1、微生物學(xué)試題庫一、名詞解釋1、菌株(strain)：2、飾變(modification)：3、原生型(prototroph)：4、深層液體培養(yǎng)：5、類毒素(toxoid):6、特異性免疫(specificimmuneity)：7、芽抱(spore):8、鞭毛(flagella)：9、抗生素(antibiotics)：10、支原體(mycoplasma):11、菌核(scleraotium)：12、噬菌斑(plaque):13 溫和噬菌體(temperatephage)：14 局限轉(zhuǎn)導(dǎo)(specializedtransduction)：15 選擇性培養(yǎng)基(seclectedmedia)：16 、

2、反硝化作用(denitrification)：17 石炭酸系數(shù)(phenolcoefficient):18、富營養(yǎng)化(eutrophication):19、條件致死突變型(conditionallethalmutant)20、細(xì)菌素(bacteriocin)：21、初次應(yīng)答：22、再次應(yīng)答：二、單項(xiàng)選擇題1、下列細(xì)菌中，屬于Archaea一類的為（）AKlebsiellapneumoniaeBNeurosporacrassaCStaphylococusaureusDMethanobacterium2、具有周生鞭毛的細(xì)菌如E.coli,在下列哪種情況下呈直線運(yùn)動(dòng)一段時(shí)間（）A朝著營養(yǎng)物質(zhì)濃度高的

3、地方，順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)。B朝著營養(yǎng)物質(zhì)濃度高的地方，逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)。C朝著有毒物質(zhì)方向，順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)。D朝著有毒物質(zhì)方向，逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)。3、某細(xì)菌懸液經(jīng)100倍稀釋后，在血球計(jì)數(shù)板上，計(jì)得平均每小格含菌數(shù)為7.5個(gè)，則每毫升原菌懸液的含菌數(shù)為（）A3.75X107個(gè)b2.35X1074C3.0X109個(gè)D3.2X燈個(gè)4、可滿足一切營養(yǎng)缺陷型菌株?duì)I養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基為（）A完全培養(yǎng)基B基本培養(yǎng)基C補(bǔ)充培養(yǎng)基D鑒別培養(yǎng)基5、Saccharomycescerevisiae最適生長pH值為（）A4.0-5.0B5.0-6.0C6.0-7.0D7.0-7.46、專性厭氧微生物是由于其細(xì)胞內(nèi)缺少（）,從而不能解

4、除分子氧對(duì)細(xì)胞的毒害。ABODBCODCNODDSOD7、下列微生物中，哪一種能產(chǎn)生伴抱晶體（）ABacillussubitisBBacillusmagateriumCBac川usthuringiensisDClostridiumbotulinum8、下列微生物中，具有周生鞭毛的是（）AVibriocholeraeBBac川ussubitisCStaphylococcusaureusDSpiMlumrubrum9、革蘭氏染色的關(guān)鍵操作步驟是（）A初染B媒染C脫色D復(fù)染10Zymomonasmobiles的同型酒精發(fā)酵通過下列哪個(gè)途徑進(jìn)行（）AEMP途徑BED途徑CHMP途徑DSticland反

5、應(yīng)11、細(xì)菌的O抗原即（）A鞭毛抗原B表面抗原C菌體抗原D菌毛抗原12、在下列微生物中，哪一種能進(jìn)行產(chǎn)氧的光合作用（）AAnabaenaBNocardia13、下列能產(chǎn)子囊抱子的霉菌是AMucor和RhizopusCNeurospora和Gibberella14、Adenovirus的基因組由(CAzotobacterDRhodospirillum()BAspergillus和PenicilliumDAchlya和Agaricus)組成。AdsRNABssRNACssDNADdsDNA15、直接顯微鏡計(jì)數(shù)用來測定下列所有微生物群體的數(shù)目，除了（）之外。A原生動(dòng)物B真菌抱子C細(xì)菌D病毒16、深層

6、穿刺接種細(xì)菌到試管固體培養(yǎng)基中（）A增加氧氣B提供厭氧條件C除去代謝廢物D增加營養(yǎng)物質(zhì)17、微生物在穩(wěn)定生長期（）A細(xì)胞分裂速率增加B細(xì)胞分裂速率降低C群體生長最旺盛D是用作代謝、生理研究的好材料。18、某些微生物光合作用從葉綠素分子丟失的電子復(fù)原于（）AATP分子B細(xì)胞色素分子C水分子D含氮堿基分子19、細(xì)菌轉(zhuǎn)化過程不需要（）A受體細(xì)胞處于感受態(tài)B裂解的供體細(xì)胞C病毒D一系列酶20、在沼氣發(fā)酵中，S菌株與MOH菌株間的關(guān)系為（）A共生B寄生C互生D拮抗三、問答題1、試論述微生物和生物工程之間的關(guān)系。2、試從能源、碳源的角度來比較Anabaena、Rhodospirillum、Nitrobac

