1、Life Sciences無菌生產(chǎn)工藝中的無菌過濾Life Sciences無菌生產(chǎn)工藝中的無菌過濾研討會議題 國際法規(guī) 歐盟藥品審評管理局與美國食品及藥物管理局相關(guān) 規(guī)范指南 無菌過濾的有效性驗證* 細菌截留 過濾器完整性試驗* 理論與實踐 論證* 美國食品及藥物管理局與加拿大衛(wèi)生署培訓(xùn)計劃Life Sciences無菌生產(chǎn)工藝中的無菌過濾國際法規(guī)與規(guī)范指南（歐盟藥 品審評管理局與美國食品及藥 物管理局）Life Sciences國際人用藥品注冊通用技術(shù)協(xié)調(diào)委員會協(xié)調(diào)性三方指南ICH （文本編號:Q7A）-關(guān)于原料藥生產(chǎn) 的質(zhì)量管理規(guī)范指南C. 適用范疇（1.3）本規(guī)范指南適用于人用藥品所需

2、原料藥的生產(chǎn)，在 無菌原料藥生產(chǎn)中，原料藥達到無菌狀態(tài)之前，本 規(guī)范指南的適用性有效；盡管本規(guī)范指南中未予涵 蓋，踐行無菌原料藥的滅菌與無菌工藝應(yīng)當(dāng)遵從當(dāng) 地權(quán)威機構(gòu)規(guī)定之藥品生產(chǎn)相關(guān)質(zhì)量管理規(guī)范.Life Sciences歐盟藥品審評管理局EMEA 專利藥品評審委員會CPMP成品劑型生產(chǎn)規(guī)范指南（CPMP/QWP/486/95）1996年4月Life Sciences7. 特別事項7.1 滅菌方法在 “藥物開發(fā)”章節(jié)（第IIA部分）中，應(yīng)詮 釋選擇某種滅菌方法的機理；根據(jù)歐洲藥 典中“無菌藥品的制備方法”所述，首選在最 終容器中進行最終滅菌；不能在最終容器 中進行最終滅菌的，應(yīng)當(dāng)在申請文件中

3、論 證其合理性。Life Sciences歐盟藥品審評管理局EMEA專利藥品評審委員會CPMP滅菌方法選擇決策圖（CPMP/QWP/054/98）藥物開發(fā)規(guī)范指南附錄（CPMP/QWP/155/96）2000年4月Life Sciences概論歐洲藥典與歐盟藥品審評管理局專利藥品 評審委員會規(guī)范指南中明確指出，無菌藥 品應(yīng)當(dāng)在其最終容器中接受最終滅菌處理.如因藥品劑型的不穩(wěn)定性，不可能通過加 熱進行最終滅菌，應(yīng)當(dāng)做出決策，轉(zhuǎn)用最 終滅菌、過濾以及（或）無菌工藝的其它 備用方案.Life Sciences選擇滅菌方法的決策圖（水溶液藥在121下進行15分鐘濕 熱滅菌,是否能夠完成此藥 品的滅菌處

4、理?對此藥品進行濕熱滅菌（Fo值 8分鐘），滅菌 保證水平是否能夠 10-6 ?在121下進行15分鐘高 溫高壓滅菌否是是對此藥品進行濕熱滅菌（Fo值 8分鐘）否Life Sciences選擇滅菌方法的決策圖（水溶液藥品）此劑型是否能夠過濾通過 微生物截留過濾器？對獨立部件進行預(yù)滅菌處 理,采用無菌配料與無菌灌 裝組合利用無菌過濾與無菌 灌裝否是Life Sciences選擇滅菌方法的決策圖（非水溶液，半固 體或干粉狀藥品）在160下進行120分鐘干 熱滅菌,是否能夠完成此藥 品的滅菌處理？否是在160下進行 120分鐘干熱滅 菌采用標(biāo)準(zhǔn)滅菌循環(huán)之外的備用組合(改變 加熱時間與加熱溫度)對此藥

