1、目 錄1 公司簡(jiǎn)介2 耳聾基因檢測(cè)項(xiàng)目背景3 耳聾基因檢測(cè)臨床意義4 英盛生物耳聾基因檢測(cè)產(chǎn)品介紹5 英盛生物耳聾基因檢測(cè)產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)要求6 英盛生物耳聾基因檢測(cè)操作規(guī)程7耳聾基因檢測(cè)項(xiàng)目患者常見問題解答 8聯(lián)系我們公司簡(jiǎn)介濟(jì)南英盛生物技術(shù)有限公司是一個(gè)技術(shù)成熟而又充滿活力的高新技術(shù)企業(yè)，致力于遺傳性耳聾基因檢測(cè)試劑盒的研發(fā)和生產(chǎn)。多年來我們秉承誠(chéng)信為本、服務(wù)社會(huì)的企業(yè)宗旨，積聚結(jié)構(gòu)合理的人才隊(duì)伍，開發(fā)和提供品質(zhì)優(yōu)良的產(chǎn)品和服務(wù)。公司已通過國(guó)家醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)認(rèn)證和經(jīng)營(yíng)企業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證，具有國(guó)家藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證、藥品經(jīng)營(yíng)許可證。嚴(yán)格的生產(chǎn)體制和質(zhì)量管理體系以及先進(jìn)的生產(chǎn)管理模式

2、一直是英盛能為客戶提供優(yōu)質(zhì)、高性價(jià)比產(chǎn)品的根本原因。耳聾基因檢測(cè)項(xiàng)目背景我國(guó)聽力缺失人口2780萬人，占全國(guó)7800萬總殘疾人口的三分之一以上。正常人群中攜帶遺傳性致聾基因的比例約為6%，每年約有3萬左右聽障兒童出生，加上遲發(fā)性耳聾患者，全國(guó)每年新增聽障兒童超過6萬。聽障人群中50%屬遲發(fā)性耳聾，傳統(tǒng)聽力篩查無法發(fā)現(xiàn)，因后天環(huán)境因素刺激導(dǎo)致聽力永久缺失，這部分聽障悲劇是完全可以通過耳聾基因篩查而避免的。小兒聽力障礙多在2歲以后才被發(fā)現(xiàn)，造成無法補(bǔ)救的聽力和語言功能的損傷。如能早期發(fā)現(xiàn)，早期醫(yī)學(xué)干預(yù)，可以避免因聾致啞，基本可以參與正常的社會(huì)生活。引入耳聾基因概念前亟待解決的醫(yī)學(xué)難題：1， 聾人夫

3、妻能否生出聽力正常的孩子？2， 聽力正常的夫妻為什么生出了聾兒？3， 為什么有的孩子使用了某種藥物后就再也聽不到了？4， 為什么有的孩子初期聽力正常，隨著年齡增長(zhǎng)聽力逐漸下降？隨著人類基因組計(jì)劃所取得的偉大成就和致聾基因的發(fā)現(xiàn)與克隆以及不同種群致聾基因的分子流行病學(xué)研究進(jìn)展所提供的大量的線索與依據(jù)，我們?cè)絹碓角逦匾庾R(shí)到在耳聾防治工作過程中正在醞釀一場(chǎng)靜悄悄的革命，即在聽力篩查中融入聾病易感或常見基因的篩查的行動(dòng)！熱切希望每一位致力于新生兒聽力篩查和聾病防治的同仁們?cè)缛占尤氲竭@場(chǎng)革命中，在思想和理論上得到升華，為推動(dòng)這場(chǎng)革命貢獻(xiàn)力量！耳聾基因檢測(cè)臨床意義遺傳性耳聾在出生聽力缺陷中所占比例可高達(dá)