7、ter、E.coli四種微生物的營養(yǎng)類型。3、在賴氨酸的發(fā)酵中，如何應(yīng)用營養(yǎng)缺陷型突變菌株解除正常的反饋調(diào)節(jié)。4、試述用Ames法檢測致癌劑的理論依據(jù)和方法概要。5、試設(shè)計(jì)一個(gè)從土壤中分離能分解并利用苯酚的細(xì)菌純培養(yǎng)物的實(shí)驗(yàn)方案。6、某同學(xué)在實(shí)驗(yàn)室因操作不慎，所保藏的Bacillussubitis和Lentinusedodes菌種被E.coli污染了，請(qǐng)問他應(yīng)該如何將這兩種菌種純化？7、微生物在自然界氮素循環(huán)中起著哪些作用？8、好氧菌的固氮酶避氧害機(jī)制有哪些？9、某發(fā)酵工廠的生產(chǎn)菌株疑為溶源菌，試設(shè)計(jì)一個(gè)鑒定該菌株是否為溶源菌的實(shí)驗(yàn)方案。10、芽抱在微生物學(xué)的研究上有何意義？試用滲透調(diào)節(jié)皮層膨

8、脹學(xué)說解釋芽抱耐熱機(jī)制。11微生物培養(yǎng)過程中pH值變化的規(guī)律如何？如何調(diào)整？12、控制有害微生物生長有哪些方法，寫出利用熱力滅菌時(shí)的滅菌條件。13、試?yán)L圖說明單細(xì)胞微生物的生長曲線，并指明第三個(gè)時(shí)期的特點(diǎn)，及如何利用微生物的生長規(guī)律來指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)？14、某水廠供應(yīng)的自來水，消費(fèi)者懷疑其大腸桿菌數(shù)和細(xì)菌總菌數(shù)超標(biāo)，請(qǐng)問如何檢測？15、試以G+細(xì)菌Streptococcuspneumoniae為例，說明轉(zhuǎn)化過程。16、在篩選營養(yǎng)缺陷型時(shí)，抗生素法為何能濃縮營養(yǎng)缺陷型突變株？17、何謂基因工程？闡述基因工程的基本操作過程。在一利用pBR322質(zhì)粒和BamHI構(gòu)建“工程菌”的實(shí)驗(yàn)中，如何篩選含有目的基

9、因的宿主細(xì)菌？18、試設(shè)計(jì)一個(gè)從土壤中分離高效防治水稻白葉枯病的抗生菌純培養(yǎng)物的方木。19、在培養(yǎng)E.coli時(shí)，培養(yǎng)基中同時(shí)加入葡萄糖和乳糖兩種碳源，請(qǐng)問該菌的生長表現(xiàn)出一種什么樣的形式？為什么？請(qǐng)從基因表達(dá)的水平加以解釋。20、何為抗體？簡述免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)。21、根據(jù)F質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)的存在方式不同，E.coli的接合型菌株有哪些類型？圖示它們相互之間的聯(lián)系。22、大腸桿菌在37c的牛奶中每123分鐘繁殖一代，假設(shè)牛奶消毒后，大腸桿菌的含量為1個(gè)/100ml,請(qǐng)問按國家標(biāo)準(zhǔn)（30000個(gè)/ml）,該消毒牛奶在37c下最多可存放多少時(shí)間（分鐘）？23、測定微生物的生長有哪些方法？各有何優(yōu)缺

10、點(diǎn)？24、試述誘變育種的方法步驟和注意事項(xiàng)。25、yeast類微生物的繁殖方式有哪些類型？圖示Saccharomycescerevisiae的生活史。26、什么叫呼吸和呼吸鏈？呼吸鏈由哪些組成？27、扼要說明酵母菌一型、二型和三型發(fā)酵，并指出它們的最終產(chǎn)物各是什么？2816SrRNA被認(rèn)為是一把好的譜系分析“分子尺”，其主要依據(jù)是什么？29、HfrXF-和F+XF-雜交得到的接合子都有性菌毛產(chǎn)生嗎？為什么？30、有哪些試驗(yàn)方法可以證明某一細(xì)菌存在鞭毛？31、控制微生物生長繁殖的主要方法及原理有哪些？參考答案一、名詞解釋1、菌株(strain)：又稱品系，在非細(xì)胞型的病毒中則稱毒株或株，是單個(gè)細(xì)

11、胞或單個(gè)病毒粒在人工培養(yǎng)基上繁殖而來的純遺傳型群體及其一切后代。2、飾變(modification):指外表的修飾性改變，意即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯水平上的變化。3、原生型(prototroph)：一般指營養(yǎng)缺陷型突變株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株，其營養(yǎng)要求在表型上與野生型相同。4、深層液體培養(yǎng)：將菌種培養(yǎng)在發(fā)酵罐或圓錐瓶內(nèi)，通過不斷通氣攪拌或振蕩，使菌體在液體深層處繁育的方法。5、類毒素(toxoid):用0.3-0.4%甲醛溶液對(duì)外毒素進(jìn)行脫毒處理，獲得的失去毒性但仍保留其原有免疫性(抗原性)的生物制品。6、特異性免疫(specificimmuneity):也稱獲