5、品進行干熱 滅菌, 滅菌保證水平是否能夠 10-6 ？是采用備用組合（改變加熱時間與加熱 溫度）對此藥品進行干熱滅菌, 確保 滅菌保證水平 10-6否Life Sciences選擇滅菌方法的決策圖（非水溶液,半固體 或干粉狀藥品）是否能夠采用干熱滅菌之外的其它方法完成此藥 品的滅菌處理,譬如:采用電離輻射滅菌法(最小吸 收劑量25KGy)采用通過有效性驗證的較低輻射劑 量（參考文獻:ISO11137），是否 能夠完成此藥品的滅菌處理?采用電離輻射滅菌法（最小吸收劑量25KGy）否是是否采用通過有效性驗證的輻 射劑量,對此藥品進行滅菌 處理Life Sciences選擇滅菌方法的決策圖（非水溶液

6、，半固 體或干粉狀藥品）此劑型是否能夠過濾通過 微生物截留過濾器?對獨立部件進行預(yù)滅菌處 理,采用無菌配料與無菌灌 裝組合利用無菌過濾與無菌 灌裝否是Life Sciences歐盟藥品審評管理局EMEA 專利藥品評審委員會CPMP成品劑型生產(chǎn)規(guī)范指南（CPMP/QWP/486/95）1996年4月Life Sciences7. 特別事項7.1 滅菌方法 （續(xù)）在IIB部分中，應(yīng)當(dāng)說明實際應(yīng)用的滅菌工藝。執(zhí) 行任何滅菌工藝，均應(yīng)遵循歐洲藥典的相關(guān)指令， 在申請文件中，應(yīng)當(dāng)對此作出明確聲明。根據(jù)歐 洲藥典，任何滅菌程序均應(yīng)通過有效性驗證，并 在其具體執(zhí)行過程中遵循歐共體生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī) 范各項法規(guī).

7、Life Sciences7.特別事項對于過濾滅菌而言，必須在申請文件中注明 過濾之前容許的生物負載最大值。大多數(shù)情況下，每100毫升藥品中允許存在 10 CFU單位的生理微生物群 （取決于待過 濾藥品容積與過濾器直徑的相對比例）。如果達不到上述要求，有必要利用細菌截留 過濾器進行預(yù)過濾，以獲得足夠低的生物負 載量。Life Sciences7.特別事項在申請文件中，還應(yīng)當(dāng)說明細菌截留過濾器 的型號及其濾膜的孔徑大小。根據(jù)歐洲藥典, 濾膜孔徑等于或者小于0.22 mm，在容許之 列，而無需進一步論證其合理性。如果準(zhǔn)備使用較大孔徑的濾膜，并相應(yīng)增加 一個滅菌步驟,此提案應(yīng)當(dāng)通過有效性驗證， 以證

8、實其有效性，并在申請文件中論證其合 理性。Life Sciences歐共體生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范指南 附錄I（修訂本）無菌藥品的生產(chǎn)2003年5月Life Sciences設(shè)備36. 所有設(shè)備（如滅菌器、空氣處理機組、 過濾系統(tǒng)、通氣管、氣體過濾器、水處 理系統(tǒng)、供水、儲水以及配水系統(tǒng)等） 均需經(jīng)過有效性驗證，證實其有效性， 并接受有計劃的維護保養(yǎng)；驗收合格后， 方可恢復(fù)使用。Life Sciences工藝40. 在工藝流程的各個階段（包括滅菌前）， 應(yīng)采取各種預(yù)防措施，將污染程度降至 最低。51. 從開始準(zhǔn)備溶液，到滅菌完成（或過濾 通過微生物截留過濾器），所需處理時 間應(yīng)當(dāng)降至最短。對于各種藥品