4、50。致聾基因檢測(cè)包括線粒體基因（12SrRNA）、GJB2基因、PDS基因、GJB3基因等。線粒體（12SrRNA）基因發(fā)生突變后，使用氨基糖苷類藥物會(huì)引起藥物性耳聾。GJB2基因突變會(huì)導(dǎo)致先天性聽力缺失，中國(guó)先天性耳聾患者中攜帶有GJB2基因突變的約占21。PDS基因突變可以導(dǎo)致大前庭水管綜合征。GJB3基因突變相對(duì)較少。上述4種基因突變引起的耳聾約占整個(gè)遺傳性耳聾的80。進(jìn)行這4種基因的檢測(cè)，可以明確大部分遺傳性耳聾的原因。遺傳性耳聾基因檢查提供臨床建議與生活方式指導(dǎo):1，指導(dǎo)抗生素(氨基糖甙類)的應(yīng)用抗生素用于預(yù)防感染和抗炎治療。氨基糖甙類抗生素如慶大霉素、鏈霉素、丁胺卡拉霉素等，因其

5、價(jià)格便宜，療效好，在臨床被廣泛應(yīng)用。用藥途徑包括靜脈、肌肉和局部注射。抗生素均有一定的副作用,氨基糖甙類抗生素有耳毒性和腎毒性，其中一部分患者（12SrRNA基因突變）對(duì)上述氨基糖甙類藥物極其敏感，少劑量、短時(shí)程使用此類抗生素后也有可能發(fā)生耳聾。即所謂“一針致聾”。在用氨基糖甙類抗生素前進(jìn)行耳聾基因檢測(cè)是非常必要的。除了明確耳聾的病因，還可指導(dǎo)線粒體基因突變但未發(fā)病的母系家族中的親屬用藥，幾乎每一個(gè)先證者(第一個(gè)就診者)的兄弟姐妹及其所有母系成員都可能是突變基因攜帶者，他們是潛在的藥物性耳聾的最大受害者，應(yīng)避免他們因使用氨基糖甙類藥物造成聽力損失。2，可指導(dǎo)部分耳聾患者減緩耳聾的發(fā)展大前庭水管

6、綜合征是常染色體隱性遺傳疾病，由PDS基因突變導(dǎo)致，大前庭水管綜合征是一種內(nèi)耳發(fā)育畸形，即聯(lián)系前庭和顱腔的管道變得異常擴(kuò)大，顱腔內(nèi)微小的壓力變化可以轉(zhuǎn)化為內(nèi)耳腔內(nèi)翻江倒海式的沖擊，破壞內(nèi)耳結(jié)構(gòu)，引起聽力下降。這就是輕度頭部外傷可能導(dǎo)致大前庭水管患者聽力下降的原因。此類患者應(yīng)盡量避免頭部外傷、預(yù)防感冒等原因引起顱壓增高，損傷內(nèi)耳，從而減緩耳聾的發(fā)展。3，可預(yù)測(cè)人工耳蝸植入的療效如基因診斷結(jié)果提示先天性耳聾是由于GJB2基因或PDS基因突變導(dǎo)致的，那么該患兒的聽神經(jīng)、聽覺傳導(dǎo)通路以及聽覺語言中樞應(yīng)該是正常的，進(jìn)行人工耳蝸植入可以獲得良好的效果。4，為遺傳性聾的患者及家庭進(jìn)行遺傳咨詢，評(píng)價(jià)再次生育子

7、女出現(xiàn)耳聾的幾率。常染色體顯性遺傳性聾在兩組染色體中，只要有一組有聾的成分就會(huì)表現(xiàn)出耳聾。我們可以看出一些規(guī)律，父母雙方有一方是聾人，子女出現(xiàn)耳聾的可能性為50；如果父母均是聾人則子女出現(xiàn)耳聾的可能性為75。耳聾子女的下一代仍可能是聾人，不聾子女的下一代不會(huì)再出現(xiàn)遺傳性聾。這種遺傳性聾，沒有性別差異。常染色體隱性遺傳性聾的特點(diǎn)是只有來自父母雙方的染色體均含有致聾信息時(shí)，才表現(xiàn)為耳聾。如果只有一方染色體有問題，則子女不會(huì)出現(xiàn)耳聾而成為攜帶者。我們同樣可以找出一些規(guī)律，如果父母雙方不聾，但均為攜帶者那么其子女出現(xiàn)耳聾的可能性為25，成為攜帶者的可能性50，完全正常的可能性為25。如果父母一方是聾人

