分類號 密級 編號 中 南 大 學(xué) 士學(xué)位論文 論 文 題 目 色譜法拆分幾種手性藥物的研究 學(xué) 科、專 業(yè) 無 機(jī) 化 學(xué) 研 究 方 向 生 物 無 機(jī) 化 學(xué) 研究生姓名 于 金 剛 導(dǎo)師姓名及 專業(yè)技術(shù)職務(wù) 黃 可 龍 教 授 碩士學(xué)位論文 摘要 本文詳細(xì)分析了手性拆分技術(shù)的發(fā)展趨勢， 綜述了現(xiàn)有的手性拆分方法，分析了各種方法的利弊 。深入研究了采用羥丙基- 通過單因素實(shí)驗(yàn)考察了流動(dòng)相中羥丙基- 醇體積百分比、三乙胺添加劑的影響以及柱溫、流速等因素的影響，得到了拆分最佳的色譜條件；采用 丙基- 對拆分的流動(dòng)相組成、配比和手性選擇體固載量進(jìn)行了考察，優(yōu)化了分離條件；比較了手性選擇體作薄層色譜流動(dòng)相添加劑和固載薄層色譜法拆分鹽酸克倫特羅對映體，研究結(jié)果表明，手性選擇體固載薄層色譜法具有更好的手性識別能力， 同時(shí)考察了拆分的實(shí)驗(yàn)條件，得到了手性選擇體固載薄層色譜法拆分最佳分離條件。 在理論研究上， 從分子間作用力的角度探討了手性選擇體固載薄層色譜實(shí)現(xiàn)拆分的作用模型；同時(shí)探討了 (2R,3R)二 硅膠表面的硅醇羥基之間形成氫鍵實(shí)現(xiàn)固載，形成手性固定相實(shí)現(xiàn)拆分的分子機(jī)制。 關(guān)鍵詞 手性藥物，拆分，高效液相色譜，薄層色譜，機(jī)理 碩士學(xué)位論文 he of of in of of of as as of of of in of of of of of of of of by as or of of of On of of of up on of of of 2R,3R)2R,3R)碩士學(xué)位論文 士學(xué)位論文 目錄 摘 要 . 一章 文獻(xiàn)綜述 . 1 性與手性藥物 . 1 性拆分的提出和意義 . 2 要的手性拆分技術(shù)及其研究進(jìn)展 . 4 晶拆分法 . 4 學(xué)拆分法 . 5 力學(xué)拆分法 . 5 拆分法 . 6 拆分法 . 6 譜拆分法 . 7 究目的與內(nèi)容 . 12 文研究的內(nèi)容 . 12 研究的創(chuàng)新之處 . 12 究意義 . 12 第二章 高效液相色譜法拆分氯噻酮對映體的研究 . 13 驗(yàn)原料及儀器 . 14 要原料 . 14 要儀器 . 14 驗(yàn)步驟 . 15 制氯噻酮溶液 . 15 結(jié)晶 . 15 譜分離條件 . 15 驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法 . 15 果與討論 . 15 醇比例對分離度的影響 . 15 度與分離度的關(guān)系 . 17 對分離度的影響 . 18 溫的影響 . 18 速的影響 . 18 影響 . 18 流動(dòng)相添加劑拆分氯噻酮的最佳條件 . 19 手性流動(dòng)相添加劑拆分氯噻酮對映體 . 19 驗(yàn)中遇到的問題和解決方法 . 20 章小結(jié) . 20 碩士學(xué)位論文 目錄 薄層色譜法拆分鹽酸普奈洛爾對映體 . 21 驗(yàn)試劑及儀器 . 22 要試劑 . 22 要儀器 . 23 驗(yàn)步驟 . 