9、，應(yīng)考慮其組成與規(guī)定的 貯藏方法，分別預(yù)設(shè)各自的處理時間最 大值。Life Sciences工藝52. 滅菌前，應(yīng)當(dāng)監(jiān)控生物負載。滅菌前一刻， 污染物水平應(yīng)該存在一個工作極限值，這與 將使用的滅菌方法的效率相關(guān)。在適當(dāng)情況下，應(yīng)監(jiān)控以確保不存在任何致 熱原。所有溶液，特別是大容積輸液藥劑，必須接 受微生物截留過濾器的過濾處理；如果可能, 的話，應(yīng)在現(xiàn)場過濾后立即灌裝。Life Sciences工藝53. 潔凈區(qū)是進行無菌作業(yè)的區(qū)域，潔凈區(qū)中所 需的一切物品（零部件、容器、設(shè)備以及其 它）均應(yīng)接受滅菌處理，并通過雙扉滅菌器（滅菌器與墻之間應(yīng)當(dāng)密封）傳入潔凈區(qū)； 也可以采取其它程序方法，前提是必須

10、達到 同樣的目標(biāo)，即：保證不將污染物導(dǎo)入潔凈 區(qū)。不可燃氣體必須接受微生物截留過濾器的過 濾處理?！盠ife Sciences滅菌55. 所有滅菌工藝均需通過有效性驗證。如 果所采用的滅菌方法在歐洲藥典最新版 本中并未載明，或者滅菌對象藥品并非 單純的水性或油性溶液，其處理應(yīng)當(dāng)特 別謹慎。只要有可能，應(yīng)當(dāng)盡量首選加熱滅菌。 在任何情況下，滅菌工藝必須符合藥品 上市許可與藥品生產(chǎn)許可的相關(guān)規(guī)定。Life Sciences滅菌主題滅菌（概要）. 加熱滅菌 濕熱 章節(jié)55-6162-6566-68干熱 69輻射滅菌環(huán)氧乙烷滅菌70-7576-81對不能在其最終容器中滅菌的藥品進行過濾82-87Lif

11、e Sciences對不能在其最終容器中滅菌的藥品進行過濾82. 一般認為，如果可能在藥品最終容器中對藥 品滅菌，僅僅利用過濾并不足以達到滅菌目 的。在目前可用的滅菌方法中，應(yīng)當(dāng)首選蒸 汽滅菌。如果藥品不能在其最終容器中接受滅菌處理, 可使溶液（或液體）通過標(biāo)稱孔徑0.22微 米(或微生物截留特性至少能夠與其相當(dāng)?shù)钠?它孔徑大小)的無菌過濾器，進入預(yù)先已經(jīng)滅 菌的容器。這樣的過濾器能夠去除大部分細 菌和霉菌，但是不能完全去除病毒和支原體。Life Sciences對不能在其最終容器中滅菌的藥品進行過濾82. （續(xù)）應(yīng)當(dāng)考慮利用某種程度的加熱滅菌補足過 濾方法，達到滅菌目的。83. 與其它滅菌工

12、藝相比，過濾法具有潛在的 附加風(fēng)險，因此，利用經(jīng)過滅菌處理后的 微生物截留過濾器施行二次過濾，隨后立 即灌裝，可能不失為明智之舉。一旦完成 最終無菌過濾，應(yīng)當(dāng)緊隨其后，盡可能快 地開始灌裝。Life Sciences對不能在其最終容器中滅菌的藥品進行過濾84.過濾器的纖維脫落特性應(yīng)為最低。85.經(jīng)過滅菌處理后的過濾器，其完整性應(yīng)當(dāng) 通過驗證，方可投入使用；另外，使用完 畢，應(yīng)當(dāng)立即利用適當(dāng)?shù)姆椒ǎㄆ┤?起泡 點試驗,擴散流試驗或壓力保持試驗），對 其完整性予以驗證。驗證時，應(yīng)當(dāng)測定散裝溶液（給定容積） 過濾所需的時間，以及過濾器中的壓差;在 日常生產(chǎn)中，發(fā)現(xiàn)任何顯著差異（與驗證 所得相應(yīng)數(shù)據(jù)對

