基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文精品論文中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育和功能的影響及其機(jī)制研究關(guān)鍵詞免疫抑制劑中藥單體樹突狀細(xì)胞趨化性受體趨化作用中藥化學(xué)摘要本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異?？傊?，MD3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。正文內(nèi)容本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異?？傊?，MD3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異?？傊琈D3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異?？傊?，MD3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異。總之，MD3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異?？傊琈D3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異。總之，MD3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異。總之，MD3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異?？傊琈D3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響，我們首先應(yīng)用不同濃度0、04、4、20、40、80MOL/ML的MD3處理DCS并檢測了其分化發(fā)育的情況。正常培養(yǎng)DCS3天換液時(shí)，加入不同濃度的藥物MD3，繼續(xù)作用72小時(shí)候，進(jìn)行一系列觀察和檢測。首先，進(jìn)行形態(tài)學(xué)方面的觀察，在顯微鏡下觀察可見，在004MOL/M的濃度范圍之內(nèi)，藥物MD3并不顯著影響DCS的增殖，在低倍鏡下觀察，DCS的集落的數(shù)量、形態(tài)、大小沒有顯著的差異。而在20MOL/ML的濃度時(shí)，DCS的集落形態(tài)明顯變小，數(shù)量上差異特別明顯。在4080MOL/ML的濃度時(shí)，幾乎看不到集落的形成。收集經(jīng)過同樣處理的DCS，進(jìn)行了細(xì)胞凋亡的研究，在以ANNEXINV、7AAD和RHO123標(biāo)記后，結(jié)果顯示，藥物MD3在藥理濃度004MO/ML范圍內(nèi)，并不顯著抑制DCS的增殖。以小鼠DCS的典型標(biāo)志CD11C標(biāo)記小鼠，并以7AAD去除死細(xì)胞，來觀察藥物處理的DCS的純度，結(jié)果顯示，在藥理濃度范圍內(nèi)，MD3并不影響DCS的分化，僅在較高濃度和高濃度時(shí)，DCS的分化能力降低。同時(shí)，我們以4MO/MLMD3處理正常培養(yǎng)3天的DCS，繼續(xù)培養(yǎng)3天后，觀察DCS表型的變化，結(jié)果顯示，藥物處理后的DCS的表型并沒有變化，這也提示MD3并不影響DCS的分化發(fā)育。我們還觀察了不同時(shí)間點(diǎn)加入藥物后，DCS的增殖況，結(jié)果顯示，不同時(shí)間處理的DCS也沒有顯著的差異?？傊琈D3對DCS的分化發(fā)育并沒有顯著的影響。但超過藥理濃度的MD3對于DCS具有明顯的促凋亡作用，表明對于該單體的結(jié)構(gòu)可能還需要進(jìn)一步改造以減輕其毒副作用。二、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞功能的影響及其作用機(jī)制DCS的主要功能包括吞噬功能、細(xì)胞因子的分泌功能、遷移能力以及抗原處理和提呈功能等。在本部分研究中，我們就MD3對于DCS功能的調(diào)節(jié)作用展開了研究。首先，觀察了MD3對DCS吞噬能力的影響，結(jié)果顯示，MD3對未成熟和成熟DCS的吞噬能力都沒有顯著的影響。我們也檢測了MD3處理后經(jīng)I，PS刺激的成熟DCS的表型，結(jié)果顯示沒有明顯的變化。在細(xì)胞因子的分泌方面，我們觀察到MD3處理后的DCS的IL10分泌增高，TNF和IL12P70的表達(dá)沒有明顯的變化。DCS的遷移能力對于體內(nèi)DCS的生物學(xué)功能的發(fā)揮也有重要的作用。在體外的趨化實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)MD3可以抑制MIP1對未成熟DCS的趨化，而對MIP3對成熟的DCS的趨化能力沒有影響。我們也對其機(jī)制進(jìn)行了一些研究，結(jié)果顯示，其顯著降低未成熟DCS表面的趨化性受體的表達(dá)，而在成熟DCS趨化性受體CCR7的表達(dá)沒有顯著影響。此外，我們也觀察了MD3處理的經(jīng)LPS刺激的DCS誘導(dǎo)同種異體T淋巴細(xì)胞和特異性T淋巴細(xì)胞增殖的能力，結(jié)果顯示，MD3對此均具有一定的抑制作用。綜上所述，本研究結(jié)果顯示中藥單體MD3對DCS分化發(fā)育沒有顯著影響，但是可以顯著影響未成熟樹突狀細(xì)胞的趨化并促進(jìn)成熟DCS分泌IL10。這兩方面的功能都表明MD3很可能具有開發(fā)和應(yīng)用的前景。對于MD3作用的信號機(jī)制以及在體內(nèi)是否具有免疫抑制作用，還需要進(jìn)一步研究。本課題組與之合作，從中篩選出多種對于免疫功能具有調(diào)控作用的單體成分。其中，一種對于樹突狀細(xì)胞DENDRITICCELLS，DCS的功能具有調(diào)控作用的單體MD3引起了我們的興趣。樹突狀細(xì)胞是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞，在免疫應(yīng)答與免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)免疫抑制性藥物對免疫功能的抑制作用和其對于DCS功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。本課題重點(diǎn)分析了中藥單體MD3對DCS發(fā)育分化和功能的影響，并初步分析了其作用的機(jī)制。一、中藥單體MD3對樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的影響為了分析MD3對DCS發(fā)育分化的影響