1、中國(guó)藥典2015年版-微生物限度檢查解析質(zhì)量部房有榮2014.06.21目錄 藥品微生物檢驗(yàn)的現(xiàn)狀與發(fā)展 中國(guó)藥典2015年版-微生物限度標(biāo)準(zhǔn)修訂解析 中國(guó)藥典2015年版-非無(wú)菌產(chǎn)品微生物檢查 菌種的傳代、保藏與管理 藥品微生物污染源的調(diào)查與分析 微生物實(shí)驗(yàn)室相關(guān)要求與質(zhì)量管理藥品微生物檢驗(yàn)的現(xiàn)狀與發(fā)展歷史沿革 新中國(guó)第一部藥典（1953年版）收載了無(wú)菌檢查法 我國(guó)開展藥品微生物限度檢查始于1972年。 1978年頒發(fā)了第一個(gè)“藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)”。 1995年版中國(guó)藥典首次收載了微生物限度檢查法，2000年版收載了微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。 從第八屆藥典委員會(huì)（2005版中國(guó)藥典）開始設(shè)立微生物專業(yè)委員會(huì)

2、。藥品微生物檢驗(yàn)的現(xiàn)狀與發(fā)展 2005版將按劑型制定限度修訂為按給藥途徑制定限度強(qiáng)調(diào)微生物檢驗(yàn)的“方法驗(yàn)證”無(wú)菌檢查培養(yǎng)時(shí)間與國(guó)外接軌 2010版 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系基本與國(guó)外接軌 強(qiáng)調(diào)對(duì)微生物檢驗(yàn)過(guò)程的驗(yàn)證及過(guò)程控制 部分品種特別是抗生素品種的無(wú)菌檢查法由附錄走入各論。2015版版修訂后的中國(guó)藥典微生物檢驗(yàn)修訂后的中國(guó)藥典微生物檢驗(yàn)系統(tǒng)成為一個(gè)較完備的標(biāo)準(zhǔn)體系，系統(tǒng)成為一個(gè)較完備的標(biāo)準(zhǔn)體系，將收載將收載15個(gè)左右的微生物檢查法個(gè)左右的微生物檢查法或知道原則或知道原則修訂后的中國(guó)藥典微生物檢測(cè)修訂后的中國(guó)藥典微生物檢測(cè)系統(tǒng)與國(guó)外完全一致系統(tǒng)與國(guó)外完全一致對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行了重大修改對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行了重大修

3、改中國(guó)藥典的標(biāo)準(zhǔn)修訂：中國(guó)藥典的標(biāo)準(zhǔn)修訂：1.醫(yī)藥產(chǎn)品的發(fā)展2.基本“矛盾”“有菌的環(huán)境”生產(chǎn)“無(wú)菌的產(chǎn)品”3.特殊的醫(yī)藥環(huán)境輸液品濫用！中西藥并存！4.不斷有人死亡“欣弗事件”5.藥品微生物污染的反思藥品微生物檢驗(yàn)的現(xiàn)狀與發(fā)展面臨的挑戰(zhàn)：面臨的挑戰(zhàn)：1.方法驗(yàn)證與方法適用性建立實(shí)驗(yàn)室自身的方法依據(jù)體系2.維護(hù)、計(jì)量、校準(zhǔn)、性能確認(rèn)和使用監(jiān)控（溫度測(cè)量裝置、培養(yǎng)箱、水浴箱、烘箱、壓力滅菌器、天平、量器等等）3.供應(yīng)商評(píng)估與現(xiàn)場(chǎng)審計(jì)使用正確的、有嚴(yán)格質(zhì)量保障的產(chǎn)品藥品微生物檢驗(yàn)的現(xiàn)狀與發(fā)展質(zhì)量管理：質(zhì)量管理：中國(guó)藥典2015年版-微生物限度標(biāo)準(zhǔn)修訂解析標(biāo)準(zhǔn)修訂內(nèi)容修訂思路1 中國(guó)藥典2010年版

