1,課題2月季的花藥培養(yǎng),2,1、被子植物定義：凡是種子有果皮包被著，胚珠有子房壁包被著的植物，就叫做被子植物,被子植物和裸子植物,2、裸子植物定義：凡是胚珠裸露，外面沒有子房壁包被，種子外面沒有果皮包被的植物稱為裸子植物,實(shí)例：哈密瓜、杏、桃子,實(shí)例：松、紫衫、鐵樹,3,被子植物,哈密瓜,桃子,4,裸子植物,5,月季：被子植物,6,花絲,花藥,一、被子植物的花粉發(fā)育,雄蕊,7,被子植物的花粉發(fā)育,花絲：支撐著花藥的結(jié)構(gòu),花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉粒,花粉是花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：小孢子四分體時期、單核期（居中、靠邊）、雙核期,雄蕊,8,9,花粉粒,小孢子四分體時期,單核居中期,單核靠邊期,雙核期,小孢子母細(xì)胞,1花粉母細(xì)胞,4個小孢子,減數(shù)分裂,有絲分裂,4個營養(yǎng)細(xì)胞核,4個生殖細(xì)胞核,有絲分裂,8個精子,4個花粉粒,10,二、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑,移栽,花藥中的花粉,胚狀體,脫分化,愈傷組織,花藥中的花粉,脫分化,分化,叢芽,再分化,叢芽,誘導(dǎo),生根,取決于：培養(yǎng)基中激素種類及其濃度配比,11,二倍體,單倍體,12,愈傷組織：在人工培養(yǎng)基上由外植體長出來的一團(tuán)無序生長的薄壁細(xì)胞（細(xì)胞排列疏松、無規(guī)則）。,13,體細(xì)胞胚：在組織培養(yǎng)過程中，某些體細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似，被稱為體細(xì)胞胚。,花粉胚：最后發(fā)育成單倍體植株,胚狀體,14,植物類型:不同種植物誘導(dǎo)成功率不同,生理狀態(tài)：花期早期的花藥反應(yīng)能力較好,花粉發(fā)育時期：單核靠邊期,三、影響花藥培養(yǎng)的因素,其他因素,15,完全未開放的月季花蕾（選）,略微開放的月季花蕾,16,為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難？花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。,17,四、實(shí)驗(yàn)操作,（一）材料的選取,焙花青-鉻礬法藍(lán)黑色,最常用：醋酸洋紅法紅色,1、方法,18,醋酸洋紅的配置,2、醋酸洋紅法,染色操作,3、焙花青鉻釩法,卡諾氏固定液的配制方法,焙花青鉻釩溶液的配制方法,染色操作,19,（二）材料的消毒,1、酒精處理,酒精：70%的酒精浸泡，30秒無菌水清洗無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分,2、消毒液處理,放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中24分鐘（也可質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液）無菌水沖洗35次,20,（三）接種和培養(yǎng),要徹底去除花絲,1、剝?nèi)』ㄋ帲o菌條件）,勿損傷花藥,注意：,每瓶接種花藥7-10個。,2、接種,21,培養(yǎng)條件：溫度：25左右，不需要光照,3、培養(yǎng),培養(yǎng),注意：必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,主要原因：營養(yǎng)核和生殖核融合,4、鑒定和篩選,22,選材是否恰當(dāng)選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。應(yīng)學(xué)會通過顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。,五：課題成果評價,23,無菌技術(shù)是否過關(guān)如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，說明某些操作步驟，如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問題。,24,接種是否成功如果接種的花藥長出愈傷組織或釋放出胚狀體，花藥培養(yǎng)