1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上細(xì)胞遺傳學(xué)（染色體核型）分析       克隆性染色體異常是診斷惡性血液病的重要依據(jù)。許多特異性染色體畸變和特定的惡性血液病亞型相聯(lián)系，因而成為惡性血液病診斷分型的重要指標(biāo)；診斷時(shí)的染色體核型對惡性血液病具有獨(dú)立的預(yù)后價(jià)值，對于治療方案的選擇具有指導(dǎo)意義；同時(shí)染色體畸變可作為監(jiān)測白血病緩解、復(fù)發(fā)及突變的重要參考指標(biāo)，也為分子學(xué)研究提供了重要線索。比如t(9;22)異常的急性淋巴細(xì)胞白血病、復(fù)雜染色體異常的白血病預(yù)后很不好，應(yīng)盡早進(jìn)行異基因造血干細(xì)胞移植等。WHO制定的惡性血液病分型系統(tǒng)中，將染色體核型作為最重

2、要的分型及診斷指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)重現(xiàn)性異常的染色體可提前作出AML的診斷。很多染色體異常導(dǎo)致特異性的白血病融合基因。染色體分析除用于各類惡性血液病患者，如急、慢性白血病、MDS、MPNs、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者外，還可用于兒童遺傳性疾病、先天性畸形的染色體檢測，以及習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕不育等疾病的診斷。但是染色體分裂相的制備和分析具有一定的難度，需要時(shí)間長，因此導(dǎo)致臨床染色體的診斷缺乏及時(shí)性，往往發(fā)報(bào)告時(shí)間需要一個(gè)月甚至更長的時(shí)間；染色體核型分析需要細(xì)胞分裂才能完成，因此需要細(xì)胞具有良好的分裂活性，部分患者的細(xì)胞不分裂就不能觀察到可供分析的中期分裂相（正常染色體分裂相，核型排列后如圖3和圖4），

3、在一定程度上影響了患者的確診和治療。此外染色體一般只能分析20-30個(gè)分裂相細(xì)胞，敏感性只有百分之一，當(dāng)異常細(xì)胞比例較低時(shí)，也難以發(fā)現(xiàn)異常的染色體。異常染色體核型的判斷需要經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員，尤其對一些復(fù)雜染色體異常，或異常較小的染色體，往往難以正確判斷。采用染色體全自動掃描暨自動核型分析系統(tǒng)可以加快染色體檢測和發(fā)報(bào)告速度。通過加用一些促細(xì)胞分裂的試劑可增加可供分析的核型。  圖3 正常男性的染色體核型  圖4:正常女性核型 46,XX 不同血液惡性腫瘤常見的染色體異常見表2，具體介紹如下。 表2 白血病和淋巴瘤常見的染色體易位和融合

4、基因細(xì)胞類型       疾病                  染色體異常                     融合基因髓細(xì)胞    

5、    AML/M2            t(8;21)(q22;q22)          AML1/ETG8(ETO)                 AML/M2(M4)   

6、60; t(6;9)(p23;q34)            DEK/CAN                 AML-M3            t(15;17)(q22;q11-22)  

7、 PML/RAR                 AML-M4            inv(16)(p13;q22)          CBFb/MYH11         &#

8、160;       AML                  t(6;11)(q27;q23)          MLL/AF6              &

9、#160;  AML                  t(11;19)(q23;p13.1)     MLL/ELL                 AML        

10、60;         t(11;17)(q23;q21)        MLL/AF17                 AML              

11、   t(10;11)(p12;q23)        MLL/AF10                 AML                 dupMLL(11q23)   &

12、#160;         dupMLL                 AML                 t(16;21)(p11;q22)       

13、0; TLS/ERG                 AML                 t(9;11)(p22;q23)           MLL/AF9    

14、             CML                 t(9;22)(q34;q11)           BCR/ABL         

15、;        HES;CEL          Del4q                             FIP1L1/PDGFRaB細(xì)胞  &#

16、160;     B-淋巴瘤            t(14;18)(q32;q21)         BCL-2/IgH                Burkitt淋巴瘤     t(8

17、;14)(q24;q32)           MYC/IgHT細(xì)胞        T-ALL                t(8;14)(q24;q11)           MYC/TCR   

18、             T-ALL                t(X;11)(q13;q23)           MLL/AFX          &#

19、160;     T-ALL                t(1;11)(p32;q23)           MLL/AF1p                T-ALL 

20、60;              t(11;19)(q23;p13.3)      MLL/ENL                T-ALL              &

21、#160;TAL1D                             SIL/TAL1                T-ALL    

22、60;          t(16;21)(p11;q22)          TLS/ERG                T-ALL             

23、0; t(11;14)(p15;q11)          Rhom-1，TTG-1/TCR 1. 伴有特異性遺傳學(xué)異常的AML    在這一AL亞群中，WHO確認(rèn)了以下四種特征明確的遺傳學(xué)異常，在原發(fā)性AML中此類異常占30%，這類AML有獨(dú)特的臨床表現(xiàn)。l   t（8；21）（q22；q22）和/或AML1-ETO基因的AML，采用含大劑量阿糖胞苷的化療方案治療，臨床治愈率可達(dá)50%，被分類為低危險(xiǎn)性AML（如圖5）。 &