4、一、二、三部限度標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)內(nèi)容合并。修訂思路2參考EP7.0，USP35，JP X V標(biāo)準(zhǔn)，修訂中國(guó)藥典的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)修訂內(nèi)容參考?xì)W美日藥典標(biāo)準(zhǔn)修訂菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)表達(dá)方式：指數(shù)形式10ncfu，最大可接受限度值遵守2倍規(guī)則：101cfu： 可接受的最大菌數(shù)為 20； 102cfu： 可接受的最大菌數(shù)為 200； 103cfu： 可接受的最大菌數(shù)為 2000：依此類推。檢查指標(biāo)：需氧菌總數(shù)：TAMC（替代細(xì)菌數(shù)）-胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基耐膽鹽的格蘭陰性菌（替代大腸菌群）檢查制劑分類：齒齦、皮膚制劑原輔料、中藥提取物、中藥飲片的控制呼吸道制劑耐膽鹽格蘭陰性菌的控制修訂后限度標(biāo)準(zhǔn)更清楚明了（共8項(xiàng)、

5、4個(gè)表）1.制劑通則、品種項(xiàng)下要求無(wú)菌的制劑及標(biāo)示無(wú)菌的制劑和原輔料 應(yīng)符合無(wú)菌檢查法規(guī)定。 2.用于手術(shù)、燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷的局部給藥制劑 應(yīng)符合無(wú)菌檢查法規(guī)定。 3. 非無(wú)菌化學(xué)藥品制劑、生物制品制劑、不含藥材原粉的中藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（見表 1） 4. 非無(wú)菌含藥材原粉的中藥制劑微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（見表 2）5. 非無(wú)菌的藥用原料及輔料微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（見表 3） 6. 中藥提取物及中藥飲片的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)（見表 4） 7.有兼用途徑的制劑 應(yīng)符合各給藥途徑的標(biāo)準(zhǔn)。 8.霉變、長(zhǎng)螨者 以不合格論。 表表 1非無(wú)菌化學(xué)藥品制劑、生物制品制劑、不含藥材原粉的中藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)非無(wú)菌化學(xué)藥品制

6、劑、生物制品制劑、不含藥材原粉的中藥制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn) 表表 2 非無(wú)菌含藥材原粉的中藥制劑微生物限度標(biāo)準(zhǔn)非無(wú)菌含藥材原粉的中藥制劑微生物限度標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行及制定標(biāo)準(zhǔn)的注意事項(xiàng)執(zhí)行范圍：生產(chǎn)、貯存、銷售過(guò)程中的藥品藥用原料、輔料中藥提取物、中藥飲片新藥標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)口藥品標(biāo)準(zhǔn)復(fù)核藥品質(zhì)量考察及仲裁標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行的注意事項(xiàng)：l 藥典標(biāo)準(zhǔn)出處：中國(guó)藥典通則項(xiàng)下【微生物限度】要求。l 沙門菌檢查： 檢查對(duì)象：口服制劑 l 原輔料、中藥提取物和中藥飲片，參考制劑的要求及生產(chǎn)工藝特點(diǎn)設(shè)置控制軍檢查要求中國(guó)藥典2015年版-非無(wú)菌產(chǎn)品微生物檢查法 檢測(cè)環(huán)境 供試品前處理-抑菌性去除 微生物計(jì)數(shù)法使用范圍-可采用替代檢查方法

7、 微生物計(jì)數(shù)定義變化-需氧菌總數(shù)（胰酪大豆胨瓊脂），霉菌和酵母菌總數(shù)（沙氏葡萄糖瓊脂） 菌種 傳代 保藏 菌液制備-室溫2小時(shí)，28C，24小時(shí)內(nèi)使用 培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件-需氧菌總數(shù) 3035C 35天；霉菌和酵母菌數(shù) 2025C 57天。增加新概念1.MPN(最大或然數(shù))法使用范圍：含菌量較低的供試品細(xì)菌總數(shù)測(cè)定2.“分散均勻”：并非一定要溶解3.偏差調(diào)查概念引入 當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)超?；虺瑯?biāo)時(shí)需要進(jìn)行偏差調(diào)查調(diào)查范圍：人、機(jī)、料、法、環(huán)控制菌檢查法修訂解析本檢查法可采用替代的微生物檢查法，包括自動(dòng)檢測(cè)方法，但必須證明替代方法等效于藥典規(guī)定的檢查方法-新增內(nèi)容在各控制菌項(xiàng)下：生化試驗(yàn)和“應(yīng)進(jìn)行分離

