1、一、果酒果醋實驗流程示意圖。一、果酒果醋實驗流程示意圖。挑選葡萄挑選葡萄沖洗沖洗榨汁榨汁酒精發(fā)酵酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵醋酸發(fā)酵果醋果醋 發(fā)酵裝置發(fā)酵裝置A A裝置裝置B B裝置裝置請回答制作果酒和果醋的有關(guān)問題。請回答制作果酒和果醋的有關(guān)問題。（1）果酒和果醋的制作依次利用了）果酒和果醋的制作依次利用了 和和 兩種微兩種微生物，兩者在結(jié)構(gòu)上最主要區(qū)別是生物，兩者在結(jié)構(gòu)上最主要區(qū)別是 ；從代謝；從代謝類型上看，兩者的相同之處是類型上看，兩者的相同之處是 。（2）在設(shè)計發(fā)酵裝置時，排氣口要通過一個長而彎曲的）在設(shè)計發(fā)酵裝置時，排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連，其目的是膠管與瓶身相連，其目的是 。

2、（3）果酒發(fā)酵時間一般為）果酒發(fā)酵時間一般為1012d，但也可能因為，但也可能因為 等外界條件而發(fā)生改變。工作人員可通過定期取發(fā)酵液與等外界條件而發(fā)生改變。工作人員可通過定期取發(fā)酵液與 試劑反應(yīng)來檢測發(fā)酵情況，如發(fā)酵液中含有酒精則溶液呈試劑反應(yīng)來檢測發(fā)酵情況，如發(fā)酵液中含有酒精則溶液呈現(xiàn)現(xiàn) 現(xiàn)象?，F(xiàn)象。（4）果酒進一步發(fā)酵能獲得果醋，酒變醋的原理）果酒進一步發(fā)酵能獲得果醋，酒變醋的原理是是 。氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿嵫鯕獬渥?，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?酵母菌酵母菌 醋酸菌醋酸菌有無核膜有無核膜都是異養(yǎng)型生物都是異養(yǎng)型生物防止空氣中的雜菌進入防止空氣中的雜菌

3、進入溫度溫度灰綠色灰綠色人類利用微生物發(fā)酵制作果酒、果醋。請回答下列問題人類利用微生物發(fā)酵制作果酒、果醋。請回答下列問題（1）果酒的制作離不開酵母菌。酵母菌是一類）果酒的制作離不開酵母菌。酵母菌是一類 （呼吸類型）微生物。在有氧條件下，酵母菌進行有氧（呼吸類型）微生物。在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，其反應(yīng)式為呼吸，其反應(yīng)式為 。在無氧。在無氧條件下，酵母菌進行無氧呼吸，其反應(yīng)式為條件下，酵母菌進行無氧呼吸，其反應(yīng)式為_ 。（2）溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。）溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20左右最左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時一般將溫度

4、控制在_ 。在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，起主要作用。在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。在發(fā)酵過程中，的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。在發(fā)酵過程中，隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮的色素也進入發(fā)酵液，隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮的色素也進入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。在使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。在 的發(fā)酵液中，酵母的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物卻因無法適應(yīng)菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物卻因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。這一環(huán)境而受到抑制。兼性厭氧兼性厭氧1825缺氧、呈酸性缺氧、呈酸性（3）醋酸菌是一種好氧細菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能）醋酸菌是

5、一種好氧細菌，只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。在變酸的酒的表面觀察到的進行旺盛的生理活動。在變酸的酒的表面觀察到的_就是就是_。實驗表明，醋酸菌對氧氣的含量。實驗表明，醋酸菌對氧氣的含量_。菌膜菌膜醋酸菌在液面大醋酸菌在液面大量繁殖形成的量繁殖形成的特別敏感特別敏感微生物的實驗室培養(yǎng)微生物的實驗室培養(yǎng)練習(xí)練習(xí)1:不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是微生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是()。A氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B

6、碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D水是該微生物的營養(yǎng)要素之一水是該微生物的營養(yǎng)要素之一B 1微生物的實驗室培養(yǎng)微生物的實驗室培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基培養(yǎng)基概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 劃分標(biāo)準(zhǔn)劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途物理性質(zhì)物理性質(zhì)化學(xué)成分化學(xué)成分天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基用途用途鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種

7、類不加凝固劑不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物的運動、觀察微生物的運動、分類鑒定分類鑒定微生物分離、鑒定、微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌活菌計數(shù)、保藏菌種種含化學(xué)成分不明確的天然物含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定分類、鑒定在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)質(zhì), ,以抑制不需要的微生物以抑制不需要的微生物的生長的生長, ,促進所需要的微生促進所需要的微生物的生長物的生長培養(yǎng)、分離出特培養(yǎng)、分離出特定微生物定微生物在培養(yǎng)基中加入某種指示劑在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品或化學(xué)藥品, ,用以鑒別