12、得性免疫或適應(yīng)性免疫，是相對(duì)于非獲得性免疫而言的，其主要功能是識(shí)別非自身和自身的抗原物質(zhì)，并對(duì)它產(chǎn)生免疫應(yīng)答，從而保證機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定狀態(tài)。7、芽抱(spore):細(xì)菌在生長發(fā)育后期在細(xì)胞內(nèi)形成的一種厚壁的抗逆性的休眠體。8、鞭毛(flagella)：生長在某些細(xì)菌表面的長絲狀、波曲的蛋白質(zhì)附屬物，稱為鞭毛，其數(shù)目為一至數(shù)十條，具有運(yùn)動(dòng)功能。9、抗生素(antibiotics)：是一類由微生物或其它生命活動(dòng)過程中合成的次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物，它們?cè)诤艿蜐舛葧r(shí)就能抑制或干擾它種生物的生命活動(dòng)。是一類無細(xì)胞壁、介于獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄10、支原體(mycoplasma)生生活間的最小原核生物。1

13、1、菌核(scleraotium)：在不良外界條件下，菌絲相互緊密纏結(jié)在一起形成的堅(jiān)硬、能抵抗不良環(huán)境的塊狀、頭狀的休眠體。12、噬菌斑(plaque):當(dāng)寄主細(xì)胞被噬菌體感染后細(xì)胞裂解，在菌苔上出現(xiàn)的一些無色透明空斑(負(fù)菌落)。13、溫和噬菌體(temperatephage):凡吸附并侵入細(xì)胞后。噬菌體的DNA只整合在宿主的染色體上，并可長期隨寄主DNA的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制，不進(jìn)行增殖和引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體，稱為溫和噬菌體。14、局限轉(zhuǎn)導(dǎo)(specializedtransduction)：通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中，并與后者的基因整合、重組，形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子的

14、現(xiàn)象。15、選擇性培養(yǎng)基(seclectedmedia)：一類根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌的功能，廣泛用于菌種篩選領(lǐng)域。16、反硝化作用(denitrification)：在無氧條件下，某些兼性厭氧微生物利用硝酸鹽作為呼吸鏈的最終氫受體，把它還原成亞硝酸、NO、N2O直至N2的過程，稱為異化型硝酸鹽還原作用，又稱硝酸鹽呼吸或反硝化作用。17 石炭酸系數(shù)(phenolcoefficient):指在一定時(shí)間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋與達(dá)到同樣效果的石炭酸的最高稀釋度的比例。一般規(guī)定處理時(shí)間為十分鐘。18 富營養(yǎng)

15、化(eutrophication)：是指水體中因氮、磷等元素含量過高而引起水體表層的藍(lán)細(xì)菌和藻類過度生長繁殖的現(xiàn)象。19 條件致死突變型(conditionallethalmutant):某菌株或病毒經(jīng)基因突變后，在某種條件下可正常地生長、繁殖并呈現(xiàn)其固有的表型，而在另一種條件下卻無法生長、繁殖，這種突變類型稱為條件致死突變型。20細(xì)菌素(bacteriocin)：某些細(xì)菌產(chǎn)生的能抑制或殺死其他近緣細(xì)菌或同種不同菌株的代謝產(chǎn)物，是一種由質(zhì)粒編碼的蛋白質(zhì)，不像抗生素那樣具有很廣的抗菌譜。21、初次應(yīng)答：指用適量抗原給動(dòng)物免疫，當(dāng)抗原初步進(jìn)入機(jī)體后需經(jīng)一定的替伏期才能在血清中出現(xiàn)抗體，維持時(shí)間短，

16、其產(chǎn)生的免疫球蛋白是IgMo22、再次應(yīng)答：指對(duì)抗原發(fā)生初次應(yīng)答時(shí)，當(dāng)相同的抗原再次進(jìn)入機(jī)體，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生抗體的潛伏期明顯縮短，且抗體維持時(shí)間長的特異性應(yīng)答。二、選擇1、D2、B3、C4、A5、B6、D7、C8、B9、C10、B11、C12、A13、C14、D15、D16、B17、B18、C19、C20、A三、問答題1、答：生物工程包括基因工程、細(xì)胞工程、發(fā)酵工程、酶工程四大領(lǐng)域。其中，前兩者的作用是將常規(guī)菌或動(dòng)植物細(xì)胞株作為特定遺傳物質(zhì)的受體，使它們獲得外來基因，成為能表達(dá)超遠(yuǎn)緣性狀的新物種一一“工程菌”或“工程細(xì)胞株”，后兩者的作用則是為這一新物種提供良好的生長、繁殖條件，進(jìn)行大規(guī)模的培養(yǎng)，為

