(nèi)壁
4、形成一道同質(zhì)液膜,確保移液工作的精度和準(zhǔn)度,使整個移液過程具有極高的重現(xiàn)性。 在吸取有機(jī)溶劑或高揮發(fā)液體時,揮發(fā)性氣體會在白套筒室內(nèi)形成負(fù)壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,這時需要我們預(yù)洗四到六次,讓白套筒室內(nèi)的氣體達(dá)到飽和,負(fù)壓就會自動消失。,粘稠液體可以通過槍頭預(yù)潤濕的方式來達(dá)到精確移液,先吸入樣液,打出,槍頭內(nèi)壁會吸附一層液體,使表面吸附達(dá)到飽和,然后再吸入樣液,最后打出液體的體積會很精確。,4、吸液,先將移液器排放按鈕按至第一停點,再將槍頭垂直浸入液面,浸入的深度為: P2、P10 1 mm; P20、P100、P200 2 mm; P1000 3 mm; P5mL、P10mL 4 mm; 浸入
5、過深的話,液壓會對吸液的精確度產(chǎn)生一定的影響,當(dāng)然,具體的浸入深度還應(yīng)根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握。,5、放液,放液時,槍頭緊貼容器壁,先將排放按鈕按至第一停點,略停頓后,再按至第二停點,這樣做可以保證槍頭內(nèi)無殘留液體。如果這樣操作后還有殘留液體存在的話,就應(yīng)該更換槍頭了。,正向吸液: 操作時吸液可將按鈕按到第一檔吸液,釋放按鈕。放液時先按下第一檔,打出大部分液體,再按下第二檔,將余液排出。 反向吸液: 吸液時將按鈕直接按到第二檔再釋放,這樣會多吸入一些液體,打出液體時只要按到第一檔即可。多吸入的液體可以補(bǔ)償槍頭內(nèi)部的表面吸附,反向吸液一般與預(yù)潤濕吸液方式結(jié)合使用,適用于粘稠液體和易揮發(fā)液體
6、。,6、卸掉槍頭:,卸掉的槍頭一定不能和新吸頭混放,以免產(chǎn)生交叉污染。 移液器用完后調(diào)回最大量程。,錯誤的操作方式:,五、移液器使用的注意事項,移液器是否漏氣? 1、目視法檢測: 將吸取液體后的移液器垂直靜置15秒,觀察是否有液滴緩慢的流出。若有流出,說明有漏氣現(xiàn)象。(如果是P2、P10、P20、P100、P200的移液器,請將槍頭浸入液面1-2毫米,靜置20秒鐘,觀察槍頭內(nèi)部液面是否下降,如果下降了,就說明您手中的移液器出現(xiàn)漏液現(xiàn)象)。 2、可能原因:,不可用大量程的移液器移取小體積的液體; 吸液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內(nèi)才符合不準(zhǔn)確度和不精確度的要求。 在設(shè)置量程時,所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機(jī)械裝置,損壞了移液器。,吸液速度需緩慢 吸液速度太快會產(chǎn)生反沖和氣泡,導(dǎo)致移液體積不準(zhǔn)確。 濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補(bǔ)償量,可由試驗確定,補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進(jìn)行設(shè)定。,可用分析天平稱量所取純水的重量并進(jìn)行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20時重0.9982g。,六、移液器的維護(hù)保養(yǎng):,定期清潔我們手中的移液器,用酒精棉即可,主要擦拭外殼,既可以保持美觀,又可以
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