8、不同用以鑒別不同種類的微生物種類的微生物鑒別不同種類微鑒別不同種類微生物生物選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基配方及營養(yǎng)要素培養(yǎng)基配方及營養(yǎng)要素基本營養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、基本營養(yǎng)要素：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽。此外還要滿足不同微生物生長對氮源、無機鹽。此外還要滿足不同微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的需求。營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素來源來源功能功能碳碳源源無機無機氮源氮源CO2、NaHCO3、CaCO3等等含碳無機物含碳無機物構(gòu)成細胞中的物質(zhì)構(gòu)成細胞中的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；和一

9、些代謝產(chǎn)物；有機碳源是碳源又是有機碳源是碳源又是能源能源有機有機碳源碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機酸、石油、花生粉餅等酸、石油、花生粉餅等氮氮源源無機無機氮源氮源無機氮：無機氮：NH3、銨鹽、硝酸、銨鹽、硝酸鹽、鹽、N2等等將無機氮合成含氮的將無機氮合成含氮的代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物有機有機碳源碳源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物含氮的代謝產(chǎn)物生長因子生長因子維生素、氨基酸、堿基維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成酶和核酸的組成成分；分；參與代謝過程參與代謝過程中的酶促反應(yīng)中的酶促反應(yīng) 例例1

10、1：通：通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑的酚可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群制細菌和霉菌。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出體中分別分離出()。大腸桿菌大腸桿菌霉菌霉菌放線菌放線菌固氮細菌固氮細菌A B C DA例例3：(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，在大腸桿菌培

11、養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點，因此常作為遺傳學(xué)研究等優(yōu)點，因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。的實驗材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行_(消毒、滅菌消毒、滅菌)；操作者的；操作者的雙手需進行清洗和雙手需進行清洗和_；靜止空氣中的細菌可用紫；靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能外線殺滅，其原因是紫外線能

12、使蛋白質(zhì)變性，還能_。(3)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。溫度酸堿度溫度酸堿度易培養(yǎng)易培養(yǎng) 生活周期短生活周期短滅菌滅菌消毒消毒損傷損傷DNA的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)比例合適比例合適(4)通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的等菌落特征對細菌進行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污培養(yǎng)大腸桿

13、菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染 。 對 于 固 體 培 養(yǎng) 基 應(yīng) 采 用 的 檢 測 方 法 是染 。 對 于 固 體 培 養(yǎng) 基 應(yīng) 采 用 的 檢 測 方 法 是_。(6)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過須經(jīng)過_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。鑒定鑒定(或分類或分類)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生滅菌滅菌(2)微生物培養(yǎng)的無菌技術(shù)微生物培養(yǎng)的無菌技術(shù)進行無菌操作主

14、要是為了防止外來雜菌的入侵，重點是進行無菌操作主要是為了防止外來雜菌的入侵，重點是消毒和滅菌。消毒和滅菌。消毒和滅菌的區(qū)別消毒和滅菌的區(qū)別使用方法使用方法結(jié)結(jié) 果果常用的方法常用的方法消毒消毒較為溫和較為溫和的物理或的物理或化學(xué)方法化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害部一部分對人體有害的微生物的微生物(不包括芽孢不包括芽孢和孢子和孢子)煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消消毒法、紫外線消毒法等毒法等滅菌滅菌強烈的理強烈的理化因素化因素殺死物體內(nèi)外所有的殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和微生物，包括芽孢和孢子孢子灼燒滅菌、干

15、熱滅灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌菌、高壓蒸汽滅菌2.微生物的純化培養(yǎng)及菌種的保藏微生物的純化培養(yǎng)及菌種的保藏(1)(1)原理：在培養(yǎng)基上將原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是一個純，這個菌落就是一個純化的細菌菌落?；募毦?。(2)(2)方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法。方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法。（3 3）菌種保藏方法：）菌種保藏方法：臨時保藏法、甘油管藏法臨時保藏法、甘油管藏法例例2(2011山東卷山東卷)研研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分小分子蛋白質(zhì)子蛋白質(zhì))均有抑菌作