13、比），應(yīng)記錄下來，然后 進行調(diào)查。Life Sciences對不能在其最終容器中滅菌的藥品進行過濾85. （續(xù)）在批記錄中，應(yīng)當(dāng)記載上述檢查結(jié)果。關(guān)鍵的空氣/氣體通氣過濾器使用完畢后，應(yīng)當(dāng)驗 證其完整性；對于其它過濾器，其完整性應(yīng)該定 期予以驗證。Life Sciences對不能在其最終容器中滅菌的藥品進行過濾86. 同一過濾器的使用時間不得超出一個工作日（除 非此種做法已經(jīng)通過有效性驗證）。87. 過濾器不應(yīng)去除藥品中的成份，或者在藥品中引 入其他雜質(zhì)，從而對藥品造成影響。Life Sciences歐盟生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 附錄I:作出修改的建議修改52條款（關(guān)于生物 負載的監(jiān)控）*標(biāo)題全文：對

14、環(huán)境分類表中條款及其相關(guān)文本作出修改的建議- 修改42條款（關(guān)于培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的驗收標(biāo)準(zhǔn)）， 修改52 條款（關(guān)于生物負載的監(jiān)控），并修改88條款中的附加指南（關(guān)于針劑藥水瓶的密封）（EMEA/INS/GMP/318222/2005/修正）2005年9月Life Sciences43-51條款未作變更，而是重新編號為48-56條款。57條款(原52條款)變更如下：57.滅菌前，應(yīng)當(dāng)監(jiān)控生物負載。滅菌前一刻，污染 物水平應(yīng)該存在一個工作極限值；對于無菌灌裝藥品 和最終滅菌藥品的所有批，均應(yīng)實施監(jiān)控。對于最終 滅菌藥品，如果設(shè)定的滅菌參數(shù)相當(dāng)嚴苛，可能每間 隔一段適當(dāng)?shù)臅r間才需要對生物負載進行

15、監(jiān)控。Life Sciences57. （續(xù)）對于參數(shù)放行系統(tǒng)，所有批都應(yīng)當(dāng)接受生物負載分析（此分析被視為進程內(nèi)試驗）。在適當(dāng)情況下，應(yīng)監(jiān)控內(nèi)毒素水平。所有溶液，特別是大容積輸液藥劑，必須接受微生物 截留過濾器的過濾處理；如果可能，應(yīng)在現(xiàn)場過濾后 立即灌裝。53-87條款未作變更，而是重新編號為58-92條款。Life Sciences國際藥物工程協(xié)會ISPE 2006年4月評論 除了污染物與（或）內(nèi)毒素風(fēng)險程度較高的原料（譬如：天然產(chǎn)物或微生物源生物）確有需要，要 求每批制劑過濾前均需分析其生物負載，令工作更 為繁重。 假定：經(jīng)過非常嚴苛的微生物挑戰(zhàn)性試驗（107/cm2），過濾器有效性得以

16、驗證；并且，每 次使用完畢之后，每只過濾器均通過試驗，驗證其 完整性。那么，預(yù)過濾生物負載分析目的何在？另 外,，又該設(shè)定怎樣的指標(biāo)？ 對于有感染風(fēng)險的原料，才要求其接受較為頻繁的 常規(guī)生物負載評估；除此之外，其它任何原料僅需 定期接受生物負載評估。Life Sciences國際藥物工程協(xié)會 ISPE 2006年4月評論（續(xù)）關(guān)于：“所有溶液,特別是大容積輸液藥劑,必須 接受微生物截留過濾器的過濾處理；如果可能 的話，應(yīng)在現(xiàn)場過濾后立即灌裝?！辫b于懸浮液和疫苗不能在灌裝前接受無菌過濾 處理，就此而言，此條款令人困惑。Life Sciences國際藥物工程協(xié)會 ISPE 2006年4月評論-改進

