1、421零點波長處測定待測組分含量3。對雙組分定量而言,褶合光譜法可自動定位在其中一組分褶合曲線貢獻(xiàn)為零的波長處,計算另一組分對混合物褶合曲線的貢獻(xiàn),從而達(dá)到不經(jīng)分離同時測定兩組分含量的目的4。為了獲得最佳測試結(jié)果,在進(jìn)行褶合光譜分析時將測得的吸收曲線進(jìn)行波長范圍的截取和波長間隔的選擇是非常重要的,本文經(jīng)實驗選取波長為200260nm,間隔2nm,結(jié)果滿意。氫化可的松在水中不溶,可用無水乙醇溶解稀釋5,經(jīng)實驗測定氯化鈉(%)圖3鹽酸麻黃堿的最佳褶合光譜表2樣品含量測定結(jié)果樣品批號2003061620030702和羧甲基纖維素鈉溶液在模擬樣品溶液中,在波長200260nm范圍內(nèi)無紫外吸收。4參考文

2、獻(xiàn)12氫化可的松98.5897.42鹽酸麻黃堿1999.13621(10):927-9283討論褶合光譜法的優(yōu)點在于它不僅充分估價了整個光區(qū)的吸收度信息,而且更著眼于捕捉物質(zhì)對光吸收特性的變化信息2。褶合光譜法采用全光譜數(shù)據(jù),一條吸收曲線可以得到成百上千條褶合曲線,提供定量分析的信息量大,在干擾組分的褶合曲線過345(2004-02-19收稿,責(zé)任編輯郭青)原發(fā)性肝癌雄激素受體表達(dá)的臨床病理研究楊淑云李海霞劉彩萍(武警山西總隊醫(yī)院病理科,太原030006)摘要目的探討原發(fā)性肝癌患者雄激素受體的改變對肝癌發(fā)生發(fā)展的影響。方法應(yīng)用放射配體結(jié)合分析法(RBA)對36例行手術(shù)切除的肝癌組織、癌周組織及

3、外周血白細(xì)胞雄激素受體(Androgenreceptor,AR)的含量進(jìn)行測定,同時用放射免疫法(RIA)測定肝癌患者及正常人血漿雄激素(睪酮T)的水平,結(jié)合臨床病理資料進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果(1)癌組織與癌周組織相比,AR含量明顯升高(P<0.01),且與腫瘤直徑大小有關(guān);(2)高分化的肝癌組織AR含量明顯高于低分化者(P<0.01);(3)肝癌患者血漿睪酮水平增加不明顯(P>0.05),但白細(xì)胞AR表達(dá)明顯升高(P<0.01)。結(jié)論肝癌的發(fā)生可能與癌組織中AR含量升高有關(guān),AR的含量與腫瘤的大小及分化程度存在相關(guān)性。關(guān)鍵詞肝癌雄激素受體Clinicopathologic

4、alstudyonexpressionofandrogenreceptorinhepatocellularcarcinomaYANGShuyun,LIHaixia,andLIUCaiping.DepartmentofPathology,ShanxiProvincialCorpsHospital,ChinesePeoplesAremedPoliceForces,Taiyuan030006,ChinaAbstractObjectiveTostudythechangesinlevelsofandrogen作者簡介:楊淑云,女,1969年出生。大專學(xué)歷,主治醫(yī)師。主要從事臨床病理學(xué)工作。recepto

5、r(AR)inpatientswithhepatocellularcarcinoma.MethodsRa2dioligandbindingassay(RBA)wasadoptedtomeasuretheandrogenre2422ceptor(AR)incancertissueandadjacentnon2tumortissueandperipheralbloodleucocytesin36patientswithhepatocellularcarcinoma.Hor2moneradiloimmunoassay(RIA)wasperformedtodetermineserumtestoster

6、onelevelinpatientsandnormalsubjects.Results(1)ThecontentofARinthetumorsampleswassignificantlyhigherthanthatinthesurroundingnon2tumorlivertissue(P<0.01),andhadarelationshipwiththesizeofthetumor;(2)ThecontentofARinthehighdifferentiatedphenotypewashigherthanthatinthelessdifferentiatedphenotype(P<