23 制鹽酸普萘洛爾溶液 . 23 備手性選擇體固載薄層色譜板 . 23 層色譜分離鹽酸普萘洛爾對映體 . 24 果與討論 . 24 載 層板拆分鹽酸普萘洛爾對映體 . 24 載 層板拆分鹽酸普萘洛爾對映體 . 27 優(yōu)條件下拆分鹽酸普萘洛爾對映體的 譜圖 . 29 糊精作手性選擇體拆分對映體機(jī)制 . 29 映體分離原理 . 30 糊精拆分鹽酸普萘洛爾對映體機(jī)制 . 31 驗(yàn)中遇到的問題和解決方案 . 32 章小結(jié) . 32 第四章 鹽酸克倫特羅對映體的拆分研究 . 33 驗(yàn)原料及儀器 . 34 要原料 . 34 要儀器 . 34 驗(yàn)步驟 . 34 成幾種 (2R,3R)二 . 34 酸克倫特羅純度檢驗(yàn) . 37 制鹽酸克倫特羅溶液 . 37 備各種不同規(guī)格的薄層色譜板 . 38 層色譜分離鹽酸克倫特羅對映體 . 38 果與討論 . 39 流動(dòng)相手性添加劑 拆分鹽酸克倫特羅對映體 . 39 酰胺薄膜法拆分鹽酸克倫特羅對映體 . 40 載 層板拆分鹽酸克倫特羅對映體 . 41 載 層板拆分鹽酸克倫特羅對映體 . 43 2R,3R)二 層板拆分鹽酸克倫特羅對映體 . 44 2R,3R)二 層板拆分鹽酸克倫特羅對映體 . 46 優(yōu)條件下拆分鹽酸克倫特羅對映體的 譜圖 . 48 驗(yàn)中遇到的問題和解決方案 . 49 2R， 3R） 二 . 49 章小結(jié) . 50 第五章 結(jié)論和展望 . 51 碩士學(xué)位論文 目錄 論 . 51 望 . 52 參 考 文 獻(xiàn) . 53 致 謝 . 62 攻讀學(xué)位期間主要的研究成果目錄 . 63 碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 1第一章 文獻(xiàn)綜述 性與手性藥物 手性的概念與不對稱密切相關(guān)1。從原子到人都是不對稱的，如人的左手和右手不能重疊，互為鏡像；自然界存在的糖都是 D 型的；氨基酸是 L 型的；蛋白質(zhì)和 右旋的；海螺的螺紋和纏繞植物都是右旋的。因此，我們的世界是不對稱的，即手性是宇宙間的普遍特征，是自然界的本質(zhì)屬性之一。 如果有機(jī)化合物分子中的一個(gè)碳原子連接了 4 個(gè)不相同的原子或基團(tuán)，則該化合物沒有任何對稱因素（如對稱中心、對稱面等） ，將有兩個(gè)互為實(shí)物鏡像關(guān)系的對映體，于是該分子就具有手性，稱為不對稱分子。與四個(gè)不相同的原子或基團(tuán)相連的碳原子稱為手性碳原子或不對稱碳原子，并用“ *”號標(biāo)出。不對稱 C 原子是最常見的手性原子。除此之外， S、 N、 P、 B 也可形成穩(wěn)定的手性中心。此外，一些具有手性軸或手性面的分子 (例如丙二烯型、聯(lián)苯型或提籃型旋光化合物分子 )或金屬有機(jī)化合物分子 (例如二茂鐵衍生物 )也是手性的2,3。旋光性不同的對映體在其名稱前附加符號 (+)-或 示右旋；而附加符號 (-)-或 表示左旋。 手性是自然界普遍存在的現(xiàn)象，它與我們?nèi)粘Ｉ铌P(guān)系密切4。手性化合物在非手性環(huán)境中具有相同的性質(zhì)，而在手性環(huán)境中則性質(zhì)不同。雖然右旋和左旋異構(gòu)體之間的原子排列只存在微小的差別，但人類新陳代謝由一系列相互銜接的化學(xué)反應(yīng)組成，從分子水平來看，手性代表著生命過程中最本質(zhì)的性質(zhì)。