17、人們提供巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。在基因工程中，微生物可提供基因的供體和受體。產(chǎn)生各種工具酶基因的載體是病毒、噬菌體、質(zhì)粒；在細(xì)胞工程中，正是由于微生物學(xué)獨(dú)特的實(shí)驗(yàn)技術(shù)如顯微技術(shù)、無菌操作技術(shù)、消毒滅菌技術(shù)、純種分離和克隆化技術(shù)、深層液體發(fā)酵技術(shù)、原生質(zhì)體制備和融合技術(shù)以及各種DNA重組技術(shù)向生命科學(xué)的其它領(lǐng)域滲透才產(chǎn)生了細(xì)胞工程；在發(fā)酵工程中，發(fā)酵的主體是微生物；在酶工程中，所用的酶大多數(shù)是由微生物所產(chǎn)生的。因此,微生物是生物工程的基礎(chǔ)，有著突出的不可替代的地位。2、答：魚腥藍(lán)細(xì)菌屬Anabaena屬于光能自養(yǎng)型微生物，它的能源是光，氫供體是無機(jī)物，基本碳源是C02,紅螺菌屬Rhodospi

18、rillum屬于光能異養(yǎng)型微生物，它的能源是光，氫供體是有機(jī)物，碳源為C02和簡單的有機(jī)物；硝化細(xì)菌屬Nitrobacter屬于化能自養(yǎng)型微生物，它依靠氧化NH4、N02等無機(jī)物獲得能量，氫供體為還原態(tài)無機(jī)物，碳源為C02;大腸桿菌E.coli屬于化能異養(yǎng)型微生物，它依靠氧化有機(jī)物獲得能量，氫供體為有機(jī)物，碳源也是有機(jī)物如葡萄糖等。3、答：在許多微生物中，可用天冬氨酸作原料，通過分支代謝途徑合成出賴氨酸、蘇氨酸和甲硫氨酸。但在代謝過程中，一方面由于賴氨酸對(duì)天冬氨酸激酶有反饋抑制作用，另一方面，由于天冬氨酸除用于合成賴氨酸外，還要作為合成甲硫氨酸和蘇氨酸的原料，因此，在正常細(xì)胞內(nèi)，就很難累積較高

19、濃度的賴氨酸。工業(yè)上利用谷氨酸棒桿菌的高絲氨酸缺陷型菌株作為賴氨酸的發(fā)酵菌種。由于它不能合成蘇氨酸脫氫酶，故不能合成高絲氨酸，也不能產(chǎn)生蘇氨酸和甲硫氨酸，在補(bǔ)以適量高絲氨酸的條件下，可在較高糖濃度和鏤鹽的培養(yǎng)基上，產(chǎn)生大量的賴氨酸。4、答：1)Ames試驗(yàn)是一種利用細(xì)菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變株來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的方法。其原理是：鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基的平板上不能生長，如發(fā)生回復(fù)突變變成原養(yǎng)型后則能生長。2)方法大致是在含有可疑化學(xué)致癌劑的試樣中加入鼠肝勻漿液，經(jīng)一段時(shí)間保溫后，吸入濾紙片中，然后將濾紙片放置于基本培養(yǎng)基平板中央。經(jīng)培養(yǎng)后，出現(xiàn)3種情況：

20、1）在平板上無大量菌落產(chǎn)生，說明試樣中不含致癌劑；2）在紙片周圍有一抑制圈，其外周有大量菌落，說明試樣中有較高濃度致癌劑存在；3）在紙片周圍有大量菌落，說明試樣中有適量致癌劑存在。5、答：1）查資料，找出檢測苯酚的標(biāo)準(zhǔn)測定方法。2）采樣，在被苯酚污染的土壤中取土。3）富集培養(yǎng)，將采到的土樣進(jìn)行馴化，不斷提高苯酚的濃度，使苯酚降解菌在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)。4）取適量富集后的菌液在以苯酚為唯一碳源和能源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)，設(shè)對(duì)照，生長后測富集液中苯酚的濃度，觀察降解效果。5）純種分離和性能測定，將富集后的菌液稀釋涂布，挑取單菌落，在以苯酚為唯一碳源和能源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)，測定降解效果，從中選出高效降

21、解菌。6、答：Bacillussub用s的純化1）制備無菌水和牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基平板，將菌苔刮下，用無菌水制成菌懸液；2）將菌懸液置于100C沸水浴中，保溫5分鐘；3）將保溫后的菌懸液按倍比稀釋，使每ml稀釋菌懸液中含菌約200-300個(gè)，吸取0.1ml稀釋菌懸液涂平板，置于30c下培養(yǎng)2天；4）待平板上長出菌落后，挑取表面干燥的菌落，鏡檢并革蘭氏染色鑒定該菌落為Bacillussubitis菌；5）挑出該單菌落，進(jìn)一步采用平板劃線分離純化。Lentinusedodes的純化：將菌絲連同培養(yǎng)基一起挖出，制備PDA平板，在平板中央放置一個(gè)已滅菌的牛津杯或空心玻璃管，在牛津杯或空心玻璃管中央接種