17、建議 “所有溶液，特別是大容積輸液藥劑，必須接 受微生物截留過濾器的過濾處理；如果可能 的話，應(yīng)在現(xiàn)場過濾后立即灌裝。 如果藥物成品不能接受無菌過濾，劑型各組 分均須完成其滅菌處理，并且在無菌狀態(tài)下 混合調(diào)制?！盠ife Sciences注射用藥物協(xié)會PDA評論 (2006年4月) 在溶液灌裝操作實踐中，利用兩只串聯(lián)的滅 菌級過濾器，可以加強無菌保障。我們已經(jīng) 建議修訂57條款（新版），在其中對上述改 進有所涉及。 串聯(lián)使用兩只過濾器時，我們認為以下做法 是適當(dāng)?shù)模好块g隔一段適當(dāng)?shù)臅r間，可能才 需要對生物負載進行監(jiān)控。Life Sciences美國食品及藥物管理局FDA產(chǎn)業(yè)規(guī)范指南 無菌工藝下

18、的無菌藥生產(chǎn)現(xiàn)行優(yōu)良藥品制造規(guī)范2004年9月Life Sciences概述 氣體過濾應(yīng)用、工藝控制、完整性試驗 液體過濾有效性驗證 - 生物負載監(jiān)控、微生物挑戰(zhàn) 性試驗、 最惡劣條件操作 - 殘余過濾、完整性試驗、過濾器用 法Life Sciences氣體/通氣過濾 IV. 廠房和設(shè)備 D. 空氣過濾 1. 濾膜應(yīng)用工藝控制完整性試驗Life Sciences第1節(jié)： 應(yīng)用 “壓縮氣體應(yīng)當(dāng)具有一定的純度 （譬如:潔凈 無油）。過濾之后，對比壓縮氣體導(dǎo)入環(huán)境中 的空氣質(zhì)量，壓縮氣體的微生物學(xué)性質(zhì)與顆粒 品質(zhì)應(yīng)當(dāng)與之持平或者勝出。 壓縮氣體（譬如：空氣、氮氣以及二氧化碳） 常常被用于潔凈室中，

19、并被頻繁地用于清洗 或氣體保護堆焊工藝?！盠ife Sciences第2節(jié)： 應(yīng)用 “可利用膜過濾器過濾壓縮氣體，使其達到一定 的高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。這些過濾器經(jīng)常用于生成無菌 壓縮氣體，以執(zhí)行涉及無菌材料（如零部件與 設(shè)備等）的操作。 舉例來說，我們建議將滅菌膜過濾器用于高壓 滅菌器的空氣管路，冷凍真空干燥機的真空斷 路器，以及容納滅菌后原料的儲罐?！盠ife Sciences第2節(jié)： 工藝控制 “滅菌后的存儲罐，以及其中容納的所有液體， 必須保持處于正壓之下（或密封良好），以防止微生物污染。 防護措施必須落實到位，以防止壓力變化導(dǎo) 致非無菌空氣或液體回流，進而造成污染。”Life Sciences

20、第3節(jié)：潮濕 “氣體過濾器（包括通氣過濾器）應(yīng)當(dāng)干燥。 氣體過濾器中的冷凝液可能導(dǎo)致使用時發(fā)生 堵塞，或者助長微生物的滋生。 使用疏水性過濾器，并在適當(dāng)?shù)臅r候?qū)ζ溥M 行加熱處理，可以避免發(fā)生潮濕殘留問題。Life Sciences第3節(jié)： 完整性試驗 “我們建議，如果過濾器的作用在于無菌分界， 或是供應(yīng)可能影響制品的無菌氣體，其完整性試驗應(yīng)當(dāng)在安裝完畢時立即進行，并在其 后定期執(zhí)行（譬如：使用之后）。 同時建議：如果進行的活動可能對過濾器造 成損害，應(yīng)在其后試驗過濾器的完整性；如 果過濾器未能通過完整性試驗，應(yīng)當(dāng)調(diào)查試 驗失敗的原因；另外，每間隔一段適當(dāng)?shù)臅r 間，過濾器就應(yīng)當(dāng)定期予以置換?！盠