氨基酸具有手性、小分子糖具有手性、多肽具有手性、蛋白質(zhì)具有手性、多聚糖也具有手性，從而生物系統(tǒng)中不同的手性體在代謝與調(diào)節(jié)過程中具有明顯的不同的生理活性。 而在藥物領(lǐng)域里，含有手性中心的藥物，稱之 為手性藥物。當(dāng)藥物存在對映體時(shí)，其藥性與藥物分子的立體構(gòu)型有密切關(guān)系。在手性藥物進(jìn)入生物體內(nèi)后，由于人體細(xì)胞或身體可辨別這種差別，且常常只能利用其中一種異構(gòu)體（例如酵母只能使左旋葡萄糖發(fā)酵，人體內(nèi)細(xì)胞也只能利用左旋氨基酸來制造蛋白質(zhì)） ，故代謝途徑和藥理作用常不同，生物活性和藥效、毒副作用存在顯著差異。近年臨床實(shí)踐反復(fù)證實(shí)了這一點(diǎn)，即：一種立體異構(gòu)體有藥效，而另一種則藥效很小，甚至完全沒有藥效或有相反的藥效。在藥理研究上5，將活性最高的立體異構(gòu)體叫作 活性最低的異構(gòu)體稱為 臘語， 碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 2 。在許多情況下， 但本身沒有藥效，還會(huì)部分抵消 時(shí)還會(huì)產(chǎn)生有毒的代謝產(chǎn)物或引起嚴(yán)重的副作用。 具體可從以下臨床研究實(shí)例來說明5,6： y 手性藥物分子兩種對映體具有相同藥效，但差別很大。 非巴比妥類靜脈麻醉藥依托咪酯（ 芐咪唑）結(jié)構(gòu)中含有手性碳原子，僅右旋體有效；廣譜抗生素治瘧藥氯霉素，其 ) )咯酸（ 痛活性是阿司匹林的 800倍，且消炎活性強(qiáng)于萘普生，其 和 230 倍；倍他羅定 (- 的鎮(zhèn)痛作用約為阿法羅定 (的 6倍；右旋丙氧酚 (達(dá)爾豐 )是成癮性很小的鎮(zhèn)痛藥，適用于由慢性疾病引起的疼痛，而左丙氧酚為一鎮(zhèn)咳藥。 y 手性藥物分子兩種對映體的藥效相反。 哌西那朵（ 具有獨(dú)特混合作用的新型苯哌啶鎮(zhèn)痛藥，既有阿片激動(dòng)活性，又有拮抗性，其 (+)(-) y 其代謝產(chǎn)物有毒或引起嚴(yán)重副作用。 最典型的例子是“反應(yīng)?！?（沙利度胺， 79。 20 世紀(jì) 50 年代中期，德國 司以消旋體上市 為鎮(zhèn)痛劑用于預(yù)防孕婦的惡心。 1961 年發(fā)現(xiàn)，懷孕后 3 個(gè)月服用此藥可引起胎兒的海豹畸形。據(jù)統(tǒng)計(jì)，由“反應(yīng)停”致畸的案例，全世界達(dá) 17000 例以上，是 20 世紀(jì)最大的藥害事件。 1979 年，德國波恩大學(xué)研究人員對該藥物進(jìn)行了拆分，發(fā)現(xiàn)是S 型對映體具有致畸作用，而只有 R 型對映體具有鎮(zhèn)痛作用。慘痛的教訓(xùn)使人們認(rèn)識到，藥物必須注意它們不同的構(gòu)型。 同樣，在農(nóng)藥和除草劑、殺蟲劑殺菌劑等領(lǐng)域 ，手性化合物亦具有對映選擇效應(yīng)以及不同的生趣降解速度而被關(guān)注，調(diào)味劑、香料、營養(yǎng)品等與人們?nèi)粘Ｉ钕⑾⑾嚓P(guān)的化學(xué)產(chǎn)品也受到重視。