1、低溫誘導植物染色體數(shù)目的變化一、實驗教學目標1. 知識目標：理解低溫誘導植物細胞染色體數(shù)目變化的作用機制。2. 能力目標：學會低溫誘導植物染色體數(shù)目變化的方法。3. 情感態(tài)度價值觀：體會實驗結果帶來的成就感，感受團隊合作的快樂。二、 實驗原理進行正常有絲分裂的植物分生組織細胞，在有絲分裂后期，染色體的著絲點分裂，子染色體在紡錘絲的作用下，分別移向兩極，最終被平均分配到兩個子細胞中去。用低溫處理植物分生組織細胞，能夠抑制紡錘體的形成，以致影響染色體被拉向兩極，使細胞也不能分裂成兩個子細胞。結果，植物細胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。三、實驗儀器材料洋蔥或大蔥、蒜、培養(yǎng)皿、濾紙、紗布、燒杯、鑷子、剪刀、顯微

2、鏡、載玻片、蓋玻片、冰箱、卡諾氏液、改良苯酚品紅染液、體積分數(shù)為15%的鹽酸溶液、體積分數(shù)為95%的酒精溶液。4、 實驗方法1. 培養(yǎng)根尖：將洋蔥放在裝滿清水的廣口瓶，讓洋蔥的底部接觸水面。2. 低溫誘導：待洋蔥長出1cm左右的不定根時，將整個裝置放入冰箱的低溫室（4）內(nèi)，誘導培養(yǎng)36小時。3. 固定細胞形態(tài)：剪去誘導處理的根尖約0.5-1cm，放入卡諾氏液中浸泡0.5-1小時，以固定細胞的形態(tài)，然后用體積分數(shù)約95的酒精沖洗2次。4. 制作裝片：取固定好的根尖，進行解離；漂洗；染色；制片4個步驟，具體操作方法與“觀察植物細胞的有絲分裂”實驗相同。5. 觀察裝片：先用低倍鏡尋找染色體形態(tài)較好的

3、分裂相。視野中既有正常的二倍體細胞，也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞，發(fā)生染色體數(shù)目變化的細胞中染色體數(shù)目可能為正常細胞的兩倍。確認某個細胞發(fā)生染色體數(shù)目變化后、再用高倍鏡觀察。6.記錄結果：對看到的發(fā)生染色體數(shù)目加倍的細胞拍照記錄。試劑及用途：(1) 卡諾氏液：固定細胞形態(tài)。(2) 95%酒精：沖洗附著在根尖表面的卡諾氏液。(3) 解離液：(質(zhì)量分數(shù)為15%HCI和體積分數(shù)為95%酒精1:1混合)使組織中的細胞分離開。(4) 清水：洗去解離液，防止解離過度，便于染色。(5) 改良苯酚品紅染液：使染色體著色。五、實驗數(shù)據(jù)的采集分析（一）學生觀察到的較好的實驗結果后，由老師拍照記錄。（二）造成看不到

4、染色體數(shù)加倍細胞原因較多，常見原因有：1. 沒有培養(yǎng)出分生區(qū)或沒有剪取到分生區(qū)2. 低溫誘導時間不足3. 解離不充分或漂洗不干凈造成染色不足4. 染色時間控制不當，看不清染色體5. 沒有低倍鏡尋找過程六、實驗總結反思與修正1. 針對新洋蔥不容易生根的問題，解決方法為：先將新洋蔥放在干燥、通風、陽光下曬10天左右，再放入冰箱中低溫室內(nèi)（4左右均可）3-5天左右，可以解除休眠，就很容易發(fā)根了。2. 針對剪取根尖時，很多根尖已經(jīng)被上一個班級的同學剪掉，導致實驗失敗的問題，解決方法為：每次剪取根尖時先把根從基部剪掉，然后剪取上面的根尖，這樣，就可以避免以上問題的出現(xiàn)。3針對調(diào)整解離時間和解離方式的問題。解決方法為： 解離時間少于5分鐘解離效果不太好，在制作裝片時細胞分散效果不好。解離時將根尖放在培養(yǎng)皿的邊上，傾斜放置培養(yǎng)皿，滴加1毫升的解離液解離即可，這樣用量少，既節(jié)約又更加安全?；蛘咴诰凭珶艋鹧嫔仙晕⒓訜?，可以節(jié)省解離的時間。4. 針對染色液的濃度和染色時間的問題，解決方法為：將初始染液稀釋10倍，并且染色時間為3分鐘，效果最好。如果染色液不稀釋，就會把染色體染色太深，以至于在顯微鏡下觀察時，看到的是深藍的一片，很難分辨一條條的染色體。將染液稀釋10倍，并且染色時間減少為3分鐘，染色清晰、而且時間長也不影響染色效果