1、選修3 現(xiàn)代生物科技專題 專題2 細(xì)胞工程2.1 植物細(xì)胞工程2.1.1 植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)一、植物組織培養(yǎng)技術(shù)【例1】（2013上海9）在工業(yè)化大量培養(yǎng)植物試管苗的過程中，一般進(jìn)行如下操作，則正確的操作順序是（ ）誘導(dǎo)形成芽 取合適外植體 誘導(dǎo)形成愈傷組織 誘導(dǎo)形成未分化狀態(tài)的細(xì)胞 誘導(dǎo)形成根A B C D二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)【例2】（2013徐州摸底）植物體細(xì)胞雜交是細(xì)胞工程的一種技術(shù)，其過程不涉及（ ）A使用限制性內(nèi)切酶 B使用纖維素酶和果膠酶C誘導(dǎo)兩種不同的細(xì)胞融合D雜種細(xì)胞分裂和分化的選擇培養(yǎng)基2.1.2 植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用一、植物繁殖的新途徑 【例3】（2013江蘇11）

2、某種極具觀賞價值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量優(yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是（ ）A. 利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B. 采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C. 采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D. 采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)二、作物新品種的培育 【例4】（2013重慶5）某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述，錯誤的是（ ）A. 消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害B. 在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細(xì)胞C. 出芽是細(xì)胞再分

3、化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D. 生根時,培養(yǎng)基通常應(yīng)含-萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑三、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)【例5】（2010江蘇24，多選）明黨參是我國珍稀藥用植物，對其進(jìn)行保護(hù)性開發(fā)利用的方法有（ ）A. 設(shè)計細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器，實現(xiàn)藥用成分的工廠化生產(chǎn)B. 大量培養(yǎng)愈傷組織，直接提取藥用成分C. 大規(guī)模栽培組織培養(yǎng)苗，獲取藥用成分D. 利用組織培養(yǎng)獲得胚狀體，制成人工種子課后練習(xí)題【練1】（2011江蘇16）下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）A. 愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞B. 二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株C. 用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別

4、包裝可制成人工種子D. 植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)而選而獲得【練2】（2012廣東2）培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是（ ） A組織培養(yǎng) B細(xì)胞雜交 C顯微注射 D核移植【練3】（2011上海22）下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的表述，錯誤的是（ ）A外植體可以來自于植物的任何細(xì)胞B培養(yǎng)應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行 C以花粉作為外植體可得到單倍體植株D不同階段的培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長素的比例不同【練4】（2010浙江6）將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)基中，在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是（ ）【練5】（2013杭州期末）下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述錯誤的是（

5、）A植物組織培養(yǎng)過程中要注意細(xì)胞分裂素和生長素的適宜比例B如果用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物細(xì)胞原生質(zhì)體失去了全能性C同種植物的不同基因型個體的細(xì)胞全能性表達(dá)程度會大不相同D植物愈傷組織經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以得到具有胚性細(xì)胞特征的單細(xì)胞【練6】（2013北京市東城區(qū)期末）右圖表示一定條件下將胡蘿卜的離體組織培育形成試管苗的過程。有關(guān)敘述不正確的是（ ） A需在無菌條件下將離體組織接種到培養(yǎng)基中 B圖中過程分別表示脫分化和再分化 C利用此過程獲得的試管苗均為純合子 D此實驗說明分化的植物細(xì)胞仍具有全部的遺傳信息【練7】（2013課標(biāo)40）甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A

6、，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉栴}:（1）為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用 酶和 酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的 ，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成 組織，然后經(jīng)過 形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為 。 （2）上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指 。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是 。 （3）這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的 等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。 【練8】（2013天津9）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥

7、具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：（1）過程所需的酶是 。 （2）過程后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的 存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。 （3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是 。原生質(zhì)體經(jīng)過 再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。 （4）若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和 植株的根尖，通過 、 、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體

8、的形態(tài)和數(shù)目。 （5）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株14進(jìn)行PCR擴增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株14中一定是雜種植株的有 。 （6）對雜種植株進(jìn)行 接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。 選修3 現(xiàn)代生物科技專題 專題2 細(xì)胞工程2.2 動物細(xì)胞工程2.2.1 動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)一、動物細(xì)胞培養(yǎng)【例1】（2010浙江4）下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ） A. 培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 B. 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變 C. 二倍體細(xì)

9、胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的 D. 惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)二、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物【例2】（2013南京、鹽城一模）治療性克隆有望最終解決供體器官的短缺和器官移植出現(xiàn)的排異反應(yīng)。下圖表示治療性克隆的過程，下列有關(guān)敘述不正確的是（ ）A上述過程利用了動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)B上述過程充分說明動物細(xì)胞具有全能性C過程的完成離不開胚胎干細(xì)胞的增殖和分化潛能D、過程都發(fā)生DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成2.2.2 動物細(xì)胞融合與單克隆抗體一、動物細(xì)胞融合【例3】（2011江蘇14）關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是（ ） A蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì) B體細(xì)胞雜交技術(shù)可