在處理有生物活性的物質(zhì)如維生素、信息素、輔酶、藥物產(chǎn)品以及一般天然存在的手性化合物時(shí)，對映體的分離和分析都是最重要的問題。總之，所有相關(guān)領(lǐng)域都開始關(guān)注手性化學(xué)這個(gè)主題。 性拆分的提出和意義 在藥物領(lǐng)域，據(jù)調(diào)查目前市場銷售與臨床應(yīng)用的化學(xué)合成藥物中，有 75%以上是外消旋體藥物，即為兩種光學(xué)異構(gòu)體的等量混合物。為了用藥安全有效，對手性化合物的各個(gè)異構(gòu)體分別進(jìn)行考察，了解其各自的生理活性是很有必要碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 3的。 1992 年美國食品與藥物監(jiān)管局 (藥物評價(jià)與研發(fā)中心 (布10了光學(xué)活性藥物的發(fā)展綱要，要求新藥的使用說明中必須明確量化每一種對映異構(gòu)體的藥效作用和毒理作用，并且當(dāng)兩種異構(gòu)體有明顯藥效和毒理作用差異時(shí)，必須以光學(xué)純藥品形式上市。因此，手性藥物的分離和鑒定在藥物分析中就占有極其重要的地位，以便對藥物進(jìn)行質(zhì)量控制，并為藥物的藥理、毒理研究提供分析手段。 決定大大促進(jìn)了手性藥物的研制和開發(fā)，使得世界藥物市場中的藥物銷售類型發(fā)生了巨大的變化，手性藥物的銷售額正以迅猛的勢頭不斷增長11：1993 年世界市場上出售的單一對映體形式的藥物比 1992 年增長了 22%， 而 1994年又比 1993 年增長 27%， 達(dá) 452 億美元。 現(xiàn)用于臨床的原料藥世界上總共有 3500種 4000 種，其中約 50%是合成藥物。在合成藥物中，又約有 40%是外消旋體，而外消旋體合成藥物在目前仍主要以外消旋體在臨床使用。 總之，制備旋光純手性對映體是非常重要的。因?yàn)椋?y 不同的對映單體具有不同的藥理作用； y 不同的對映單體具有不同的生物活性； y 格提出了手性藥物需制備成單體的原則； y 與人們生活息息相關(guān)的化學(xué)品因具有手性， 從而具有對映選擇效應(yīng)以及不同的生趣降解速度。 y 要研究和利用有生物活性的立體化合物異構(gòu)體， 也要獲得對映純的手性化合物。 通過一般的化學(xué)反應(yīng)來制備某種物質(zhì)時(shí)，往往 會(huì)得到左旋、右旋兩種光學(xué)異構(gòu)體各占一半的混合物。研究不對稱合成技術(shù)耗費(fèi)資金較大，手性合成雖可直接得到純度較高的光學(xué)純物質(zhì)，但其產(chǎn)率普遍較低，且不易實(shí)現(xiàn)。相反，若采用恰當(dāng)?shù)氖中圆鸱旨夹g(shù)，就可以得到較高產(chǎn)量的對映異構(gòu)體，分離手性化合物從而得到單一旋光體是目前制備單一對映體最有效的方法，手性拆分技術(shù)也就應(yīng)運(yùn)而生。 目前已經(jīng)開發(fā)的制備對映純化合物的方法，主要有以下幾種5,1217： y 從天然光活性產(chǎn)物中獲得，這種天然來源即“手性池” （ ； y 由天然手性化合物經(jīng)化學(xué)改造合成； y 外消旋體化學(xué)拆分法。 