8、，另一方為健聽人，則其子女均不出現(xiàn)耳聾但均是攜帶者。如果雙方均是聾人則其子女出現(xiàn)耳聾的可能性為100，所以要避免相同原因致聾的人婚配。耳聾的子女如果同健聽人結(jié)婚其下一代不會(huì)出現(xiàn)耳聾但均是攜帶者。不聾的子女的下代是否會(huì)出現(xiàn)耳聾則要看他(她)本人是否為攜帶者同時(shí)還要看他(她)的配偶的情況，也就是說不聾的子女的下一代，也有可能會(huì)聾。5，進(jìn)行產(chǎn)前基因診斷，對(duì)于有生育耳聾患兒風(fēng)險(xiǎn)的夫婦意義重大父母生育了一個(gè)聾兒，他們迫切想知道第二個(gè)孩子是否正常，這時(shí)的基因診斷加上產(chǎn)前診斷可以在懷孕10周后明確胎兒的耳聾基因狀態(tài)，提前采取干預(yù)措施，避免聾兒出生?，F(xiàn)有的耳聾基因診斷技術(shù)在明確診斷是GJB2和PDS突變耳聾的

9、前提下，患兒父母可以進(jìn)行遺傳學(xué)指導(dǎo)和干預(yù)下的再次生育，以確保不再生育同樣基因缺陷致聾的患兒。解放軍總醫(yī)院已通過基因診斷和產(chǎn)前診斷指導(dǎo)10余個(gè)育有聾兒的家庭生育了聽力正常的后代。6，指導(dǎo)耳聾患者的子女婚配，避免或減少下一代再出現(xiàn)遺傳性耳聾同樣是耳聾，但致聾原因各不相同，通過耳聾基因檢測(cè)，為盡量避免相同遺傳因素導(dǎo)致耳聾的人婚配提供理論依據(jù)，減少遺傳性耳聾發(fā)生。英盛生物耳聾基因檢測(cè)產(chǎn)品介紹1， 技術(shù)原理通過提取血液中的DNA作為模板， 按照耳聾相關(guān)基因的突變序列，設(shè)計(jì)雙標(biāo)記熒光的TaqMan突變序列探針，模擬天然DNA的復(fù)制，通過PCR擴(kuò)增，與模板DNA高度特異的結(jié)合，收集熒光同時(shí)累積曲線，實(shí)時(shí)讀取

10、定性結(jié)果，判讀是否存在相關(guān)基因位點(diǎn)的突變。目前可對(duì)四個(gè)耳聾相關(guān)基因（GJB2, GJB3, SLC26A4和12S rRNA）的14個(gè)最常見耳聾基因突變位點(diǎn)進(jìn)行定性篩查。2， 檢測(cè)流程3， 技術(shù)特點(diǎn)a) 全面：四個(gè)基因，十四個(gè)常見位點(diǎn)，覆蓋全面；b) 靈活：檢測(cè)基因位點(diǎn)靈活選擇，實(shí)施個(gè)性化的檢測(cè)方案；c) 靈敏：可準(zhǔn)確檢測(cè)低至1ng/l的模板DNA樣品（只需1滴血），樣本源方便，全血與干血片均可進(jìn)行DNA提??；d) 特異性強(qiáng)：特異性引物探針與熒光PCR技術(shù)結(jié)合，保證結(jié)果的準(zhǔn)確可靠；e) 準(zhǔn)確：權(quán)威醫(yī)院1500例臨床樣本雙盲檢測(cè)，結(jié)果與基因測(cè)序100%一致；f) 防污染：全密閉檢測(cè)，無需開蓋，防

11、止交叉污染；g) 簡(jiǎn)單快捷：簡(jiǎn)單好學(xué)，穩(wěn)定性高，2小時(shí)內(nèi)自動(dòng)報(bào)告結(jié)果；h) 成本低：熒光PCR方法提供低成本的解決方案，更適合大規(guī)模群體篩查。4， 產(chǎn)品規(guī)格先天性耳聾基因檢測(cè)試劑盒 包裝規(guī)格：24人份/盒遲發(fā)性耳聾基因檢測(cè)試劑盒 包裝規(guī)格：24人份/盒藥物性耳聾基因檢測(cè)試劑盒 包裝規(guī)格：24人份/盒英盛生物耳聾基因檢測(cè)產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)要求1， 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)，分區(qū)之間單向行進(jìn)，不得逆行，各區(qū)工作服及實(shí)驗(yàn)設(shè)備不能混用；2， 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性請(qǐng)使用已校準(zhǔn)的移液器，選用合格的一次性使用的PCR反應(yīng)管、離心管、槍頭等進(jìn)行樣本處理及配液等操作，所有用具應(yīng)不含 DNA 酶；3， 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備的設(shè)備