16、用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。(1)篩選乳酸菌篩選乳酸菌A時可選用平板劃線法或時可選用平板劃線法或_接種。接種。對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設(shè)備是對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設(shè)備是_。實驗。實驗前需對超凈工作臺進行前需對超凈工作臺進行_處理。處理。(2)培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長提供生長提供_。電。電泳法純化乳酸菌素時，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則泳法純化乳酸菌素時，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越大，電泳速度其分子量越大，電泳速度_。(3)抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，會出現(xiàn)以抑菌抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，

17、會出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^測定透明圈的物質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^測定透明圈的_來來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。稀釋涂布稀釋涂布平板法平板法高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋紫外線消毒紫外線消毒碳源和氮源碳源和氮源越慢越慢大小大小(直徑直徑)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1.1.將轉(zhuǎn)基因植物的葉片接種到無菌培養(yǎng)基上將轉(zhuǎn)基因植物的葉片接種到無菌培養(yǎng)基上, ,應(yīng)該應(yīng)該進行嚴格的無菌操作。進行嚴格的無菌操作。2.2.將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上分離將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上分離分解尿素的細菌分解尿素的細菌

18、, ,是否無菌操作影響較小。是否無菌操作影響較小。3.培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽四培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽四種成分。種成分。 4.篩選分解尿素的細菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的惟篩選分解尿素的細菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的惟一氮源。一氮源。5.統(tǒng)計樣品中的活菌一般使用平板劃線法。統(tǒng)計樣品中的活菌一般使用平板劃線法。例例1 1：從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是: :采集菌采集菌樣樣富集培養(yǎng)富集培養(yǎng)純種分離純種分離性能測定。性能測定。(1)(1)不同微生物的生存環(huán)境不同不同微生物的生存環(huán)境不同, ,獲得理想微生物的第一步獲得理想微生

19、物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣是從適合的環(huán)境采集菌樣, ,然后再按一定的方法分離、純?nèi)缓笤侔匆欢ǖ姆椒ǚ蛛x、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌種應(yīng)從化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌種應(yīng)從 環(huán)境中采集。環(huán)境中采集。(2)(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件環(huán)境條件, ,使其菌落中的數(shù)量大大增加使其菌落中的數(shù)量大大增加, ,從而分離出所需微從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇選擇 的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基, ,并在并在條件下培養(yǎng)。條件下培養(yǎng)。海灘等高鹽海灘等高鹽以淀粉為以淀粉為惟

20、一碳源惟一碳源高溫高溫(3)(3)接種前要對培養(yǎng)基進行接種前要對培養(yǎng)基進行 處理。在整個微處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中生物的分離和培養(yǎng)中, ,一定要注意在一定要注意在條件下進行。條件下進行。(4)(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖養(yǎng)的效果圖, ,請分析接種的具體方法。請分析接種的具體方法。獲得圖獲得圖A A效果的接種方法是效果的接種方法是 , ,獲得圖獲得圖B B效果效果的接種方法是的接種方法是。一同學(xué)用稀釋平板法純化土壤中。一同學(xué)用稀釋平板法純化土壤中的細菌時的細菌時, ,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌

21、落連成一片, ,最可能的原因是最可能的原因是, ,應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此現(xiàn)象應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此現(xiàn)象? ?。高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌無菌無菌稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法平板劃線法平板劃線法菌液濃菌液濃度過高度過高增大稀釋倍數(shù)增大稀釋倍數(shù)微生物的篩選與計數(shù)微生物的篩選與計數(shù)1.1.篩選菌株篩選菌株(1)(1)原則原則: :人為提供有利于目的菌株生長的條件人為提供有利于目的菌株生長的條件( (包括營包括營養(yǎng)、溫度、養(yǎng)、溫度、pHpH等等),),同時抑制或阻止其他微生物的生長。同時抑制或阻止其他微生物的生長。2.2.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)(1)顯微鏡直接計數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法（

22、2 2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法） 例例2 2：下面是探究如何從土壤中分離出自生固氮菌與計數(shù)：下面是探究如何從土壤中分離出自生固氮菌與計數(shù)的實驗的實驗, ,完成下列問題。完成下列問題。材料用具材料用具: :農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有培養(yǎng)基、盛有9 mL9 mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛有無菌培養(yǎng)皿、盛有90 mL90 mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。無菌水的錐形瓶、恒溫箱。(1)方法步驟方法步驟:倒平板倒平板:分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平分