10、用于克隆動物和制備單克隆抗體 C植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒 D動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育二、單克隆抗體【例4】（2013重慶2）右圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是（ ）A是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C同時具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群課后練習(xí)題【練1】（2013大綱2）關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（ ）A. 動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同 B. 動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶 C. 煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新

11、個體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖 D. 動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒 【練2】（2011上海15）關(guān)于哺乳動物細(xì)胞體外培養(yǎng)的難易程度，下列表述正確的是（ ） A乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞，胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞 B乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞，胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞 C乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞，脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞 D乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞，脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞【練3】（2012上海13）以綿羊紅細(xì)胞刺激小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞，再將后者與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞克隆群，由此篩選出的單克隆雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體（ ）A能識別綿羊整個紅細(xì)胞 B只識別綿羊紅細(xì)胞表面的特定分子C能

12、識別綿羊所有體細(xì)胞 D只識別綿羊所有體細(xì)胞表面的特定分子【練4】（2010廣東24，多選）新技術(shù)的建立和應(yīng)用對生物學(xué)的發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是（ ）APCR技術(shù)擴增蛋白質(zhì) B雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體C光學(xué)顯微鏡觀察葉綠體的基粒 D花藥的離體培養(yǎng)培育單倍體植物【練5】（2013北京市昌平區(qū)期末）下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，有關(guān)敘述不正確的是（ ） A圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原B利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選，融合細(xì)胞均能生長，未融合細(xì)胞均不能生長D丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體

13、檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁【練6】（2013北京東城區(qū)聯(lián)考）下列事實屬于細(xì)胞克隆的是（ ）A棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗 B單細(xì)胞的DNA在體外大量擴增C培養(yǎng)動物雜交瘤細(xì)胞 D小鼠體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)培育成小鼠【練7】（2013海淀區(qū)高三期中）下列關(guān)于動物細(xì)胞工程的敘述，正確的是（ ）APEG誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞，經(jīng)動物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動物個體B使用冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型C在高倍顯微鏡下觀察發(fā)生基因突變的細(xì)胞比例可推知某化學(xué)藥品的毒性D用胰蛋白酶處理動物組織后，可用無菌水稀釋制成細(xì)胞懸浮液【練8】（2013海南31）單純皰疹病毒型(

14、HSV-1)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測HSV-1。回答下列問題：（1）在制備抗HSV-1的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白,一段時間后，若小鼠血清中抗 的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了 反應(yīng)，再從小鼠的 中獲取B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的 細(xì)胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點是 。 （2）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的 中使其增殖，再從 中提取、純化獲得。 （3）通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識別這種HSV-1蛋白，其原因是該抗體具有 和

15、等特性。 【練10】（2013北京東城區(qū)聯(lián)考）卡羅林斯卡醫(yī)學(xué)院2012年10月8日宣布，將2012年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予約翰格登和山中伸彌，以表彰他們在“體細(xì)胞重編程技術(shù)”領(lǐng)域做出的革命性貢獻(xiàn)。請回答下列問題：（1）約翰格登于1962年通過實驗把蝌蚪已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核移植進(jìn)入卵母細(xì)胞質(zhì)中，并成功培育出“克隆青蛙”。由于動物細(xì)胞的全能性會隨著動物細(xì)胞 程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能逐漸變?nèi)?，直到今天也還不能用類似 （植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段）的方法獲得完整的動物個體。因此，約翰格登培育“克隆青蛙”，實際是通過 （動物細(xì)胞工程的技術(shù)手段）來實現(xiàn)的。（2）山中伸彌于2006年把4個關(guān)鍵基因通

16、過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠的成纖維細(xì)胞，使其變成多功能干細(xì)胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒是這4個關(guān)鍵基因進(jìn)入成纖維細(xì)胞的 （基因工程工具），它能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并整合到其染色體 上。（3）所謂“體細(xì)胞重編程技術(shù)”即將成年體細(xì)胞重新誘導(dǎo)回早期干細(xì)胞狀態(tài)，即獲得iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞一樣，具有發(fā)育的 ，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。（4）目前獲得iPS細(xì)胞的方法除上述兩種之外，常見的還有以下兩種：一是誘導(dǎo)成年體細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞 產(chǎn)生四倍體細(xì)胞；二是應(yīng)用 技術(shù)（動物細(xì)胞工程的技術(shù)手段）將生殖細(xì)胞置于特定條件下進(jìn)行培養(yǎng)?！揪?1】（2014寧夏銀川一中高三月考）克隆羊的成功轟動世界，它不僅奠定了疾病克隆性治療的基