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文檔簡介
1、姜黃素對家鴨脂肪肝模型肝脂與血脂的干預(yù)效果及機(jī)制研究 09-09-04 08:38:00 編輯:studa20 作者:任永麗,徐宗佩,梁汝圣,劉鵬,李玉紅,蘇菁【摘要】 目的考查姜黃素對家鴨脂肪肝模型肝脂、血脂的干預(yù)效
2、果,并研究其作用機(jī)制。方法復(fù)制家鴨脂肪肝模型,并用姜黃素進(jìn)行干預(yù),考查肝脂、血脂、肝脂酶、肝病理變化、一般情況,并進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果姜黃素具有降低家鴨脂肪肝模型肝TG、血TG、體重、肝指數(shù),改善肝組織病理的作用,其中高、中劑量組顯著低于模型組(P<0.01,P<0.05)。姜黃素有升高家鴨脂肪肝模型肝脂酶的作用,其中高劑量組顯著高于模型組(P<0.05)。結(jié)論姜黃素具有降低家鴨脂肪肝模型肝脂、血脂的作用,且具有劑量依賴性。其作用機(jī)制可能與增加肝脂酶活性,促進(jìn)脂質(zhì)代謝,保護(hù)肝細(xì)胞有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】 姜黃素; 脂肪肝; 家鴨; 肝脂; 血脂; 肝脂酶
3、60; Abstract:ObjectiveTo observe the interventional effects of curcumin on liver lipid and serum lipid in a model ducks with fatty liver and its mechanism. MethodsDuck model with fatty liver was established firstly. After treatment with curcumin,liver lipid ,serum lipid,hepatic lipase,hepatic
4、pathological changes and the general physical state were observed in model duck.ResultsCompared with the model group ,high and medium dose of curcumin could obviously decrease liver triglyceride,serum triglyceride, the body weight,liver index and ameliorate liver pathological changes of model ducks.
5、(P<0.01,P<0.05).Compared with the model group ,high dose of curcumin could obviously increase the HL activities of model ducks,(P<0.05). ConclusionCurcumin may decrease liver lipid ,serum lipid in a dose-dependent manner and the therapeutic mechanism may be related to Improving the HL activ
6、ities ,increasing lipid metabolism and protecting liver cells. Key words:Curcumin; Fatty liver; Duck; Liver lipid; Blood lipid ; HL 天津中醫(yī)藥大學(xué)張伯禮院士根據(jù)中醫(yī)理論和多年臨床經(jīng)驗(yàn)建立了治療脂肪肝的經(jīng)驗(yàn)效方“降脂清肝方”。在前期實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)成功地建立了家鴨脂肪肝模型,并對“降脂清肝方”全方及拆方進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明“降脂清肝方
7、”全方及拆方中姜黃、何首烏具有顯著的抗脂肪肝作用。為了深入研究該方的抗脂肪肝作用,本次實(shí)驗(yàn)主要考查了姜黃中主要成分姜黃素對家鴨脂肪肝模型肝脂、血脂的干預(yù)效果及作用機(jī)制?,F(xiàn)報道如下。 1 材料與儀器 1.1 動物及分組45日齡北京鴨70只,雌雄各半,由天津市精武禽類養(yǎng)殖有限公司提供。采用隨機(jī)列表法分為7組,每組10只,即空白對照組(空白組);脂肪肝模型組(模型組);姜黃素高劑量組(高劑量組);姜黃素中劑量組(中劑量組);姜黃素低劑量組(低劑量組);水煎姜黃組(姜黃組);東寶甘泰組(東寶組)