23、別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板板,應(yīng)在應(yīng)在操作。操作。制備土壤稀釋液制備土壤稀釋液:取土樣取土樣10 g加入盛有加入盛有90 mL無菌水的無菌水的錐形瓶中錐形瓶中,充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1 mL,轉(zhuǎn)至盛轉(zhuǎn)至盛有有9 mL的無菌水的試管中的無菌水的試管中,依次稀釋到依次稀釋到_稀釋度。稀釋度。酒精燈火焰旁酒精燈火焰旁107涂布涂布: :按照由按照由10107 710103 3稀釋度的順序分別吸取稀釋度的順序分別吸取0.1 mL0.1 mL進進行平板涂布行平板涂布, ,每個稀釋度下每個稀釋度下, ,無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布個個平板平板

24、, ,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布個。個。培養(yǎng)培養(yǎng):放入恒溫箱內(nèi)放入恒溫箱內(nèi),在在2830下培養(yǎng)下培養(yǎng)3 d4 d。細菌的計數(shù)細菌的計數(shù):當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定,選取菌落數(shù)在選取菌落數(shù)在 的的平板進行計數(shù)。如果測定的平均值為平板進行計數(shù)。如果測定的平均值為50,則每克樣品中的則每克樣品中的菌落數(shù)是菌落數(shù)是。(稀釋度是稀釋度是105)(2)預(yù)期結(jié)果預(yù)期結(jié)果:相同稀釋度下相同稀釋度下,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)落數(shù)(選填選填“多于多于”或或“少于少于”)無氮培養(yǎng)基上的數(shù)無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。原因是目。原因是_ _。31303005107多于多于無氮培養(yǎng)

25、基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖無氮培養(yǎng)基上只有土壤中的自生固氮菌能生存繁殖,而而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存3.3.設(shè)置對照設(shè)置對照(1)(1)目的目的: :排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響, ,提高實驗結(jié)果的可信度。提高實驗結(jié)果的可信度。(2)(2)方法方法: :證明培養(yǎng)基未被污染證明培養(yǎng)基未被污染, ,用空白培養(yǎng)基作對照用空白培養(yǎng)基作對照。證明選擇培養(yǎng)基的選擇作用證明選擇培養(yǎng)基的選擇作用, ,用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基接種等量同種菌液作對照。接種等量同種菌液作對照

26、。例例3.3.下表是一種培養(yǎng)基的配方下表是一種培養(yǎng)基的配方, ,請回答請回答: :牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨NaClNaCl瓊脂瓊脂水水0.5 g0.5 g1 g1 g0.5 g0.5 g2 g2 g200 mL200 mL(1)(1)該培養(yǎng)基從物理性質(zhì)來說該培養(yǎng)基從物理性質(zhì)來說, ,屬于屬于培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)無菌操作是微生物培養(yǎng)最基本的要求。無菌操作是微生物培養(yǎng)最基本的要求。對于培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、對于培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是?；瘜W(xué)消毒化學(xué)消毒 灼燒滅菌灼燒滅菌 干熱滅

27、菌干熱滅菌紫外線滅菌紫外線滅菌 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法巴氏消毒法固體固體(3)(3)在平板劃線法中在平板劃線法中, ,每次灼燒接種環(huán)后每次灼燒接種環(huán)后, ,為什么要等其為什么要等其冷卻后再進行劃線冷卻后再進行劃線? ?。(5)以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入指示劑指示劑,培培養(yǎng)某種細菌后養(yǎng)某種細菌后,如果如果pH升高升高,指示劑將指示劑將,利用這一利用這一特點特點,可準(zhǔn)確地鑒定該種細菌能夠分解尿素?？蓽?zhǔn)確地鑒定該種細菌能夠分解尿素。以免接種環(huán)溫度太高以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種殺死菌種酚紅酚紅變紅變紅1為培養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中加為培

28、養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中加入（）入（）A.較多的氮源物質(zhì)較多的氮源物質(zhì) B.較多的碳源物質(zhì)較多的碳源物質(zhì) C.青霉素類藥物青霉素類藥物 D.高濃度食鹽高濃度食鹽2下列操作不屬于微生物的分離步驟的是下列操作不屬于微生物的分離步驟的是A稀釋稀釋 B劃線或涂布劃線或涂布 C接斜面接斜面 D培養(yǎng)培養(yǎng)3影響微生物生長的主要環(huán)境因素是影響微生物生長的主要環(huán)境因素是A陽光、溫度、水分陽光、溫度、水分 B溫度、水分、溫度、水分、PH C水分、水分、PH、氧、氧 D溫度、溫度、PH、氧、氧4使用選擇培養(yǎng)基的目的是（使用選擇培養(yǎng)基的目的是（ ）A.培養(yǎng)細菌培養(yǎng)細菌 B.培養(yǎng)真菌培養(yǎng)真菌 C.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D.表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別5能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是( )A.CO2和和N2 B.葡萄糖