即用一種手性試劑把外消旋體混合物中的兩個(gè)對映體轉(zhuǎn)變成非對映異構(gòu)體，然后利用兩種非對映異構(gòu)體的物理性質(zhì)差別，將其分開； 碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 4y 外消旋體生物拆分法。即用微生物（或酶）選擇性地將兩對映體之一轉(zhuǎn)變成另一對映體化合物，達(dá)到分離目的； y 色譜分離法。即利用手性色譜柱直接分離對映體，或由非手性色譜柱間接分離非對映異構(gòu)體。目前主要的色譜拆分方法有氣相色譜法（ 、液相色譜法 ( 毛細(xì)管電泳 (超臨界色譜 (平面色譜（ 等； y 動(dòng)力學(xué)拆分； y 不對稱合成。 隨著對手性化合物研究和認(rèn)識的不斷深入，人 們對單一手性物質(zhì)的需求量越來越大，對其純度的要求也越來越高。研究發(fā)展低成本、高效率的手性技術(shù)的重要性日益凸現(xiàn)，為廣大醫(yī)藥工業(yè)領(lǐng)域的研究者帶來了巨大的挑戰(zhàn)和機(jī)遇。廣闊的應(yīng)用前景和巨大的市場發(fā)展推動(dòng)了探索新的更有效的獲得單一手性化合物方法的研究。 要的手性拆分技術(shù)及其研究進(jìn)展 手性拆分技術(shù)主要包括：結(jié)晶拆分法2、化學(xué)拆分法、動(dòng)力學(xué)拆分法、酶拆分法、膜拆分法、色譜拆分法等。 晶拆分法 晶體機(jī)械拆分法（直接結(jié)晶拆分法） 如果對映體以晶體形式析出，并且不同構(gòu)型對 映體晶體有明顯差異，則可借助于放大鏡，將對映體晶體進(jìn)行分別揀出，達(dá)到拆分的目的，此即機(jī)械拆分法。 1848 年， 放大鏡和鑷子成功地分離了酒石酸鈉銨鹽的外消旋體，這項(xiàng)先驅(qū)性工作標(biāo)志著手性分離的開始。 本方法由于比較煩瑣，只能應(yīng)用在兩種對映體 晶體可以被看出區(qū)別的那些外消旋體混合物，所以使用面較窄，不利于推廣。 接種結(jié)晶拆分法 向外消旋體中加入某一對映體的微晶，該構(gòu)型 的對映體就可以優(yōu)先結(jié)晶出來，且結(jié)晶量遠(yuǎn)大于種晶量。將晶體濾出后，濾液中就含有過量的另一對映體，將濾液升溫后，加入外消旋體，冷卻，接著放入含量較多的對映體的種晶，從碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 5而使該對映體自外消旋體混合物中析出。這種拆分方法只需要 2 種對映體的少量晶種即可完成。倘若外消旋體化合物比其對映體的溶解度大，那么也可以用任一純對映體晶體接種，而使該對映體自外消旋化合物飽和溶液中析出。 如果沒有純的對映體，還可考慮采用別的旋光 性化合物晶體做晶種來進(jìn)行結(jié)晶拆分，這是近年來發(fā)展的所謂“干擾結(jié)晶拆分法” 。如在外消旋的谷氨酸、酥氨酸、天門冬氨酰胺飽和溶液中分別加入少許的 接種結(jié)晶拆分法工藝比較簡單，成本相對較低 ，效果也較好。但合適的溶劑配比需要很多的探索實(shí)驗(yàn)來獲得，操作時(shí)的投料量和溫度等控制要求也相當(dāng)嚴(yán)格。 學(xué)拆分法 如果外消旋體分子含有如羧基、氨基、羥基和 雙鍵等某些活性基團(tuán)，可讓其與某一旋光活性化合物進(jìn)行反應(yīng)，生成兩種非對映異構(gòu)體，然后利用非對映異構(gòu)體物理性質(zhì)主要是溶解度上的差別，將 2 個(gè)非對映異構(gòu)體分開18,19： 本方法主要用于酸堿拆分，天然的麻黃堿、酒 石酸、喹啉、樟腦磺酸等是常用的拆分試劑。