12、及耗材：雙蒸水；1.5ml無菌離心管；0.5-10l、20-200l、100-1000l加樣器及槍頭；PCR反應(yīng)管；可調(diào)14K微型離心機(jī)；漩渦振蕩儀；打孔器4， 工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔，可使用可移動(dòng)紫外燈(254nm波長(zhǎng))，在工作完成后調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺(tái)上6090cm內(nèi)照射。由于擴(kuò)增產(chǎn)物僅幾百bp，對(duì)紫外線損傷不敏感，因此紫外照射擴(kuò)增片段必須延長(zhǎng)照射時(shí)間，最好是照射過夜；5， 擴(kuò)增室應(yīng)具備正常可用的雙通道及以上的熒光PCR儀器6， 實(shí)驗(yàn)室及其設(shè)備的使用必須有日常記錄。英盛生物耳聾基因檢測(cè)操作規(guī)程耳聾基因檢測(cè)試劑DNA提取操作規(guī)程（全血）1，生物安全要求DNA提取在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的生物安

13、全柜里完成。2，試劑盒組分及規(guī)格：DNA提取液（含chelex-100,等）3，其它實(shí)驗(yàn)設(shè)備及耗材雙蒸水；1.5ml 無菌離心管；0.5-10l、20-200l、100-1000l加樣器及槍頭；PCR反應(yīng)管；可調(diào)14K微型離心機(jī)；漩渦振蕩儀4，樣本要求a) 1ml EDTA抗凝外周血，采集后輕輕混勻。樣本應(yīng)盡快送檢，保存運(yùn)輸溫度為2-8。建議2-8保存不超過24小時(shí)；-20保存不超過1個(gè)月；-70保存不超過2個(gè)月。避免反復(fù)凍融（僅限1次）；如長(zhǎng)期保存，建議提取樣本DNA后-80保存。b) 樣本中存在的干擾物質(zhì)在一定范圍內(nèi)不影響檢測(cè)，當(dāng)干擾物質(zhì)超出以下范圍時(shí)不能保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性：膽紅素480

14、mol/L，甘油三酯30mmol/L，血紅蛋白600g/L，抗凝劑濃度0.1875-3mg/ml。耳聾基因檢測(cè)結(jié)果報(bào)告單樣式 *市婦幼保健院 耳聾基因檢驗(yàn)報(bào)告單姓名：李*年齡：26科別：婦科標(biāo)本號(hào)：4性別：女標(biāo)本類型：全血申請(qǐng)醫(yī)生：王*接收時(shí)間：序號(hào)基因名稱位點(diǎn)名稱檢測(cè)結(jié)果1GJB2235 del C雜合突變2GJB2299 del AT野生型3mtDNA12SrRNA1494 C T野生型4mtDNA12SrRNA1555 A G野生型5SLC26A42168 A G野生型6SLC26A4IVS7-2 A G野生型檢測(cè)日期：檢測(cè)者： 核對(duì)者：*結(jié)果僅對(duì)送檢樣本負(fù)責(zé)，有疑問請(qǐng)于三日內(nèi)咨詢*1、