24、#160;                       圖5   多發(fā)于急性粒細(xì)胞白血病M2型：46,XX,t(8;21)(q22;q22) l      t（15；17）（q22；q12）和/或PML-RAR融合基因及其變異型的APL，用全反式維甲酸及砷劑療效好，采用化療+砷劑+全反式維甲酸聯(lián)合方

25、案治療，臨床治愈率可達(dá)70%-95%，被分類為低危險(xiǎn)性AML（如圖6）。                       圖6   急性早幼粒細(xì)胞白血?。?6,XX,t(15;17)(q22;q12) l      染色體inv（16）（p13；q22）或t（16；16）（p13；q22）和/或CBF-

26、 MYH融合基因的AML，常伴有嗜酸細(xì)胞增加。采用含大劑量阿糖胞苷方案的化療療效好，臨床治愈率可達(dá)50%以上，被分類為低危險(xiǎn)性AML（如圖7）。                        圖7  急性粒細(xì)胞白血病M4EO型：46,XX,inv(16)(p13q22) l      伴有染色體11q23和/

27、或MLL基因異常的AML，預(yù)后較差，尤其是MLL-AF4異常，被分類為高危險(xiǎn)性AML（如圖8）。                          圖8:  多發(fā)于急性粒細(xì)胞白血病M5型：46,XY,del(11q23) 2. 急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)的染色體異常B-ALL系列常見的染色體異常有:Ø &#

28、160;       t(14;11)(q21;q23)  見于30%-60%的新生兒和嬰兒ALL，臨床上常有高白細(xì)胞計(jì)數(shù)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累，預(yù)后不良。Ø         t(1;19)(q23;p13)  見于5%-6%的兒童ALL，預(yù)后不良（圖9）。  圖9 急性B淋巴細(xì)胞白血病，46,XX,t(1;19)(q12;p13) Ø    

29、0;    t(9;22)(q34;q11)，  見于2%-5%的兒童ALL和15%-30%的成人ALL，化療效果差，預(yù)后不良。Ø         t(12;21)(p13;q22) 見于12%-27%的兒童ALL，為兒童B細(xì)胞ALL中最常見的畸變，CR率高，復(fù)發(fā)少見，預(yù)后較好。 T-ALL系列的染色體斷裂點(diǎn)常涉及T細(xì)胞抗原受體(TCR)基因所在位點(diǎn)，有：Ø       

30、60; t(11;14)(p13;q11) Ø         t(10;14)(q24;q11) Ø         t(1;14)(p32;q11)Ø         t(8;14)(q24;q11) Ø         t(11;14

31、)(p15;q11) 系列非特異性ALLØ         6q-  常見于4%-13%的兒童ALL，成人ALL較少見，預(yù)后較好；Ø         9p-  見于7%-12%的ALL，預(yù)后不良；Ø         12p- 見于10%-12%的ALL，缺失或易位，預(yù)后較好； 3. 慢性粒細(xì)胞白血病

32、(CML)的染色體異常    根據(jù)WHO的建議，雖然根據(jù)臨床表現(xiàn)、肝脾明顯腫大的體征、血液粒細(xì)胞明顯升高、骨髓以成熟粒細(xì)胞增生為主的特征應(yīng)考慮CML的診斷，但遺傳學(xué)或基因檢查確證是必需的，診斷CML必須有t(9;22)(q34;q11) （如圖10）、或其變異型染色體異常，和/或BCR-ABL融合基因；如果僅有以上臨床、血液學(xué)及骨髓特征，只能診斷為不典型CML。在CML加速期和急變期，20%的患者保持原核型不變，80%的患者可發(fā)生核型演變，即出現(xiàn)額外的染色體異常，常見的依次為：+Ph+、+8、i（17q）、+19、+21。因此，病程中定期的染色體檢查，有助于早期診

33、斷CML是否進(jìn)入加速期或急變期。典型的CML患者對格列衛(wèi)治療的反應(yīng)好，大部分患者可達(dá)到細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)的緩解，即Ph+染色體和BCR-ABL融合基因消失。              圖10：慢性粒細(xì)胞白血病患者，46,XY,t(9;22)(q34;q11) 4. 慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)的染色體異常    CLL患者核型演變很少見，無核型異常者，預(yù)后較好；有核型異常者，均提示預(yù)后不良。12號染色體三體（+12）最為常見（如圖10），其次為3號和18號染色體三體。在結(jié)構(gòu)異常中，13q-和14q+較常見。  圖11: 慢性淋巴細(xì)胞白血病患者：46,XX,+12 5. 骨髓增生異常綜合征(MDS)的染色體異常    大約40%-70%的MDS有克隆性染色體改變。典型的異常為：+8、-5、del（5q）、-7、del（7q）、del(11q)、del（11p）、del（17p）、del（20q）（如圖11）等等。(5q31、CEP7、7q3