22、，待菌絲長出后，切取菌絲尖端純化，轉(zhuǎn)管。或配制Martin培養(yǎng)基，加入鏈霉素，配成30間/mL濃度，接種后取單菌落轉(zhuǎn)管。7、答：圖解如下:1）生物固氮：常溫常壓下，固氮生物通過體內(nèi)固氮酶的催化作用，將大氣中游離的分子態(tài)N2還原為NH3的過程。2）硝化作用：土壤中由氨化作用生成的NH3,經(jīng)硝化細(xì)菌氧化生成亞硝酸、硝酸的過程。3）同化型硝酸鹽還原作用：以硝酸鹽作營養(yǎng)，合成氨基酸、蛋白質(zhì)和核酸等含氮物的過程。4）氨化作用：含氮有機(jī)物通過各類微生物分解、轉(zhuǎn)化成氨的過程。5）反硝化作用：微生物還原NO3一產(chǎn)生氣態(tài)N2的過程。即硝酸鹽的異化還原。8、答：（1）好氣性的固氮菌通過呼吸作用和構(gòu)象保護(hù)來實(shí)現(xiàn)。（

23、2）藍(lán)細(xì)菌的固氮場所在異形胞，不含光合系統(tǒng)H,不產(chǎn)02；異形胞的外膜起到阻止02進(jìn)入的作用；異形胞內(nèi)氫酶活躍，使異形胞能維持很高的還原狀態(tài)。（3）根瘤菌和高等植物形成共生體系，根瘤菌處于泡膜內(nèi)，有阻止02進(jìn)入的作用；木栓層和細(xì)胞間隙有阻礙作用；根瘤內(nèi)的豆血紅蛋白可以為根瘤菌提供高流量、低濃度的02。9、答：將供試菌株制成菌懸液，置于低劑量紫外線下照射處理后，與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混勻后倒平板，經(jīng)培養(yǎng)后觀察平板上長出的菌落情況，由于溶源菌細(xì)胞內(nèi)的前噬菌體經(jīng)低劑量紫外線下照射處理后，會(huì)轉(zhuǎn)變成裂性噬菌體，進(jìn)入裂解性循環(huán)，使細(xì)胞破裂，即誘發(fā)裂解，這時(shí)便會(huì)在菌苔上形成噬菌斑。如果出現(xiàn)噬菌斑，則證明該菌株為溶源

24、菌。10、答：1）研究細(xì)菌的芽抱有重要的理論和實(shí)踐意義。芽抱的有無、形態(tài)、大小和著生位置是細(xì)菌分類和鑒定中的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)。在實(shí)踐上，芽抱的存在有利于提高菌種的篩選效率，有利于菌種的長期保藏，有利于對(duì)各種消毒、殺菌措施的優(yōu)劣的判斷等等，當(dāng)然芽抱的存在也增加了醫(yī)療器械使用上以及食品生產(chǎn)、傳染病防治和發(fā)酵生產(chǎn)中的各種困難。2）滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說認(rèn)為：芽抱的耐熱性在于芽抱衣對(duì)多價(jià)陽離子和水分的透性很差，而皮層的離子強(qiáng)度很高，這就使皮層產(chǎn)生了極高的滲透壓去奪取芽抱核心的水分，結(jié)果造成皮層的充分膨脹，核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水，正是由于這種失水的核心造成了芽抱具有極強(qiáng)的耐熱性。11、答：1）在微生

25、物的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中的糖類、脂肪等有機(jī)物經(jīng)微生物分解，氧化成有機(jī)酸，使pH值下降，蛋白質(zhì)脫竣成胺類而使pH值上升。硫酸錢等無機(jī)鹽在微生物代謝過程中由于錢離子被選擇吸收，留下硫酸根而使pH值下降，硝酸鈉等無機(jī)鹽在微生物代謝過程中由于硝酸根離子被選擇吸收，留下鈉離子而使pH值上升。在一般培養(yǎng)過程中，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，pH值會(huì)下降，在碳氮比高的培養(yǎng)基中尤為明顯。2）調(diào)節(jié)措施：治標(biāo)：中和反應(yīng)，加NaOH、HCl等；治本：過酸時(shí)，加適當(dāng)?shù)?，提高通氣量；過堿時(shí)，加適當(dāng)碳源，降低通氣量。12、答：包括滅菌、消毒、防腐和化療。滅菌和消毒的方法有物理因素滅菌，包括紫外線、可見光、輻射、高溫、過濾等；化學(xué)

26、因素有使用有機(jī)化合物如醇類、酸類、醛類、表面活性劑，無機(jī)物如重金屬、鹵化物、氧化劑，染色劑如結(jié)晶紫以及其它化學(xué)治療劑如抗生素等。干熱滅菌：烘箱內(nèi)熱空氣滅菌（160C,2小時(shí)）或火焰灼燒干熱滅菌。濕熱滅菌法：巴氏消毒法：60-85C15秒至30分鐘；煮沸消毒法：100C,數(shù)分鐘；間歇滅菌法：100C滅菌8小時(shí)，擱置過夜，再100C滅菌8小時(shí)；常規(guī)加壓蒸汽滅菌法：121C,半小時(shí)；連續(xù)加壓蒸汽滅菌法：135c140C,515秒。13、答：生長曲線分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期四個(gè)時(shí)期。穩(wěn)定期的特點(diǎn)是細(xì)胞死亡數(shù)與增長數(shù)平衡，積累、合成代謝產(chǎn)物，菌體廠也取網(wǎng)。（3）生產(chǎn)上常需要縮短延滯期，延長穩(wěn)定