21、ife Sciences液體過濾 IX 無菌工藝以及滅菌的有效性驗證關(guān)于常規(guī)鑒定與有效性驗證研究的建議B. 過濾效率 針對定義、有效性驗證、完整性試驗以及 無菌過濾器用法的特別指南Life Sciences滅菌級過濾器-術(shù)語定義的歷史演變“在微生物挑戰(zhàn)性試驗（微生物指示劑為缺陷假單胞菌,其濃度至 少不低于107/cm2過濾器表面）中生成無菌濾出物的過濾器”1987年“在其有效性通過適當(dāng)驗證后，能夠去除液體流中所有微生物 ，生成無菌濾出物的過濾器”2004年Life Sciences第1節(jié)：基本概念 “過濾是一種通用的藥品溶液滅菌方法。 滅菌級過濾器的有效性應(yīng)當(dāng)?shù)玫津炞C，從而 可再現(xiàn)性地去除生產(chǎn)

22、液流中的活性微生物， 生成無菌濾出物。 目前，滅菌級過濾器的標(biāo)稱孔徑通常是0.2m*或者更低?！?一般認為：標(biāo)稱孔徑等級為0.22m或0.2m的過濾器可以互 換。Life Sciences第1節(jié): 雙重, 有效性驗證 “在許多情況下，都應(yīng)當(dāng)考慮使用雙重?zé)o菌過 濾器。 使用單只過濾器（或過濾器組合）時的有效 性驗證應(yīng)當(dāng)包括：微生物挑戰(zhàn)性試驗，以模 擬待過濾原料的最惡劣生產(chǎn)條件；完整性試 驗，其結(jié)果用于研究?！盠ife Sciences何謂“雙重”過濾器？ 字典解釋=多余的，不需要的用途：過濾器完整性一旦失效，減輕批損失的 風(fēng)險。如果1號過濾器有效，對批放行， 2號過濾器 忽略不計如果1號過濾器失

23、效，測試2號過濾器如果2號過濾器有效，對批放行Life Sciences何謂“雙重”過濾器？ “二級”過濾1號過濾器用途：降低高生物負載，或滅菌（？）2號過濾器用途：無菌保證。只有1號和2號過濾器都通過完整性試驗，才 能對批放行Life Sciences何謂“雙重”過濾器? 歐洲藥典生物負載膜的最小起泡點壓力 確認以上膜的起泡點壓力 通過驗證的濾 片膜的最小起泡點壓力 試驗裝置的起泡點壓力 裝置容許的最 小起泡點壓力Life Sciences完整性試驗對比 前進流 流速過低，以致無法在小過濾圓盤上進行測 量 （不能與筒式濾芯相比） 因此，確認濾筒中膜的起泡點壓力 膜的最小 起泡點壓力 確認以上

24、膜的起泡點壓力 通過驗證的過濾 圓盤膜的最小起泡點壓力 試驗裝置流速 裝置容許的流速最大值Life Sciences概要 氣體的無菌過濾 疏水性過濾器，冷凝液控制， 定期進行完整性試驗，定期置換 液體的無菌過濾 雙重，生物負載極限及其測定， 在最惡劣條件下，進行工藝針對性的截留有效性驗證 研究 過濾器工藝完整性試驗與截留有效性驗證研究一致Life Sciences美國食品及藥物管理局 FDA 高純水系統(tǒng)檢驗規(guī)范指南 (1993年7月)Life Sciences美國食品及藥物管理局高純水系統(tǒng)檢驗規(guī)范指南 (1993年)“存儲罐部件中，由通氣過濾器所引發(fā)的爭議最為 突出?！薄跋Ｍ心承┓桨?，可對此過濾器進行完整性試驗， 以確保其完整性有效。”“有很多方法進行通氣過濾器在位完整性試驗