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1、淀粉的測(cè)定-酸水解法【內(nèi)容摘要】樣品經(jīng)乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖類后,用酸水解淀粉為葡萄糖,按還原糖測(cè)定方法測(cè)定還原糖含量,再折算為淀粉含量。淀粉的測(cè)定淀粉是由多個(gè)葡萄糖縮合而成的多糖,測(cè)定淀粉的方法有酸水解法、酶水解法和旋光法等。酸水解法此法操作簡(jiǎn)單,但選擇性和準(zhǔn)確性不夠高。適用于淀粉含量較高,而半纖維素和多縮戊糖等其他多糖含量較少的樣品。對(duì)富含半纖維素、多縮戊糖及果膠質(zhì)的樣品,因水解時(shí)它們也被水解為木糖、阿拉伯糖等還原糖,測(cè)定結(jié)果會(huì)偏高。1原理樣品經(jīng)乙醚除去脂肪,乙醇除去可溶性糖類后,用酸水解淀粉為葡萄糖,按還原糖測(cè)定方法測(cè)定還原糖含量,再折算為淀粉含量。2儀器回流冷凝管。 水浴鍋。高
2、速組織搗碎機(jī)?;亓餮b置。3試劑乙醚。85乙醇。6 tool·L叫鹽酸溶液。10 tool·L叫氫氧化鈉。25 tool·L-i氫氧化鈉。甲基紅指示劑:稱取2 g甲基紅,用乙醇溶解稀釋至100 mL。精密pH試紙。20中性醋酸鉛溶液。lO硫酸鈉溶液。其余試劑同“還原糖的測(cè)定”中高錳酸鉀法或直接滴定法中的試劑。4測(cè)定步驟樣品提取a·糧食、豆類、糕點(diǎn)、餅干、代乳粉等較干燥、易研細(xì)的樣品:稱取2O50 g(含淀粉05 g左右)磨碎過40目篩的樣品,置于鋪有慢速濾紙的漏斗中,用30 mL乙醚分三次洗去樣品中的脂肪,再用150 mL 85乙醇分?jǐn)?shù)次洗滌殘?jiān)猿タ扇?/p>
3、性糖類。以100 mL水把漏斗中殘?jiān)哭D(zhuǎn)移至250 mL錐形瓶中。b-蔬菜、水果、粉皮、涼粉等水分較多,不易研細(xì)、分散的樣品:先按1:1加水在組織搗碎機(jī)中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾干,取可食部分)。稱取510 g(含淀粉05 g左右)勻漿于250 mL錐形瓶中,加30 mL乙醚振蕩提取脂肪,用濾紙過濾除去乙醚,再用30 mI。乙醚分二次洗滌濾紙上殘?jiān)?,然后?50 ml,85乙醇分?jǐn)?shù)次洗滌殘?jiān)?,以除去可溶性糖類。?00 mL水把殘?jiān)D(zhuǎn)移到250 mL錐形瓶中。水解:于上述250 mL錐形瓶中加入30 mL 6 tool·I。一,鹽酸,裝上冷凝管,置沸水浴中回流2 h?;亓魍?/p>
4、畢,立即用流動(dòng)水冷卻。待樣品水解液冷卻后,加入兩滴甲基紅,先用10tool·L-1氫氧化鈉調(diào)到黃色,然后用5 tool·L-i鹽酸調(diào)到剛好變?yōu)榧t色,再用25 m01L一·氫氧化鈉調(diào)到紅色剛好褪去。若水解液顏色較深,可用精密pH試紙測(cè)試,使樣品水解液的pH值約為7。然后加人20 mL 20醋酸鉛,搖勻后放置10 min,以沉淀蛋白質(zhì)、果膠等雜質(zhì)。gJUA 20 mI一10硫酸鈉溶液,以除去過多的鉛。搖勻后用水轉(zhuǎn)移至500 mI。容量瓶中,加水定容,過濾,棄去初濾液,收集濾液供測(cè)定用空白試驗(yàn);取100 mI一水和30 mL 6 m01r鹽酸于250 mI。錐形瓶中,按上述方法操作,得試劑空白液。測(cè)定:按還原糖測(cè)定法中的高錳酸鉀法或直接滴定法進(jìn)行。5計(jì)算高錳酸鉀法直接滴定法6說明樣品中加人乙醇溶液后,混合液中乙醇的濃度應(yīng)在80以上,以防止糊精隨可溶性糖類一起被洗掉。如要求測(cè)定結(jié)果不
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