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文檔簡介

1、Company Logo匯報(bào)內(nèi)容匯報(bào)內(nèi)容選題背景選題背景1近期工作近期工作后續(xù)工作后續(xù)工作參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)基于基于CdTeCdTe量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于trypsintrypsin活性的檢測活性的檢測基于碳量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于基于碳量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于ALPALP活性的檢測活性的檢測12342Company Logo 選題背景選題背景優(yōu)點(diǎn)信息量多信息量多 包括物質(zhì)激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、光強(qiáng)、熒包括物質(zhì)激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、光強(qiáng)、熒 光量子效光量子效 率、熒光壽命等率、熒光壽命等。選擇性強(qiáng):選擇性強(qiáng): 既可依據(jù)特征發(fā)射光譜,又可根據(jù)特征激發(fā)光譜。既可依據(jù)特征發(fā)射光譜,又可根

2、據(jù)特征激發(fā)光譜。靈敏度高:靈敏度高: 分析物濃度范圍:分析物濃度范圍:10-5-10-8M, 檢測下限也要比紫外檢測下限也要比紫外- 可見分光光度法高可見分光光度法高2-4個(gè)數(shù)量級(jí)。個(gè)數(shù)量級(jí)。試樣量少,方法簡單試樣量少,方法簡單根據(jù)物質(zhì)的熒光譜線位置及其強(qiáng)度進(jìn)行物質(zhì)鑒定和含量測定的方法。根據(jù)物質(zhì)的熒光譜線位置及其強(qiáng)度進(jìn)行物質(zhì)鑒定和含量測定的方法。熒光成像熒光成像Company Logo測初始反應(yīng)速率測初始反應(yīng)速率使引起熒光信號(hào)與熒光體濃度不呈線性關(guān)系的效應(yīng)降低使引起熒光信號(hào)與熒光體濃度不呈線性關(guān)系的效應(yīng)降低較高的分析物濃度下仍能獲得線性的響應(yīng)較高的分析物濃度下仍能獲得線性的響應(yīng)不受散射光、背景

3、熒光的干擾不受散射光、背景熒光的干擾熒光分析法分類常常規(guī)規(guī)的的熒熒光光分分析析法法同同步步熒熒光光分分析析法法三三維維熒熒光光光光譜譜分分析析法法時(shí)時(shí)間間分分辨辨和和相相分分辨辨熒熒光光分分析析法法熒熒光光偏偏振振測測定定低低溫溫?zé)蔁晒夤夥址治鑫龇ǚü坦腆w體表表面面熒熒光光分分析析法法動(dòng)動(dòng)力力學(xué)學(xué)熒熒光光分分析析法法空空間間分分辨辨熒熒光光分分析析技技術(shù)術(shù)單單分分子子熒熒光光檢檢測測導(dǎo)導(dǎo)數(shù)數(shù)熒熒光光分分析析法法熒熒光光免免疫疫分分析析法法酶酶催催化化法法催催化化法法非非催催化化法法酶的活性酶的活性 底底 物物 活化劑活化劑 抑制劑抑制劑靈敏度高靈敏度高特異性強(qiáng)特異性強(qiáng)動(dòng)態(tài)線性范圍較寬動(dòng)態(tài)線性范

4、圍較寬Company Logo探針的制備探針的制備 構(gòu)建的過程構(gòu)建的過程基底的選擇基底的選擇熒光法監(jiān)測熒光法監(jiān)測酶動(dòng)力學(xué)酶動(dòng)力學(xué) Company Logo-Cyt.cTrypsin-+-+CdTeCdTeCdTe-GSH=第一章第一章 基于基于CdTe量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于trypsin活性的檢測活性的檢測Company LogoCompany Logo300400500600700800024WavelengthAbsorbance 0.00.81.0baFluorescence Intensuty ( a.u.) BPeng 經(jīng)驗(yàn)公式:經(jīng)驗(yàn)公式:D=

5、(9.812710-7) 3 (1.714710-3) 2 + (1.0064) 194.84 (為第一吸收峰值為第一吸收峰值)由該由該peng經(jīng)驗(yàn)公式可經(jīng)驗(yàn)公式可得該量子點(diǎn)的直徑為:得該量子點(diǎn)的直徑為:D=4.3nmACompany Logo6.57.07.58.08.59.09.51020304050607080b Efficiency (%)pH valueaAB2025303540450.550.600.650.700.750.800.8537 F L (a.u.)Incubation Temperature/Company LogoA0100200300400500123456 F0

6、/Fcyt c (nM)5506006507007508000.00.81.05500Cyt c (nM) F L (a.u.)Wavelength (nm)5506006507007508000.00.81.0debcaF L (a.u.)Wavelength (nm) 注:圖c中:a為QDs的熒光峰;b,c分別為加入550nM和140nMcyt.c時(shí)的熒光峰;d,e分別為b,c中加入375nMtrypsin后的熒光峰140nM550nMBCCompany Logo5506006507007508000.00.81.0cba0375Try