7、0.01);(3)Thelevelofserumtestosteroneinpatientswasslightlyelevated(P>0.05),butthecontentofARinleucocyteswassignificantlyTheoccurrenceofhepatocellulacarcinomaisprobablycorrelatedwithhighercontentofAR,whereastheincreased(P<0.01).ConclusioncontentofARisrelatedtothesizeanddifferentiationdegreeofthe

8、tumorKeywordsHepatocellularcarcinomaAndrogenreceptor受體是介導(dǎo)生長調(diào)節(jié)因子及激素作用的關(guān)鍵大分子,其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用日益受到關(guān)注。動物實驗表明,肝癌鼠的雄激素受體(Androgenre2ceptor,AR)升高,同肝癌的其他標(biāo)記物一樣,AR是肝癌產(chǎn)生和發(fā)展的標(biāo)記物之一,并且與肝癌術(shù)后的復(fù)發(fā)有關(guān)1-3。關(guān)于肝癌時雄激素及其受體的改變與臨床病理特征的研究,作者尚未見國內(nèi)報道。本研究探討肝癌患者雄激素及AR改變,結(jié)合臨床病理資料進(jìn)行統(tǒng)計分析,旨在闡明肝癌的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律,并為肝癌的內(nèi)分泌治療探索新的路子。1資料和方法1.1一般資料標(biāo)本取自3

9、6例原發(fā)性肝癌患者,中心組織1塊,以及距腫瘤邊緣5cm以外,外觀正常的肝組織1塊,用冰冷的生理鹽水沖洗,吸干后切成小塊,液氮凍存。男27例,女9例,年齡2968歲,平均(50.6±12.5)歲,腫瘤直徑5cm者17例,>5cm者19例,所有患者均經(jīng)病理證實為原發(fā)性肝細(xì)胞癌。另取36例年齡、性別與肝癌組相匹配的獻(xiàn)血員空腹靜脈血作為對照組。1.2主要試劑3H-R1881(美國Dupont公司)放化純度100%,放射比度87Ci/mmol,放化濃度1mci/ml;R1881(美國Dupont公司);DcxtranT70、T500(Pharmacia藥廠);閃爍液:1,4-雙-5-苯基

10、惡唑基-苯(POPOP)0.4g,2,5-二苯基惡唑(PPO)4.0g,TritonX-100200ml,二甲苯800ml;Tris緩沖液;睪酮試劑盒(九鼎公司)。1.3實驗方法的檢測取肝癌組空腹靜脈血8ml,肝素抗凝,1500r/min離心15min,取血漿用放射免疫測定法檢測睪酮(T)水平;用趙瑛等4方法分離白細(xì)胞、測定白細(xì)胞AR。用相同的方法檢測對照組血漿睪酮(T)水平及白細(xì)胞AR水平。1.4統(tǒng)計學(xué)處理所有數(shù)據(jù)用 x±s表示,采用SPSS1010軟件進(jìn)行t檢驗及方差分析。2結(jié)果2.1不同直徑的癌組織、癌周組織AR水平、血漿T及白細(xì)胞AR的測定結(jié)果見表1。癌組織與癌周組織相比,A

11、R含量明顯升高(P<0.01),且與腫瘤直徑大小有關(guān)。肝癌患者血漿睪酮水平輕度增加(P>0.05),但白細(xì)胞AR表達(dá)明顯升高(P<0.01)。表1不同直徑的癌組織、癌周組織AR水平、血漿T及白細(xì)胞AR的測定結(jié)果組別肝癌組腫瘤直徑5cm腫瘤直徑>5cm對照組n( x±s)AR(fmol/mg蛋白)血漿T白細(xì)胞AR(位點/細(xì)胞)1116±681279±72976±65659±32癌組織36171936-癌周組織-注:與腫瘤直徑>5cm者比較,P<0.01;與癌周組織比較,P<0.01;與對照組比較,P<