27、期。縮短延滯期措施：a以對(duì)數(shù)期種齡菌種接種。b增大接種量。c營養(yǎng)條件適宜。d通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；延長穩(wěn)定期措施：生產(chǎn)上常通過補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料）或取走代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)pH、調(diào)節(jié)溫度、對(duì)好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩等措施延長穩(wěn)定生長期。14、答：1）制備伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMB）和牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基，分別倒平板；將濾膜（醋酸纖維薄膜）制成圓片，取1000ml自來水，無菌條件下過濾；將濾膜取下，貼在EMB平板，37c下培養(yǎng)48小時(shí)后，觀察并計(jì)菌落數(shù)。如果發(fā)現(xiàn)在透射光下呈紫色，反射光下呈綠色金屬閃光的菌落有3個(gè)或3個(gè)以上，則該自來水大腸桿菌數(shù)超標(biāo)。2）另用無菌移液管吸取1ml

28、自來水，涂布于牛肉膏蛋白月東平板上，37C下培養(yǎng)24小時(shí)后，觀察并計(jì)菌落數(shù)。如果菌落數(shù)超過100個(gè)，則該自來水細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)。15、答：肺炎鏈球菌Streptococcuspneumoniae轉(zhuǎn)化過程如下：1）供體菌（strR即存在抗鏈霉素的基因標(biāo)記dsDNA片段與感受態(tài)受體菌（str:有鏈霉素敏感型基因標(biāo)記）細(xì)胞表面的膜連DNA結(jié)合蛋白相結(jié)合，其中一條鏈被核酸酶水解，另一條進(jìn)入細(xì)胞；2）來自供體菌的ssDNA片段被細(xì)胞內(nèi)的特異性蛋白R(shí)ecA結(jié)合，并使其與受體菌核染色體上的同源區(qū)段配對(duì)、重組，形成一小段雜合DNA區(qū)段；3）受體菌染色體開始進(jìn)行復(fù)制，于是雜合區(qū)也跟著得到復(fù)制；4）細(xì)胞分裂后，形成一

29、個(gè)轉(zhuǎn)化子str口和一個(gè)仍保持受體菌原來基因型strs的后代。16、答：在這一方法中提到的所謂“濃縮”營養(yǎng)缺陷型突變株，裨是淘汰野生型，剩下營養(yǎng)缺陷型，因而，在一個(gè)群體的營養(yǎng)缺陷型突變株的比例明顯提高。在培養(yǎng)環(huán)境中加抗生素為何能“濃縮”營養(yǎng)缺陷型突變株？這是因?yàn)橐话憧股氐淖饔脵C(jī)制是抑制正在生長的生物細(xì)胞的某一或幾步生物合成反應(yīng)，致使細(xì)胞生長繁殖必需的細(xì)胞組成成分與相應(yīng)功能缺失，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡或喪損生長繁殖能力。只有野生型菌株才能在基本培養(yǎng)基上生長，一旦生長，即被加入培養(yǎng)基中的抗生素“擊中”，而營養(yǎng)缺陷型突變株由于在基本培養(yǎng)基中不能生長，因而，抗生素對(duì)這不起作用。最終通過終止法或稀釋法消除抗生

30、素的作用后，把有限的幸存的營養(yǎng)缺陷型突變株置于完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)擴(kuò)增，從而達(dá)到“濃縮”的目的。17、答：基因工程是指人們利用分子生物學(xué)的理論和技術(shù)，自覺設(shè)計(jì)操縱改造和重建細(xì)胞的遺傳核心一一基因組，從而使生物體的遺傳性狀發(fā)生定向變異，以最大限度地滿足人類活動(dòng)的需要。基因工程的基本操作包括目的基因的取得，載體系統(tǒng)的選擇，目的基因與載體重組體的構(gòu)建，重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞，工程菌株的表達(dá)和檢測等。大腸桿菌的pBR322質(zhì)粒上有兩個(gè)抗藥性標(biāo)記，即氨芳青霉素抗性和四環(huán)素抗性標(biāo)記，限制酶BamHI在該質(zhì)粒上的插入點(diǎn)在四環(huán)素抗性基因上,當(dāng)外源DNA片段插入后會(huì)引起四環(huán)素抗性基因失活。制備四環(huán)素平板、氨茉青霉素平

31、板，將已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞涂布，若在四環(huán)素平板上不能生長,在氨茉青霉素平板上能生長，則證明該菌已含有目的基因；若在兩種平板上都能生長，則該菌不含目的基因。18、答：水稻白葉枯病的病原菌是一種革蘭氏陰性桿菌，其抗生菌多為放線菌。操作步驟：1）在已患病的植株上分離水稻白葉枯病原菌。2）取土樣,制備含玻璃珠無菌水，將土樣制成菌懸液。3）制備高氏一號(hào)平板，將土壤懸液作連續(xù)稀釋至10-3,吸取1ml菌懸液涂平板。待菌落長出后純化備用。4）制備牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基，與水稻白葉枯病菌混勻后倒平板。5）在上述平板上點(diǎn)接已純化的放線菌，37c培養(yǎng)48小時(shí)，觀察有無抑菌圈，并比較抑菌圈大小。6）取抑菌圈較大的菌株進(jìn)一

