ICS1104030 C30 . . 中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準 YY/T09932015 醫(yī)療器械生物學評價 納米材料 : 體外細胞毒性試驗 MTT試驗和LDH 試驗 ( ) BioloicalevaluationofmedicaldevicesNanomaterial g : Invitroctotoxicit tests MTTassa andLDHassa y y ( y y)2015-03-02發(fā)布 2016-01-01實施 國家食品藥品監(jiān)督管理總局 發(fā) 布YY/T09932015 目 次 前言 引言 范圍1 1 規(guī)范性引用文件2 1 術(shù)語 定義和縮略語3 、 1 樣品 對照品和試劑制備4 、 2 細胞系5 3 培養(yǎng)液6 3 試驗過程7 4 數(shù)據(jù)記錄與分析8 5 接受準則9 6 結(jié)果評定10 6 附錄 資料性附錄 試劑 耗材及設備 A ( ) 、 8 附錄 資料性附錄 孔板加樣模板示例 B ( ) 96 9 參考文獻 10 YY/T09932015 前 言 本標準按照 給出的規(guī)則起草 GB/T1.12009 。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利 本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些專利的責任 。 。本標準由國家食品藥品監(jiān)督管理總局提出 。本標準由中國食品藥品檢定研究院歸口 。本標準起草單位 中國食品藥品檢定研究院 : 。本標準主要起草人 徐麗明 邵安良 袁博 付海洋 姜華 馮曉明 王春仁 : 、 、 、 、 、 、 。 YY/T09932015 引 言 納米材料引起細胞毒性的機理主要包括對細胞線粒體功能的影響及對細胞膜的損傷 可以分別用 , 二甲基 噻唑 二苯基 氫 四氮唑溴 試驗和乳酸脫氫酶 試驗進行檢測3-(4,5- -2- )-2,5- -2 - (MTT) (LDH) 。 然而 有些納米材料可能對 測試和 測試有一定的干擾 檢測時需要排除干擾因素來獲得準 , MTT LDH , 確結(jié)果 為建立 適 合 納 米 材 料 及 組 合 在 醫(yī) 療 器 械 中 納 米 材 料 的 細 胞 毒 性 評 價 方 法 本 標 準 作 為 。 , 細胞毒性試驗的補充 增加了排除干擾因素的處理方法以及陽性對照的選擇 同時 增GB/T16886.5 , 。 , 加了 試驗方法 用以定量地評價納米顆粒對細胞膜的損傷 本標準作為適合納米材料的 試 LDH , 。 MTT 驗和 試驗的試驗方法標準 為正確評價納米材料及組合在醫(yī)療器械中納米材料的細胞毒性提供 LDH , 技術(shù)支持 。 YY/T09932015 醫(yī)療器械生物學評價 納米材料 : 體外細胞毒性試驗 MTT試驗和 LDH 試驗 ( )1 范圍 本標準規(guī)定了納米材料及組合在醫(yī)療器械中的納米材料的體外細胞毒性試驗方法 試樣制備 操作 、 、 步驟及評價 。 本標準適用于納米材料及組合在醫(yī)療器械中的納米材料 顆粒或纖維被包裹或結(jié)合在一種不能釋 ( 放或非游離狀態(tài)的除外 的體外細胞毒性評價 包括以 為受試細胞的 試驗和 試驗 ) , L929 MTT LDH 。 本標準是 的補充 GB/T16886.5 。2 規(guī)范性引用文件 下列文件對于本文件的應用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 僅注日期的版本適用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改單 適用于本文件 。 , ( ) 。 醫(yī)療器械生物學評價 第 部分 風險管理過程中的評價與試驗 GB/T16886.1 1 : 醫(yī)療器械生物學評價 第 部分 體外細胞毒性試驗 GB/T16886.5 5 : 醫(yī)療器械生物學評價 第 部分 樣品制備與參照樣品 GB/T16886.12 12 :3 術(shù)語 定義和縮略語 、31 術(shù)語和定義 . 界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件 GB/T16886 。311 . 納米材料 nanomaterial 物質(zhì)結(jié)構(gòu)在三維空間中至少有一維處于納米尺度 或由納米結(jié)構(gòu)單元構(gòu)成的且具 有 特 殊 性 質(zhì) 的 , 材料 。312 . 納米材料醫(yī)療器械 nanomaterialmedicaldevices 組合有或含有納米材料的醫(yī)療器械 。32 縮略語 . 下列縮略語適用于本文件 。 對乙酰氨基酚 APAP: (acetaminophen) 二甲基亞砜 DMSO: (dimethylsulfoxide) 胎牛血清 FBS: (fetalbovineserum) 小鼠成纖維細胞