8、; 1.2 試劑血清總膽固醇(TC)測定試劑盒、血清甘油三酯(TG)測定試劑盒、高密度脂蛋白(HDL)試劑盒、低密度脂蛋白(LDL)試劑盒由北京中生北控生物科技股份有限公司提供;肝脂酶(HL)由南京建成生物工程研究所提供。 1.3 主要儀器200型半自動生化分析儀,荷蘭威圖;超速低溫離心機(jī),德國貝克曼;JJ2000型精密電子天平,常熟雙杰測試儀器廠;友聲ACS-A型電子秤,上海申衡電子有限公司制造;鴨填飼機(jī),北京市澤恩德平科技開發(fā)有限責(zé)任公司;722RS型分光光度計,上海第二分析儀器廠。
9、 2 方法 2.1 用藥及造模方法 采用標(biāo)準(zhǔn)動物的等效劑量折算系數(shù)法1參照家兔系數(shù)確定給藥劑量。以成人等效劑量2倍作為姜黃素低劑量,4倍為中劑量,8倍為高劑量,姜黃和東寶肝泰劑量均為等效劑量的2倍。如下: 姜黃素高劑量80 mg·kg-1·d-1·ig;中劑量40 mg·kg-1·d-1·ig;低劑量20 mg·kg-1·d-1·ig。由天津一方科技提
10、供(純度95%)。 姜黃1.4 g·kg-1·d-1·ig。由天津中醫(yī)藥大學(xué)研究中心提供。 東寶甘泰0.35 g·kg-1·d-1·ig,市售,通化東寶藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。產(chǎn)品批號:050707。 采用高糖飲食復(fù)制家鴨脂肪肝模型2。 造模同時每日按上述藥物與劑量于餐后30 min灌胃1次,空白組、模型組給予等量蒸餾水。 2.2 檢測指標(biāo) 2.2
11、.1 一般情況觀察實(shí)驗(yàn)期間家鴨的毛發(fā)、形態(tài)、進(jìn)食、糞便及死亡情況。 2.2.2 體重實(shí)驗(yàn)開始前(0 d),7 d,14 d,21 d,28 d稱量各組家鴨體重。 2.2.3 肝指數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)束(28 d),剖腹取肝稱重,計算肝指數(shù)(肝指數(shù)=肝濕重/體重×100%)。 2.2.4 肝臟TG,TC取肝右葉同一部位0.3 g肝組織,用無水乙醇丙酮(11)制成10%勻漿液抽提脂質(zhì),4,3 000 r/min離心10 min,靜置48 h后,取
12、上清液用半自動生化分析儀測定TG,TC含量。 2.2.5 血清TG,TC,HDL,LDL實(shí)驗(yàn)結(jié)束,停止供食供水12 h,頸靜脈取血,據(jù)試劑盒說明檢測TG,TC,HDL,LDL。 2.2.6 肝脂酶(HL)活性取肝右葉同一部位0.3 g肝組織,用生理鹽水制成10%勻漿液,4,2 500 r/min離心10 min,取上清液0.05 ml按試劑盒操作表進(jìn)行檢測,同時應(yīng)用考馬斯亮藍(lán)法檢測勻漿上清液蛋白含量,并依據(jù)公式計算出HL的活性。 2.2.7 肝臟的病理
13、學(xué)改變實(shí)驗(yàn)四周末剪斷頸靜脈放血處死,迅速剖腹,去除網(wǎng)膜及附屬組織,取出完整的肝臟,首先進(jìn)行肉眼觀察其顏色、形態(tài)。 再取肝右葉相同部位肝組織2 cm×2 cm×0.3 mm做病理標(biāo)本,所有標(biāo)本均用10%中性甲醛液固定,石蠟包埋,連續(xù)切片,HE染色,光鏡下評估肝脂肪變性程度。判斷標(biāo)準(zhǔn)按照脂變細(xì)胞占肝細(xì)胞的比例進(jìn)行脂變程度分級3。見表1。表1 肝細(xì)胞脂肪變性程度判斷標(biāo)準(zhǔn) 2.3 統(tǒng)計學(xué)處理用Spss11.5軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,數(shù)據(jù)用±s 表示,計量資料比較用方差分析(ONE- WAY ANOVA);計數(shù)資料比較用非參數(shù)檢驗(yàn)(Nonparametric Tests)。 3 結(jié)果 3.1 一般情況空白組家鴨毛發(fā)光澤,體態(tài)活潑,反應(yīng)敏捷,食量、排泄物均正常,無死亡情況;模型組毛色欠光澤,活動明顯減少,個別家鴨見青綠色糞便;姜黃素各組以及姜黃組、東寶組各種外在表現(xiàn)均優(yōu)于模型組。 3.2
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