32、步作拮抗試驗(yàn)，進(jìn)行復(fù)篩。19、答：1）該菌的生長曲線表現(xiàn)為二次生長曲線。在培養(yǎng)液中同時(shí)存在兩種均能為微生物利用的主要營養(yǎng)物時(shí)，微生物將首先利用較易利用的營養(yǎng)物，進(jìn)入穩(wěn)定期后再利用第二營養(yǎng)物，再次開始新的對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期，從而表現(xiàn)出二階式的雙峰生長曲線。對(duì)于大腸桿菌來說，葡萄糖代謝酶類總是不斷合成，而乳糖代謝酶則只有當(dāng)代謝底物存在時(shí)才會(huì)合成。2）大腸桿菌的乳糖操縱子依次是啟動(dòng)子P、操縱基因lacO以及三個(gè)結(jié)構(gòu)基因：lacZ基因，編碼3-半乳糖甘酶，催化乳糖分解為葡萄糖和半乳糖；lacY編碼透性酶，將乳糖轉(zhuǎn)動(dòng)到細(xì)胞內(nèi)；lacA基因編碼轉(zhuǎn)乙酰酶。在啟動(dòng)子上游有調(diào)節(jié)基因io調(diào)節(jié)基因在細(xì)胞中被不斷轉(zhuǎn)錄出m

33、RNA,并翻譯成阻遏蛋白。當(dāng)培養(yǎng)基中存在葡萄糖時(shí)，阻遏蛋白結(jié)合在lacO上，這時(shí)lacZYA的轉(zhuǎn)錄被阻止。當(dāng)培養(yǎng)基中無葡萄糖而有乳糖時(shí)，擴(kuò)散到細(xì)胞內(nèi)的少量乳糖可同阻遏蛋白結(jié)合，使之改變構(gòu)型，于是不能再同lacO結(jié)合，這時(shí)阻遏狀態(tài)解除，lacZYA得以轉(zhuǎn)錄，大腸桿菌開始利用乳糖，這一現(xiàn)象稱為葡萄糖效應(yīng)。20、答：抗體是指機(jī)體在抗原物質(zhì)刺激下所形成的一類與抗原特異性結(jié)合的血清活性成分，又稱免疫球蛋白。免疫球蛋白（Ig）分子是由兩兩對(duì)稱的四條多肽鏈借二硫鍵和非共價(jià)鍵連接而成。其中兩條長的多肽鏈稱為重鏈H,短的兩條多肽鏈稱為輕鏈L,重鏈與輕鏈，重鏈與重鏈之間均由二硫鍵相連，組成的Ig單體分子通式寫作H

34、2L2。Ig每條肽鏈的基本結(jié)構(gòu)是由約100個(gè)氨基酸長的肽段經(jīng)3折疊由鏈內(nèi)二硫鍵拉近連成的環(huán)狀構(gòu)型，稱為功能區(qū)。輕鏈由二個(gè)功能區(qū)組成，N端區(qū)其序列多變稱為可變區(qū)VL,C端區(qū)序列保守稱為穩(wěn)定區(qū)CL。重鏈由一個(gè)N端V區(qū)和3-4個(gè)C端穩(wěn)定區(qū)組成。輕鏈的V區(qū)和重鏈的V區(qū)共同組成了抗體的抗原結(jié)合部位，一個(gè)Ig單體有兩個(gè)抗原結(jié)合部位，稱為兩價(jià)。21、答：共有4種：a）F-菌株：不含F(xiàn)因子，沒有性菌毛，但可以通過接合作用接收F因子而變成雄性菌株（F+）;b）F+菌株：F因子獨(dú)立存在，細(xì)胞表面有性菌毛。c）Hfr菌株：F因子插入到染色體DNA上，細(xì)胞表面有性菌毛。d）F菌株：Hfr菌株內(nèi)的F因子因不正常切割而脫

35、離染色體時(shí)，形成游離的但攜帶一小段染色體基因的F因子，特稱為F因子，細(xì)胞表面同樣有性菌毛。其相互聯(lián)系如圖。22、解：設(shè)每100ml初始菌數(shù)為N0=1,經(jīng)過t時(shí)間后菌數(shù)為Nt=3X106,代時(shí)G=12.5分鐘Nt=N0X2n,兩邊取對(duì)數(shù)后則lgNt=lgN0+nXlg2繁殖代數(shù)n=（lgNt-lgN0）/lg2=3.322X（6+0.47-0）=21.49代保藏時(shí)間t=GXn=21.49X12.5274分鐘答：最多可保持274分鐘。23:答：常用測定微生物生長的方法有：1）稱干重法?？捎秒x心法或過濾法測定。優(yōu)點(diǎn)：可適用于一切微生物，缺點(diǎn)：無法區(qū)別死菌和活菌。2）比濁法。原理：由于微生物在液體培養(yǎng)