7、psin (nM) F L (a.u.)Wavelength (nm)A a b c 0123456789101.01.52.02.53.0(1) trypsin (2) lysozyme(3) ALP(4) Thrombin (5) Glucose Oxidase (6) Pepsin (7) Lipase (8) -amylase (9) BSA (10) no enzyme I/I0BCompany Logo02004006008001000120020406080100120140 Trypsin 0nM 3.75nM 62.5nM 187.5nM 250nM 375nM Cyt.C

8、t (nM)Time (s)0200400600800100012000.8 Trypsin0nM3.75nM62.5nM187.5nM250nM375nM F L (a.u.)Time (s)ABCompany Logo0.0050.0100.0150.0200.02546810121416 1/V0 (s nM-1)1/cyt.c (nM-1)01002003004000.0R = 0.99975 V0( nM/s)Trypsin (nM)A01002003004000.00.51.01.52.0R = 0.9998 Vmax/Km 10 -3 (s-1

9、)Trypsin (nM)BCkcat/Km = 6150 M-1 s-1 Lineweaver Burk plot Km = 2.3 M MichaelisMenten 檢測范圍:檢測范圍: 1.25-375 nM檢測限檢測限 0.42 nMCompany LogoA0200400600800100012001.01.52.02.53.0 BBI0 g/mL 0.05 g/mL0.1 g/mL0.15 g/mL0.25 g/mL0.4 g/mL F L(a.u.)Time (s)0.00.40.000.020.040.060.080.100.12 V0(nM/s)BBI (

10、 g/mL)R = 0.9970.00.40204060 Inhibition Efficiency(%)BBI ( g/mL)IC50 = 0.24 ( g/mL)BCCompany LogoCompany LogoCompany Logo第二章第二章 基于碳量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于基于碳量子點(diǎn)的光學(xué)傳感器用于ALP活性的檢測活性的檢測PPiCu2+ALPCompany Logo3004005006007008000.00.4 WavelengthAbsorbance02004006008001000 mex = 480 nm mem = 546 nmF L

11、BACompany Logo024685.6 4 mMF0/FTris-HCl (mM)024681023456 3.3*10-5 g/mLF0/FC Dots (*10-5 g/mL)BCA34567890.00.8pH = 6ba Efficiency (%)pH valueCompany Logo0204060801001200481216 R = 0.99946F0/FCu2+ ( M)0123456780510152025 F0/FCu2+ (*10-4 M)BAC注:112M Cu2+ 6% 750M Cu2+ 4%5005506006507

12、0002505007501000Cu2+ Fluorescence IntensityWavelength (nm) CDs CDs+Cu2+(112 M) CDs+Cu2+(750 M)Company Logo50055060065070002505007501000PPi Fluorescence IntensityWavelength (nm) CDs CDs+Cu2+ CDs+Cu2+PPi(80 M)02040608002004006008001000 Fluorescence Intensity PPi ( M)R = 0.99949ABCompany Logo0102030405

13、0602.02.4 ALP (*10-8 M)F0/FR = 0.9992150055060065070002505007501000ALP Fluorescence IntensityWavelength (nm)BA檢測范圍:檢測范圍:1-6010-8 M檢測限:檢測限:3 nMCompany Logo0510152025301.0 ALP (* 10-8 M)100602020 Fluorecsence IntensityT (min)Company Logov繼續(xù)完善實(shí)驗(yàn)體系繼續(xù)完善實(shí)驗(yàn)體系v嘗試改進(jìn)碳量子點(diǎn)的性質(zhì),做更嘗試改進(jìn)碳量子點(diǎn)的性質(zhì),做更廣

14、泛的應(yīng)用。廣泛的應(yīng)用。第四章第四章 后續(xù)工作后續(xù)工作Company Logo1 . K. M. Sun, C. K. McLaughlin, D. R. Lantero and R. A. Manderville,J. Am. Chem. Soc., 2007, 129, 18941895.2. M. S. Briggs, D. D. Burns, M. E. Cooper and S. J. Gregory, Chem.Commun., 2000, 23232324.3 .J. A. Thomas, R. N. Buchsbaum, A. Zimniak and E. Racker,Bioc

15、hemistry, 1979, 18, 22102218.4 .A. H. Lee and I. F. Tannock, Cancer Res., 1998, 58, 19011908.5 . M. A. Ramirez, R. Toriano, M. Parisi and G. Malnic, J. Membr. Biol.,2000, 177, 149157.6 .R. Pal and D. Parker, Chem. Commun., 2007, 474476.7. H.-J. Lin, P. Herman, J. S. Kang and J. R. Lakowicz, Anal. Biochem.,2001, 294, 118125.8. F. Galindo, M. I. Burguete, L. Vigara, S.

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