1、實(shí)驗(yàn)五 失血性休克及微循環(huán)觀察休克是由于急性循環(huán)障礙使組織血液灌流量嚴(yán)重不足，以致各重要生命器官機(jī)能代謝發(fā)生嚴(yán)重障礙的一個(gè)全身性病理過(guò)程。休克的微循環(huán)學(xué)說(shuō)，認(rèn)為各種不同原因引起的休克都可導(dǎo)致微循環(huán)障礙，休克發(fā)病的關(guān)鍵不在于血壓，而在于血流，因而提出在改善微循環(huán)、保證組織有效灌流的基礎(chǔ)上采用血管活性藥物治療休克。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)復(fù)制失血性休克，觀察休克過(guò)程中機(jī)體的變化，通過(guò)實(shí)驗(yàn)了解搶救休克的治療原則?！緦?shí)驗(yàn)?zāi)康摹?. 學(xué)習(xí)失血性休克動(dòng)物模型的復(fù)制方法。2. 觀察在失血性休克后，動(dòng)脈血壓等生理指標(biāo)的變化；加深對(duì)休克各期的主要臨床表現(xiàn)及其發(fā)生機(jī)制的理解和認(rèn)識(shí)。3. 觀察實(shí)驗(yàn)兔在休克后腸系膜微循環(huán)的變化，分

2、析其發(fā)生機(jī)制。4. 通過(guò)輸液治療，了解輸血輸液是治療休克的一項(xiàng)重要措施。【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】 家兔【藥品與器材】兔手術(shù)臺(tái)，壓力換能器，呼吸流量換能器，醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng)，恒溫灌流盒，哺乳動(dòng)物手術(shù)器械1套，靜脈輸液及中心靜脈壓測(cè)量裝置1套，連接放血、儲(chǔ)血裝置1套，膀胱插管及計(jì)滴器裝置1套；注射器數(shù)支，試管2支，小燒杯1個(gè)，線(xiàn)繩（黑色、白色粗線(xiàn))若干。3戊巴比妥鈉，生理鹽水，0.3肝素，臺(tái)氏液?！緦?shí)驗(yàn)步驟與觀察】一動(dòng)物準(zhǔn)備和手術(shù)1. 動(dòng)物稱(chēng)重，麻醉，固定正確捉拿家兔1只，稱(chēng)重，耳緣靜脈緩慢注射3戊巴比妥鈉1ml/kg使動(dòng)物麻醉，麻醉成功標(biāo)準(zhǔn)：四肢肌緊張減低，角膜反射消失，呼吸深而平穩(wěn)。將家兔仰臥于兔手術(shù)臺(tái)上

3、，固定四肢及頭部。2頸部手術(shù)剪去頸部正中的被毛，作長(zhǎng)約57cm的正中切口，鈍性分離皮下組織。頸部手術(shù)分離氣管、右側(cè)頸外靜脈、左側(cè)頸總動(dòng)脈。依次進(jìn)行：（1)氣管插管 氣管插管的一側(cè)側(cè)管連接呼吸流量換能器，記錄呼吸。（2)頸外靜脈插管 目的是：建立靜脈輸液或給藥途徑；測(cè)量中心靜脈壓，當(dāng)插管接近右心房，可見(jiàn)液面隨呼吸而波動(dòng)。插管完成后，慢速點(diǎn)滴生理鹽水（510滴/min)，以保持插管的通暢以及維持尿的生成。（3)左側(cè)頸總動(dòng)脈插管 通過(guò)“三通”連接血壓傳感器和放血用儲(chǔ)血瓶。3下腹部手術(shù) 膀胱插管。4全身血液肝素化 耳緣靜注射肝素（625u/ml)，劑量為1ml/kg，此后每隔1h注射1ml維持。5連接

4、生物信號(hào)系統(tǒng)，1通道測(cè)量血壓連接動(dòng)脈插管壓力換能器、2通道測(cè)量呼吸連接呼吸流量換能器、3通道作尿量計(jì)滴連接計(jì)滴器，分別調(diào)整適當(dāng)?shù)膮?shù)描記血壓、呼吸和尿量。二組織（微循環(huán))血流觀察項(xiàng)目及指標(biāo)1. 皮膚粘膜血管和尿量 觀察球結(jié)合膜血管口徑及血流；提起耳殼，對(duì)光透現(xiàn)血管口徑及血流；用計(jì)滴器記錄尿量，若家兔無(wú)尿，通過(guò)頸外靜脈緩慢滴入少量生理鹽水，使家兔尿量維持在68滴/min。2. 正常家兔腸系膜微循環(huán)活體鏡檢觀察在左腹直肌旁作6cm縱行的切口腹壁，鈍性分離肌肉；打開(kāi)腹腔后，將卵圓孔外科腸鉗伸入左下腹側(cè)（緊貼前腹壁)；鉗出一段小腸袢（一般是闌尾末端上812cm處的回腸袢)，平展并固定于恒溫微循環(huán)灌流盒