36、時(shí)，原生質(zhì)的增加導(dǎo)致混濁度的增加，可用分光光度計(jì)測定。優(yōu)點(diǎn)：比較準(zhǔn)確。3）測含氮量，大多數(shù)微生物的含氮量占干重的比例較一致，根據(jù)含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量。4）血球計(jì)數(shù)板法。優(yōu)點(diǎn)：簡便、快速、直觀。缺點(diǎn)：結(jié)果包括死菌和活菌。5）液體稀釋法。對(duì)未知菌樣彳連續(xù)的10倍系列稀釋，經(jīng)培養(yǎng)后，記錄每個(gè)稀釋度出現(xiàn)生長的試管數(shù)，然后查MPN表，再根據(jù)樣品的稀釋倍數(shù)就可計(jì)算其中的活菌含量。優(yōu)點(diǎn)：可計(jì)算活菌數(shù)，較準(zhǔn)確。缺點(diǎn)：比較繁瑣。6）平板菌落計(jì)數(shù)法。取一定體積的稀釋菌液涂布在合適的固體培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)算原菌液的含菌數(shù)。優(yōu)點(diǎn)，可以獲得活菌的信息。缺點(diǎn)：操作繁瑣，需要培養(yǎng)一定時(shí)間才能獲得，測定

37、結(jié)果受多種因素的影響。24:答：誘變育種的一般程序如下：出發(fā)菌株-菌種純化（出發(fā)菌株性能測定）制備斜面抱子制備單抱子懸液（懸液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)）誘變劑處理（存活菌數(shù)的測定并計(jì)算存活率）-平板分離（測定變異率）-挑取變異菌落并移植至斜面上-初篩（初篩數(shù)據(jù)分析，生產(chǎn)性狀的粗測）-斜面?zhèn)鞔?復(fù)篩（復(fù)篩數(shù)據(jù)分析，精確測定生產(chǎn)性狀）-變異菌株（菌株參數(shù)分析）-小型或中型投產(chǎn)試驗(yàn)-大型投產(chǎn)試驗(yàn)。誘變育種應(yīng)把握的主要原則有以下幾點(diǎn)：1）選擇簡便有效的誘變劑。在選用理化因素作誘變劑時(shí)，在同樣效果下，應(yīng)選用最簡便的因素；在同樣簡便的條件下，應(yīng)選用最高效的因素。2）挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株。最好采用生產(chǎn)上已發(fā)生自變的菌株，

38、選用對(duì)誘變劑敏感的菌株，選取有利于進(jìn)一步研究或應(yīng)用性狀的菌株。4）處理單細(xì)胞或抱子懸液。單細(xì)胞懸液應(yīng)均勻而分散，抱子、芽抱等應(yīng)稍加萌發(fā)。5）選用合適的誘變劑量。一般正變較多出現(xiàn)在低劑量中，負(fù)變較多地出現(xiàn)在高劑量中。6）選用高效的篩選方法。25、答：包括無性繁殖和有性繁殖兩大類：1）無性繁殖：芽殖：主要的無性繁殖方式，成熟細(xì)胞長出一個(gè)小芽，到一定程度后脫離母體繼續(xù)長成新個(gè)體；裂殖：少數(shù)酵母菌可以象細(xì)菌一樣借細(xì)胞橫割分裂而繁殖，例如裂殖酵母（Schizosaccharomyces）。產(chǎn)無性抱子：產(chǎn)節(jié)抱子：如地霉屬（Geotricum）等，產(chǎn)擲抱子如擲抱酵母屬（Sporobolomyces）等；產(chǎn)厚

39、垣抱子如白假絲酉孝母（Candidaalbicans）等。2）有性繁殖：酵母菌以形成子囊和子囊抱子的形式進(jìn)行有性繁殖。Saccharomycescerevisiae的生活史如右圖所示。干。泡干發(fā)平26、答：呼吸是一種最普遍和最重要的生物氧化方式，其特點(diǎn)是底物按常規(guī)方式脫氫后，質(zhì)子經(jīng)完整的呼吸鏈傳遞，有氧條件下以分子氧作質(zhì)子的最終受體產(chǎn)生水和釋放能量ATP,或無氧條件下以含氧化合物作質(zhì)子的最終受體形成還原性化合物、水和釋放能量。呼吸鏈?zhǔn)侵肝挥谠松锛?xì)胞膜上或真核生物線粒體膜上的由一系列氧化還原勢(shì)不同的氫傳遞體或電子傳遞體組成的一組鏈狀傳遞順序，它能把氫或電子從低氧化還原勢(shì)的化合物傳遞給高氧化還原勢(shì)的分子氧或其他無機(jī)、有機(jī)氧化物，并使它們還原。在氫或電子的傳遞過程中，通過與氧化磷酸化反應(yīng)發(fā)生偶聯(lián)就可產(chǎn)生ATP形式的能量