15、本實(shí)驗(yàn)僅用于檢測(cè)導(dǎo)致遺傳性耳聾最常見的四個(gè)耳聾基因6個(gè)突變位點(diǎn)（約占全部遺傳性耳聾相關(guān)突變位點(diǎn)的80%）。不能對(duì)所有耳聾進(jìn)行病因診斷。2、本檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合臨床表現(xiàn)等專業(yè)分析。耳聾基因檢測(cè)項(xiàng)目患者常見問題解答1. 正常聽力的人有可能生遺傳性耳聾患兒?jiǎn)?？中?guó)人群常見耳聾基因突變的攜帶率高達(dá)5-6%，正常聽力的父母如果攜帶遺傳性耳聾基因，也將面臨生育聾兒的風(fēng)險(xiǎn)。事實(shí)上，每年新增的3萬多聾兒，其父母聽力多半正常。2. 夫婦雙方都是GJB2基因攜帶者或都是PDS基因攜帶者，他們生育聾兒的幾率是多少？GJB2和PDS基因的遺傳方式遵循常染色體隱性遺傳的規(guī)律，夫婦雙方在每次生育中都分別有1/2的機(jī)會(huì)將致病隱

16、性基因傳遞給后代，最后有1/4的孩子可能是帶有GJB2或者PDS純合基因的聾兒。3. 夫婦雙方一方是GJB2基因攜帶者，另一方是PDS基因攜帶者，他們生育聾兒的幾率是多少？正常情況下，這類夫婦生育的孩子可能是耳聾基因的攜帶者，但是聽力正常。這類夫婦生育聾兒的幾率較低，但是略高于正常人群。4. 夫婦雙方一方是12SrRNA基因突變攜帶者，另一方正常，他們生育聾兒的幾率是多少？如果是女方帶有12SrRNA基因突變，那么她和她的孩子都將通過終身絕對(duì)禁止使用耳毒性藥物來避免耳聾的發(fā)生。如果是男方帶有12SrRNA基因突變，則這種遺傳信息不會(huì)傳遞給他的子女。5. 誰會(huì)生遺傳性耳聾患兒？聽力正常和聽力障礙

17、的父母都有可能生育遺傳性聾兒。聽力正常的父母也有可能攜帶遺傳性耳聾基因，并且這個(gè)比例在正常人中高達(dá)6%。6. 聾人之間應(yīng)該怎樣婚配避免生育聾兒？通過耳聾基因檢測(cè)明確遺傳性耳聾基因攜帶情況后，攜帶同樣致聾基因的聾人應(yīng)避免婚育。7. 已經(jīng)生育了一個(gè)聾兒，還有機(jī)會(huì)生育正常聽力的孩子嗎？有。夫婦雙方通過耳聾基因檢測(cè)可以確定雙方遺傳性耳聾基因攜帶情況，得到生育正常孩子的幾率。懷孕后通過產(chǎn)前診斷能評(píng)估胎兒聽力的情況。8. 寶寶出生時(shí)聽力正常，長(zhǎng)大后就不會(huì)出現(xiàn)聽力下降了嗎？不是。有許多孩子在1-11歲聽力下降直至耳聾，這部分孩子占全部聾兒的71%。9. 新生兒做了普通的聽力篩查還需要做遺傳性耳聾基因篩查嗎？

18、需要。普通聽力篩查只能檢測(cè)出部分先天耳聾的威脅。但是新生兒耳聾基因篩查檢測(cè)更全面，能篩查出先天聾、后天聾、藥物聾等。10. 新生兒耳聾的比例高嗎？新生聾兒出生的比例是1-3，每年新生聾兒約3萬人，但是還有許多孩子在1-11歲發(fā)生耳聾，每年實(shí)際新增聾兒達(dá)5-6萬。11. 是不是每個(gè)孕婦都需要做耳聾基因篩查？是的。在我國(guó)，每100個(gè)人就有6人攜帶耳聾基因，他們自身聽力正常，但是當(dāng)遇到攜帶有相同耳聾基因的伴侶后，就有較高風(fēng)險(xiǎn)生育耳聾寶寶。只有面向正?；橛巳旱钠毡樾院Y查才可避免雙方攜帶同樣致聾基因的夫婦生育聾兒。聾兒一旦降生，將給家庭帶來沉重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。12. 孕婦應(yīng)該在什么時(shí)候進(jìn)行篩查？隨時(shí)可做，越早越好。建議在12周建檔時(shí)進(jìn)行檢測(cè)；或16周左右進(jìn)行唐氏篩查時(shí)同時(shí)進(jìn)行耳聾基因檢測(cè)。13. 這項(xiàng)篩查對(duì)孕婦和胎兒是否有影響？耳聾基因篩查只需