在羥基化合物和雙鍵化合物的分離中，還可用手性試劑與金屬離子形成的配位化合物做拆分試劑。 力學(xué)拆分法 1858年， 旋對映體的代謝要比左旋體快，以此進(jìn)行分離，可得到光學(xué)活性化合物，這大概是化學(xué)史上第一個(gè)動(dòng)力學(xué)拆分例子，又稱經(jīng)典動(dòng)力學(xué)拆分（ 。這種方法最大限制是， 最多只可能得到 50%的理論產(chǎn)量。 由于經(jīng)濟(jì)和環(huán)境的影響，人們不僅僅需要生產(chǎn)高純度的對映體，也需要提高生產(chǎn)的理論產(chǎn)量，在此條件下，促進(jìn)出現(xiàn)了動(dòng)態(tài)動(dòng)力學(xué)拆分20（ 。一個(gè)動(dòng)態(tài)動(dòng)力學(xué)拆分要想得到較高的 反應(yīng)選擇性必須很高，一般只有酶才有這樣好的選擇性，從而將拆分技術(shù)引入了酶拆分方法21的研究。 對映體(+)-)-)-) 第一章 文獻(xiàn)綜述 拆分法 利用微生物的活細(xì)胞所含的酶或自細(xì)胞中分離 出來的酶進(jìn)行手性化合物的拆分即所謂酶拆分法22。酶拆分的獨(dú)特作用是由于它們由 活性中心構(gòu)成了一個(gè)不對稱環(huán)境，有利于識別外消旋體。在一定條件下，酶可催化 而使兩個(gè)對映體彼此分開。一般而言，適合拆分的酶應(yīng)具有廣泛的底物選擇性、價(jià)格低、對拆分的酸堿環(huán)境以及有機(jī)溶劑耐受力強(qiáng)。 等23利用酶拆分了環(huán)氧鹵丙烷， S 24也對 國科研研究工作者也在相關(guān)領(lǐng)域作出了貢獻(xiàn)2527。 拆分法 手性拆分膜技術(shù)包括手性拆分液膜和手性拆分固膜兩種主要方法28,29。 作為一種低能耗和易于工業(yè)放大的手性拆分技術(shù)，近年來隨著單一手性物質(zhì)需求的日益增長得到了廣泛的關(guān)注。 液 膜拆分法 主要分為支撐液膜法、乳化液膜法、厚體液膜法。 在支撐液膜中，具有手性選擇能力的載體溶解 于一定的液體溶劑之中，通過與某個(gè)對映異構(gòu)體特異性的結(jié)合，將其從上相運(yùn)輸?shù)较孪?，從而?shí)現(xiàn)手性分離，具有只需少量手性選擇劑的優(yōu)點(diǎn)3032。通常用于手性拆分的支撐液膜是將膜液（溶劑和手性選擇劑）通過毛細(xì)管力吸附在多孔固體膜（液體的支撐膜）的孔道中，故又稱為浸漬式液膜。 乳化液膜又稱液體表面活性劑膜，是一種復(fù)乳 。內(nèi)相和外相是相溶的，而它們與膜相則互不相溶。膜相通常含有表面活性劑、萃取劑 (載體 )、溶劑與其他添加劑以控制液膜的穩(wěn)定性、滲透性和選擇性。也具有傳輸速度快、對極性溶劑容量大的優(yōu)點(diǎn)，且由于表面活性劑的穩(wěn)定效應(yīng)，受表面活性介質(zhì)破壞的影響較小，相對支撐液膜過程更穩(wěn)定33,34。 厚體液膜采用一層相對較厚的不混溶的流體將 料液相與接收相分開，膜相不需支撐，而借助不可混溶性與其它相分開35。 36研究了液膜拆分的機(jī)制，并建立了液膜拆分的模型。 固 膜拆分法 分為選擇擴(kuò)散型手性固膜法和選擇吸附型手性 固膜法。