1、Cqtlez081029 植物的花藥培養(yǎng)在育種上有什植物的花藥培養(yǎng)在育種上有什么意義？么意義？花粉粒（花粉粒（1N）單倍體植株（單倍體植株（1N）二倍體純合子二倍體純合子植株（植株（2N）花的結(jié)構(gòu)花的結(jié)構(gòu)花絲花絲花藥：花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉 花粉是由花粉母細(xì)胞（即小孢子母細(xì)胞）花粉是由花粉母細(xì)胞（即小孢子母細(xì)胞）經(jīng)過經(jīng)過而形成的，因此，花粉是而形成的，因此，花粉是。 花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：時(shí)期、單核時(shí)期、單核期、雙核期期、雙核期等階段。等階段。雄蕊雄蕊（一）被子植物的花粉發(fā)育（一）被子植物的花粉發(fā)育1花粉母花粉母細(xì)胞（細(xì)胞（2n）4個(gè)小孢子個(gè)小孢子(小

2、孢子小孢子四分體時(shí)期四分體時(shí)期)（n）減數(shù)減數(shù)分裂分裂1個(gè)花粉管細(xì)胞核（個(gè)花粉管細(xì)胞核（n）1個(gè)生殖細(xì)胞核（個(gè)生殖細(xì)胞核（n）有絲有絲分裂分裂2個(gè)精子個(gè)精子單核居中期（單核居中期（n）單核靠邊期（單核靠邊期（n）注意： 二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核。（精子在花粉管中。（精子在花粉管中形成）形成） 三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，生殖細(xì)胞進(jìn)行一次有絲分裂，形成兩個(gè)精子，這樣的花粉在成熟時(shí)，含有這樣的花粉在成熟時(shí)，含有一個(gè)營養(yǎng)核和兩

3、一個(gè)營養(yǎng)核和兩個(gè)精子。個(gè)精子。 兩個(gè)精子和一個(gè)營養(yǎng)核的兩個(gè)精子和一個(gè)營養(yǎng)核的基因型基因型相同。相同。（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑形成原因：主要形成原因：主要取決于培養(yǎng)基中取決于培養(yǎng)基中的激素的種類及的激素的種類及其濃度的配比其濃度的配比體細(xì)胞胚（胚狀體）：體細(xì)胞胚（胚狀體）： 在組織培養(yǎng)過程中，某些體細(xì)胞在在組織培養(yǎng)過程中，某些體細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似，似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過程亦與合子胚類似，被稱為被稱為。（三）影響花藥培養(yǎng)的因素（三）影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇、材料的選擇 不同植物不

4、同植物 同一植物的不同生理狀況同一植物的不同生理狀況（花期早期初花期花期早期初花期） 合適的花粉發(fā)育期合適的花粉發(fā)育期 （單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期） 此外，植株生長條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等此外，植株生長條件、材料低溫預(yù)處理、接種密度等2、培養(yǎng)基的組成、培養(yǎng)基的組成實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作材料選取材料選取材料的材料的消毒消毒接種和接種和培養(yǎng)培養(yǎng)（一）材料選?。ㄒ唬┎牧线x取 通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。 最常用的方法：最常用的方法：醋酸洋紅法。醋酸洋紅法。 某些植物的花粉細(xì)胞核不易著

5、色，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色， 采用采用焙花青焙花青-鉻礬法鉻礬法，這種方法能將，這種方法能將花粉細(xì)胞核花粉細(xì)胞核染成染成藍(lán)黑色藍(lán)黑色。月季的初花期月季的初花期。 選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期也是提高誘導(dǎo)成功率的選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。一般來說，重要因素。一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中央移向在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期，花藥培養(yǎng)成功率最高。，花藥培養(yǎng)成功率最高。 二、材料的消毒：二、材料的消毒：花花蕾蕾（70酒精）酒精）大約大約30s（無（無菌水菌水）清洗清洗（無菌（無菌吸水紙吸水紙）吸干水吸干水分分（0.1氯氯化汞溶液化汞溶液）24min（

6、無（無菌水菌水）沖洗沖洗 月季花蕾的消毒與菊花外植體的消月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較，二者有何不同？毒相比較，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗 ，酒精酒精氯化汞處理的時(shí)間稍長。氯化汞處理的時(shí)間稍長。三、接種和培養(yǎng)三、接種和培養(yǎng)剝?nèi)』ㄋ巹內(nèi)』ㄋ幗臃N花藥接種花藥培養(yǎng)培養(yǎng)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)鑒定和篩選鑒定和篩選不要損傷花藥不要損傷花藥？要徹底除去花絲要徹底除去花絲？常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化？每個(gè)培養(yǎng)瓶接種每個(gè)培養(yǎng)瓶接種 （7 710 10 ） 個(gè)花藥個(gè)

7、花藥？花藥長出愈傷組織還要轉(zhuǎn)移花藥長出愈傷組織還要轉(zhuǎn)移到哪？到哪？主要原因是主要原因是營養(yǎng)核和生營養(yǎng)核和生殖核融合殖核融合造造成的成的項(xiàng)目項(xiàng)目相同點(diǎn)相同點(diǎn)不同點(diǎn)不同點(diǎn)P40第第2題題植物組植物組織培養(yǎng)織培養(yǎng)技術(shù)技術(shù)離體的植物組織經(jīng)離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組脫分化形成愈傷組織，再分化成叢芽，織，再分化成叢芽，誘導(dǎo)出根，然后進(jìn)誘導(dǎo)出根，然后進(jìn)行移栽。行移栽。培養(yǎng)基配制方法，培養(yǎng)基配制方法，無菌技術(shù)及接種無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。操作等基本相同。外植體為體細(xì)胞，染色體數(shù)無需加外植體為體細(xì)胞，染色體數(shù)無需加倍。倍。取材為花藥，培養(yǎng)的為取材為花藥，培養(yǎng)的為單倍體幼苗單倍體幼苗，植株植株弱小，高度不育弱小，高度不育，必須用，必須用秋水秋水仙素處理仙素處理，使染色體加倍，恢復(fù)正，使染色體加倍，恢復(fù)正常植株的染色體數(shù)，而且為純種。常植株的染色體數(shù)，而且為純種?；ㄋ幣囵B(yǎng)的選材非常重要，需事先花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先摸索時(shí)期適宜的花蕾；摸索時(shí)期適宜的花蕾；花藥裂開后花藥裂開后釋放出的