12、;0.014232.2腫瘤分化程度與AR水平的關(guān)系見表2。高分化的肝癌組織AR含量明顯高于低分化者(P<0.01)。表2腫瘤分化程度與AR水平的關(guān)系( x±s)腫瘤分AR(fmol/mg蛋白)化程度n癌周組織癌組織高分化148.37±2.836.85±2.78注:與高分化組比較,P<0.05;與高分化或中分化組比較,P<0.013討論動物實驗及臨床研究證明,肝腫瘤的發(fā)生與性激素受體的介導(dǎo)有關(guān),性激素的改變或口服避孕藥可誘發(fā)肝癌5。本研究結(jié)果顯示,肝癌及癌周組織中均可檢測到AR,與Nagasue等3的報道一致。肝癌組織AR的含量明顯高于癌周組織(P

13、<0.01),并且與腫瘤直徑的大小存在相關(guān)性,這提示,肝癌的發(fā)生與AR含量的升高有關(guān);腫瘤直徑大小與AR改變存在相關(guān)性提示了雄激素可能僅在腫瘤發(fā)生的初級階段起主要作用,當(dāng)腫瘤發(fā)展到晚期,腫瘤細(xì)胞分化不成熟,AR含量也逐漸減少。這種AR含量與腫瘤大小的相關(guān)性可部分解釋臨床上一些肝癌患者抗雄激素治療無效的原因。本實驗結(jié)果進(jìn)一步顯示,高、中分化的癌組織AR含量明顯高于低分化者(P<0.01),且與癌旁組織相比均差別顯著(P<0.01或P<0.05),這一結(jié)果有以下可能性:(1)AR參與影響腫瘤的形成與發(fā)展,但其主要作用可能僅在細(xì)胞突變的初期;(2)低分化的癌細(xì)胞由于分化不成熟

14、,其合成AR的能力有所減弱或AR的表達(dá)水平降低;(3)肝癌組織AR含量高于癌周組織可能是雄激素誘導(dǎo)的結(jié)果,也可能是肝癌組織AR合成增加所致。國外學(xué)者應(yīng)用相應(yīng)的內(nèi)分泌療法作為部分晚期肝癌患者綜合治療的方法之一,Nagasue等6用抗雄激素制劑環(huán)丙氯地孕酮(Cyproteroneacetate,CPA)治療16例不能切除的肝癌患者,3例獲得較明確的效果;Forbes等7用抗雄激素制劑治療25例肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)者,僅5例腫瘤體積縮小,癥狀減輕。對此我們認(rèn)為,在應(yīng)用肝動脈導(dǎo)管化療以及內(nèi)分泌治療前,應(yīng)先明確腫瘤的大小及分化程度,因腫瘤直徑越大或分化程度越低,AR含量越少8,抗雄激素治療的療效越不理想。本實驗

15、結(jié)果還顯示,肝癌患者與正常對照組比較,雄激素(T)水平僅輕度升高,而白細(xì)胞AR含量卻明顯增加(P<0.01),并且癌組織AR含量與外周血白細(xì)胞AR呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.357,P<0.05),這提示,測定白細(xì)胞AR可間接反映肝組織AR的改變,對于鑒別診斷或療效判斷有一定臨床意義。有關(guān)雄激素及其受體對肝癌發(fā)生、發(fā)展影響的分子生物學(xué)機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。4參考文獻(xiàn)(6):4432WeimannA,VarnholtHJ,LangHetal.Retrospectiveanal2ysisofprognosticfactorsafterliverresectionandtransplanta2t

16、ionforcholangiocellularcarcinoma.BrJSurg,2000,87(5):11823NagasueN,YUL,YukayaHetal.Androgenandoestrogenreceptorsinheatocellularcarcinomaandsurroundingliverparenchyma:impactonintrahepaticrecurrenceafterhepaticresection.BriSurg,1995,82(3):542BoixL,castellsA,BruixJetal.Androgenreceptorsinhepatocellularcarcinomaandsurroundingliver:reletionshipwithtumorsizeandrecurrencerateaftersurgicalresectionJHepatol,1995,22(8):6166NagasueN,KohnoH,ChangYCetal.Androgenandestro2genreceptorsinhepatocellularcarc