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1、九香止瀉腸溶片對(duì)副溶血弧菌活性及小鼠小腸功能亢進(jìn)模型的影響 09-01-30 10:28:00 編輯:studa20 作者:彭芝配,滕久祥,伍參榮 尹進(jìn)【摘要】 目的 探討九香止瀉腸溶片對(duì)副溶血弧菌活性以及對(duì)新斯的明所致的小鼠小腸功能亢進(jìn)的
2、影響。方法 采用瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定抑菌圈直徑,液體培基測(cè)定法與平皿傾注法測(cè)定最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC);給小鼠皮下注射甲硫酸新斯的明0.15 mg/kg造成小腸功能亢進(jìn)造模,灌胃10炭末生理鹽水,測(cè)定小腸推進(jìn)率。結(jié)果 九香止瀉腸溶片在50 mg/mL濃度對(duì)副溶血弧菌表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌作用,其作用優(yōu)于腸康片,MIC為50 mg/mL,MBC為500 mg/mL;與模型組比較,九香止瀉腸溶片各劑量組小腸推進(jìn)率顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);其中高劑量組明顯優(yōu)于腸康組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 九香止瀉腸溶片具有顯著的抗副溶血弧菌活性、抑制小腸功能亢
3、進(jìn)作用。 【關(guān)鍵詞】 九香止瀉腸溶片;海洋弧菌;抗菌;新斯的明;小腸推進(jìn)率;小鼠;秦皮;香椿皮 To investigate the effect of Jiuxiang Zhixie granule(JZG) on vibrio parahaemolyticus activity and the small intestinal hyperfunction induced by neostigmine in mice. Methods The diameter size of inhibition circle was measur
4、ed with agar diffusions, and minimum inhibitory concentration(MIC) and minimum bactericidal concentration(MBC) were detected with fluid medium determination method; The model was induced by hypodermic injection 0.15 mg/kg of neostigmine methylsulfate, and the pushing rate of small intestine in mice
5、was measured after intragastric infusion with 10 Charcoal-powder saline. Results JZG in 50 mg/ml concentration was stronger to inhibit and kill vibrio parahaemolyticus, which was more effective than Changkang tablet. The MIC concentration was 50 mg/ml, the MBC concentration 500 mg/mL. Compared with
6、the model group, the pushing rate of small intestine in each dosage of JZG group was lower obviously(P<0.05). The medium and high dosage groups were more effective than that in Changkang group(P<0.05). Conclusions JZG is very effective to inhibit activity of vibrio parahaemolyticus, and depres
7、s the propellent function of small intestine. Jiuxiang Zhixie granule; marine vibrio; antisepsis; neostigmine; propellent function of small intestine; mice; Cortex Fraxini; cortex toonae 急性腹瀉的發(fā)病原因多為感染性腹瀉,細(xì)菌感染引起的腹瀉占感染性腹瀉多數(shù)。致瀉性海洋弧菌引起的急性腹瀉發(fā)病率呈上升趨勢(shì),副溶血弧菌就是其中一種致瀉性海洋弧菌。
8、九香止瀉腸溶片主治濕熱瀉泄,其臨床療效確切、安全。擬九香止瀉腸溶片對(duì)副溶血弧菌活性的影響及其對(duì)新斯的明引起的小鼠小腸功能亢進(jìn)模型的影響進(jìn)行研究?,F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果報(bào)道如下。 1 材料與方法 1.1 材料 1.1.1 藥物 九香止瀉腸溶片干浸膏,由湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥劑教研室提供,由秦皮、香椿皮等藥組成藥物濃度為每克浸膏含5 g生藥,批號(hào):20050811,臨床推薦劑量為3 g生藥/次,3次/d,3 d為1個(gè)療程;腸康片,湖南湘泉制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)
9、:20050201;諾氟沙星膠囊,福建古田藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號(hào):060106-4;甲硫酸新斯的明注射液,上海信誼金朱藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號(hào):030501。 1.1.2 動(dòng)物 昆明種小鼠,雌雄各半,體質(zhì)量1822 g,由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供。許可證號(hào):SCXK(湘)2003-0003,均在日常條件下飼養(yǎng) 3 d后進(jìn)行試驗(yàn)。 1.1.3 菌種 副溶血弧菌由湖南省商品進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫局食品檢驗(yàn)檢疫科提供,購(gòu)自大連海事檢驗(yàn)中心,批號(hào):20050603。
10、; 1.1.4 試劑與儀器 瓊脂;NaCl;墨汁;無(wú)菌注射用水;生物顯微鏡;超凈工作臺(tái);血球計(jì)數(shù)板;抗菌實(shí)驗(yàn)用瓊脂打孔器(6 mm);柳葉刀;游標(biāo)卡尺等。 1.2 方法 1.2.1 九香止瀉腸溶片對(duì)致瀉性海洋弧菌的檢測(cè)方法1 (1)菌液制備 將副溶血弧菌菌種在3.5NaCl肉湯瓊脂培養(yǎng)基中增菌,37 培養(yǎng),取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)的菌液。使用時(shí)用麥?zhǔn)嫌?jì)數(shù)法,將菌液濃度調(diào)整為1×109個(gè)/mL。(2)抑菌實(shí)驗(yàn) 采用瓊脂擴(kuò)散法(打孔法)。制備我妻氏血瓊脂平板,
11、無(wú)菌檢查后,進(jìn)行抗菌實(shí)驗(yàn):取0.1 mL副溶血弧菌菌液(菌液濃度為1.5×109 cfu/mL)均勻涂布整個(gè)培養(yǎng)基表面,用直徑6 mm無(wú)菌打孔器在我妻氏血瓊脂平板的表面打孔,每個(gè)平板上打3孔,各孔中心相距約24 mm,每孔加入300 L藥液(藥液濃度為1 g/mL),于37 培養(yǎng)24 h后,觀察抑菌圈的有無(wú),用游標(biāo)卡尺準(zhǔn)確量取抑菌圈直徑,同樣操作重復(fù)9次,同時(shí)設(shè)諾氟沙星膠囊和腸康片對(duì)照孔。(3)藥物的MIC測(cè)定 采用液體培基測(cè)定法測(cè)定藥物的MIC。制備3.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基:NaCl 3.5 g加入布氏肉湯培基100 mL中即得,加熱溶解,分裝于試管,每管1 mL,121 、1.05 kg/cm2高壓滅菌15 min備用。將九香止瀉腸溶片無(wú)菌干粉用注射用無(wú)菌用水溶解成1 g/mL,實(shí)驗(yàn)用3.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基將藥液進(jìn)行對(duì)倍稀釋12,14,18,116,132,164,1128,1256,1512,11024,共10管。同時(shí)設(shè)含菌不加藥的菌液對(duì)照,加藥不加菌的藥物對(duì)照,培養(yǎng)
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