5、內(nèi)，以38°C臺(tái)氏液恒溫灌流；用微循環(huán)顯微鏡連接醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng)，觀察家兔小腸系膜微循環(huán)變化。首先在鏡下確認(rèn)粗、細(xì)有別，血流方向相反的微動(dòng)脈、微靜脈和僅能讓一個(gè)紅細(xì)胞通過(guò)的毛細(xì)血管。微動(dòng)脈的血流速度較快，靜脈內(nèi)血色較暗。然后，固定某一區(qū)域，連續(xù)觀察毛細(xì)血管袢數(shù)目、血流速度、血流量及血管口徑（可用測(cè)微器或?qū)ｉT(mén)儀器)改變。三復(fù)制失血性休克動(dòng)物模型觀察記錄正常血壓、呼吸、尿量等指標(biāo)和微循環(huán)血流的變化。復(fù)制失血性休克時(shí)，撥動(dòng)“三通”停止輸液，連通水檢壓計(jì)和靜脈插管，可見(jiàn)水檢壓計(jì)的液面下降。當(dāng)液面不再下降并隨呼吸而波動(dòng)，即為中心靜脈壓（CVP)，記錄數(shù)據(jù)。分別進(jìn)行：1少量失血 撥動(dòng)連接動(dòng)脈插管

6、、壓力換能器和儲(chǔ)血瓶的“三通”，使血液（約10ml)從頸總動(dòng)脈流入預(yù)先注有10ml 0.3肝素的儲(chǔ)血瓶，恢復(fù)“三通”原來(lái)的位置，觀察皮膚粘膜、血壓、呼吸、尿量和微循環(huán)的變化。（全血量按體重的8%計(jì)算，或70ml/kg，10ml血液約占血容量百分之幾？)。2. 大量失血：少量失血10分鐘后，待家兔血壓代償性恢復(fù)正常，再打開(kāi)“三通”，在35min（切勿過(guò)快)內(nèi)讓失血量達(dá)全血量20%25%，觀察上述指標(biāo)的變化。要求血壓下降至5.32kPa(40mmHg)左右，不應(yīng)低于4kPa(30mmHg)。如果血壓回升，可再放一定量的血。使整個(gè)觀察期內(nèi)血壓始終維持在45.32kPa水平，即失血性休克狀態(tài)。兩次失血

7、后都應(yīng)觀察記錄如下指標(biāo)的變化：實(shí)驗(yàn)兔一般情況，皮膚粘膜、球（瞼)結(jié)合膜血管口徑及血流；CVP、BP、心率、呼吸、尿量；微循環(huán)的變化：大量失血后，毛細(xì)血管口徑縮小，失血性休克持續(xù)一段時(shí)間后，毛細(xì)血管血流速度和血流量逐漸下降，部分微血管內(nèi)（尤其在微靜脈)可見(jiàn)白細(xì)胞附壁翻滾?！咀⒁馐马?xiàng)】1. 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，均需保持動(dòng)脈靜脈插管與血管平行，以免刺破血管。2. 保護(hù)耳緣靜脈，注射時(shí)應(yīng)先從耳遠(yuǎn)端進(jìn)針，如不成功，再向耳根部移位。3. 血管分離時(shí)要盡可能剔除脂肪和結(jié)締組織。4. 排空后的膀胱壁較厚，應(yīng)選擇血管最少的部位剪開(kāi)插管，插管前一定要把膀胱壁各層（漿膜、肌層、粘膜下層和粘膜)剪破。5. 本實(shí)驗(yàn)手術(shù)操作多，應(yīng)盡量減少手術(shù)性出血和休克，如手術(shù)過(guò)程中失血過(guò)多時(shí)可先插頸外靜脈輸液。6. 動(dòng)脈插管前，要把家兔肝素化；插管前要把插管先充滿(mǎn)肝素生理鹽水，排出氣泡；靜脈插管一經(jīng)插入，應(yīng)立刻緩慢滴注生理鹽水，以防凝血。輸液量不能過(guò)多，以免導(dǎo)致肺水腫等合并癥。7. 正確旋轉(zhuǎn)“三通”。8. 先停止輸液，再進(jìn)行失血性的實(shí)驗(yàn)；在整個(gè)失血性實(shí)驗(yàn)過(guò)程，不再輸液，觀察中心靜脈壓的變化。9. 注意分工合作，保持實(shí)驗(yàn)臺(tái)面整潔?！靖戒洝繉?shí)驗(yàn)結(jié)果記錄參考表失血性休克及其搶救過(guò)程中各項(xiàng)指標(biāo)的變化 BP CVP 心 率 呼 吸 尿 量 耳朵結(jié)膜血管(mmHg) (cmH2O) (次/min) (