而選擇擴(kuò)散型手性碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 7固膜法又包括了具有手性選擇性并能自身支撐的高聚物固膜37、由不能自身支撐而具有手性選擇性的高聚物38和非選擇性支撐層組成的非對稱復(fù)合固膜39；選擇吸附型手性固膜包括了采用接枝或浸漬等方法將手性選擇劑固定在多孔基材上的手性固膜40、將環(huán)糊精等手性選擇劑混合溶解于制膜液而制成的無孔高分子手性膜41、采用分子印跡技術(shù)制備的具有手性識別功能的高分子膜42。 譜拆分法 色譜法是目前最常用的手性拆分方法，可采用 兩種主要途徑即直接法和間接法實(shí)現(xiàn)拆分。 所謂間接法，即將對映體與純的手性試劑反應(yīng) ，生成兩個(gè)非對映異構(gòu)體，然后用常規(guī)色譜方法分離。該方法分離的是對映體的衍生物而不是原對映體，涉及非對映異構(gòu)體的形成。間接法的優(yōu)點(diǎn)是：可使用價(jià)格便宜，柱效高的非手性柱（如 ） ；可選用具有各種發(fā)色團(tuán)或較強(qiáng)熒光發(fā)射基團(tuán)的手性試劑。不足之處有：對映體必須含有能與手性試劑反應(yīng)的基團(tuán)；衍生物反應(yīng)操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，且容易造成組分的損失；對手性試劑的純度、儲(chǔ)存和反應(yīng)過程中的穩(wěn)定性要求較高；兩個(gè)對映體的衍生化反應(yīng)速度應(yīng)當(dāng)一致；生成的非對映體應(yīng)當(dāng)易分解為原來的對映體。 在直接法中，又分為采用手性固定相和手性流 動(dòng)相添加劑兩種操作。手性固定相法基于樣品與鍵合到載體表面的手性選擇劑（又稱手性識別劑）間形成暫時(shí)的非對映絡(luò)合物的能量差異或穩(wěn)定性不同而達(dá)到分離。手性流動(dòng)相添加劑法則是通過對映體與添加到流動(dòng)相的手性物質(zhì)分子形成一對非對映的絡(luò)合物，由于非對映絡(luò)合物的穩(wěn)定性、在流動(dòng)相中溶劑化作用或絡(luò)合物與固定相的鍵合等性質(zhì)的差異而得到分離。與間接法相比，直接法避免了煩瑣的衍生化操作，具有較大優(yōu)勢。目前市場上氣相色譜法、高效液相色譜法及超臨界流體色譜法設(shè)計(jì)所使用到的手性固定相已有許多成品出售，其應(yīng)用日益廣泛。但手性固定相的價(jià)格相對較高，在一定程度上限制了它的使用。新的手性固定相和手性流動(dòng)相仍不斷出現(xiàn)。 色譜分離法因其優(yōu)秀的分辨能力，成為應(yīng)用最 廣的手性拆分方法，尤其在分離分析和純度檢測方面應(yīng)用更廣。目前手性拆分屬于色譜研究領(lǐng)域的最熱點(diǎn)和最前沿，在這方面有大量的文獻(xiàn)報(bào)道。 各種不同的手性固定相具有不同的分離模式， 從理論上講，不管選擇何種固定相，分離何種對映體，手性分離或手性識別都必須滿足同時(shí)有三個(gè)相互作用點(diǎn)， 這些作用中至少一個(gè)是立體化學(xué)決定的， 這個(gè)原理 1952 年首次由 第一章 文獻(xiàn)綜述 8提出，即著名的“三點(diǎn)作用原理”43。 近年來利用毛細(xì)管電泳拆分手性化合物的報(bào)道 日益增多，尤其是使用環(huán)糊精及其衍生物為手性選擇劑的報(bào)道占主要部分，其他如冠