ICS6502001 B16 . . 中 華 人 民 共 和 國 國 家 標 準 GB/T289842012 香蕉苞片花葉病毒檢疫鑒定方法 Detectionandidentificationofbananabractmosaicvirus2012-12-31發(fā)布 2013-06-01實施 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局 發(fā) 布 中 國 國 家 標 準 化 管 理 委 員 會 GB/T289842012 前 言 本標準按照 給出的規(guī)則起草 GB/T1.12009 。 本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會 提出并歸口 (SAC/TC271) 。 本標準起草單位 中華人民共和國寧波出入境檢驗檢疫局 中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫 : 、局 中國檢驗檢疫科學研究院 中華人民共和國浙江出入境檢驗檢疫局 、 、 。 本標準主要起草人 聞偉剛 郭立新 楊翠云 陳先鋒 雷榮 張永江 張明哲 徐瑛 崔俊霞 張慧麗 : 、 、 、 、 、 、 、 、 、 。 GB/T289842012 香蕉苞片花葉病毒檢疫鑒定方法1 范圍 本標準規(guī)定了香蕉苞片花葉病毒血清學和分子生物學特征的檢測方法 。 本標準適用于香蕉組培苗和植株等芭蕉屬寄主植物材料中香蕉苞片花葉病毒的檢測 也適用于蚜 , 蟲等傳播媒介中該病毒的檢測 。2 香蕉苞片花葉病毒基本信息 中文名 香蕉苞片花葉病毒 : 學 名 :bananabractmosaicvirus 縮 寫 :BBrMV 屬馬鈴薯 病毒屬 Potyvirus 香蕉苞片花葉病毒其他信息參見附錄 Y ( ), A。3 方法原理 利用基于抗原抗體反應的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測定 (Doubleantibodysandwichenzyme-linked 體 外 合 成 技 術 的 反 轉 錄 聚 合 酶 鏈 式 反 應immunosorbentassay,DAS-ELISA)、 DNA (Reverse 實 時 熒 光 反 轉 錄 聚 合 酶 鏈 式 反 應transcriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)、 (real-time 進行檢測鑒定fluorescentRT-PCR) 。4 儀器設備 用具和試劑 、41 儀器設備 . 常規(guī) 儀 實時熒光 儀 超凈工作臺 電子天平 感量 電泳儀 電泳槽 凝膠成像 PCR 、 PCR 、 、 ( :0.001g)、 、 、 系統(tǒng) 高速冷凍離心機 超低溫冰箱 高壓滅菌鍋 小型食品加工機 微波爐 酶標儀 、 、 (-80 )、 、 、 、 。42 用具 . 可調(diào)式微量移液器 及相應的無 吸頭 無 (2L、10L、100L、200L、1000L、5000L) RNase 、 離心管 管和研缽等RNase 、PCR 。43 試劑 . 主要試劑和緩沖液見附錄 和附錄 B C。5 檢測