8、、純化及適宜的鑒定試驗(yàn)”改為較少的生化試驗(yàn)或“采用其他適宜方法進(jìn)一步鑒定”-較大改變檢查項(xiàng)目菌種的傳代、保藏與管理控制程序控制程序菌種來(lái)源菌種來(lái)源菌種的保菌種的保管管菌種的復(fù)菌種的復(fù)活活菌種確認(rèn)菌種確認(rèn)菌種的儲(chǔ)菌種的儲(chǔ)存和領(lǐng)用存和領(lǐng)用菌種的銷菌種的銷毀及領(lǐng)用毀及領(lǐng)用記錄記錄菌種傳代、保存、使用及銷售記錄菌種名稱：菌種名稱： 菌種編號(hào)：菌種編號(hào)： 保管人：保管人： 日期：日期： 藥品微生物污染源的調(diào)查與分析微生物實(shí)驗(yàn)室相關(guān)要求與質(zhì)量管理2015年版藥典框架 人員、培養(yǎng)基、試劑、菌種、環(huán)境、環(huán)境、樣品、檢驗(yàn)方法、污染廢棄物處理、檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量保證和檢測(cè)過(guò)程質(zhì)量控制、實(shí)驗(yàn)記錄、結(jié)果判斷檢測(cè)報(bào)告、文件人

9、員 相關(guān)的教育背景 應(yīng)經(jīng)過(guò)生物安全方面培訓(xùn)，保證安全 不斷地繼續(xù)培訓(xùn)，保證知識(shí)與技能不斷地更新 熟悉、規(guī)范理解和執(zhí)行 能力評(píng)估-通過(guò)質(zhì)量控制、能力驗(yàn)證等 培訓(xùn)、考核等檔案培養(yǎng)基 培養(yǎng)基的配制處方、配制方法、滅菌方法的驗(yàn)證、PH值及一般要求強(qiáng)調(diào)容器材質(zhì)對(duì)培養(yǎng)基質(zhì)量的影響（一般為玻璃容器） 培養(yǎng)基的貯存自配培養(yǎng)基標(biāo)記（信息）、貯藏、注意事項(xiàng)及作廢培養(yǎng)基的處理自配培養(yǎng)基標(biāo)記，增加“配置人”信息 培養(yǎng)基的質(zhì)量控制質(zhì)控程序、常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目、過(guò)程控制及適用性實(shí)驗(yàn)、環(huán)境檢測(cè)培養(yǎng)基的要求試劑 應(yīng)有對(duì)試劑進(jìn)行接收、檢查和貯存的程序； 關(guān)鍵試劑在開啟和儲(chǔ)存過(guò)程中，對(duì)每批試劑的適用性進(jìn)行驗(yàn)證，進(jìn)行管理控制，保存和記錄

10、相關(guān)信息； 標(biāo)明名稱、制備依據(jù)、適用性、濃度、效果、儲(chǔ)存條件、制備日期、有效期限及制備人菌種來(lái)源：標(biāo)準(zhǔn)菌株，標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株，工作菌株，可以使用“可以溯源的商業(yè)派生菌株”保藏：標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株的純度和特性確認(rèn)傳代和使用：5代之內(nèi)，“標(biāo)準(zhǔn)菌株如果經(jīng)過(guò)確認(rèn)試驗(yàn)證明已經(jīng)老化、退化、變異、污染等或菌株已無(wú)使用需要時(shí)應(yīng)及時(shí)滅菌銷毀”；管理：應(yīng)有程序文件，包括申購(gòu)、操作、轉(zhuǎn)種傳代、純度特性確認(rèn)記錄，注明名稱、標(biāo)準(zhǔn)號(hào)、接種日期、代數(shù)、培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件、保藏的位置和條件等。環(huán)境 實(shí)驗(yàn)室的布局和運(yùn)行 環(huán)境監(jiān)測(cè) 清潔、消毒和衛(wèi)生設(shè)備建立儀器設(shè)備管理制度 清潔保養(yǎng)制度 操作規(guī)程 使用、監(jiān)控的記錄清單化管理清單化管理標(biāo)識(shí)化管理標(biāo)識(shí)化管理分類管理分類管理樣品檢驗(yàn)方法 方法選擇：應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇適宜方法 方法確認(rèn)：藥典方法、標(biāo)準(zhǔn)方法應(yīng)進(jìn)行方法適用性確認(rèn) 新方法使用前進(jìn)行替代方法的驗(yàn)證 注意對(duì)商業(yè)系統(tǒng)的試劑盒等檢測(cè)方法和數(shù)據(jù)的確認(rèn)。污染廢棄物的處理 應(yīng)有妥善處理廢棄樣品、過(guò)期（或失效）培養(yǎng)基和有害廢棄物的設(shè)施和制度 減少環(huán)境和材料污染符合國(guó)家環(huán)