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文檔簡介
1、電針不同腧穴配伍對心肌缺血損傷大鼠心肌功能的影響9400字 摘要 目的 探?電針不同腧穴配伍對心肌缺血損傷大鼠心肌功能的影響。 方法 按隨機數(shù)字表法將60只雄性Wistar大鼠分為正常組、模型組、腧穴配伍組、常規(guī)配穴組四組,每組各15只。造模方法:鹽酸異丙腎上腺素皮下注射5 mL/kg。正常組注射同等劑量的0.9%氯化鈉溶液,1次/d,連續(xù)1周;模型組造模;腧穴配伍組取造模成功的大鼠,電針其雙內關穴、雙足三里穴及關元穴,每天各1次,連續(xù)2周;常規(guī)配穴組取雙內關、雙神門及膻中,余法同腧穴配伍組。觀察各組大鼠心電圖變化及心肌超氧化物歧化酶SOD活性、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px活性和丙二醛MDA
2、含量。 結果 與正常組比擬,模型組心率HR加快明顯,S-T段振幅抬高顯著,差異有高度統(tǒng)計學意義P 0.01;電針干預后,腧穴配伍組及常規(guī)配穴組HR有所減慢,S-T段振幅抬高降低,與模型組比擬,差異有統(tǒng)計學意義P 0.05。與正常組比擬,模型組大鼠心肌SOD活性、GSH-Px活性顯著降低,MDA含量顯著升高,差異有高度統(tǒng)計學意義P 0.01;電針干預后,腧穴配伍組及常規(guī)配穴組大鼠心肌SOD活性、GSH-Px活性顯著升高,MDA含量降低,與模型組比擬,差異有統(tǒng)計學意義P 0.05;與常規(guī)配穴組比擬,腧穴配伍組心肌SOD、GSH-Px活性升高,MDA含量降低,差異有統(tǒng)計學意義P 0.05。 結論 腧
3、穴配伍針刺法具有很好的保護心肌缺血的效果,可以有效減輕心肌細胞變性及心肌組織的損害,為臨床運用針灸治療心肌缺血性疾病提供根據(jù)。 畢業(yè)關鍵詞 腧穴配伍;電針;心肌缺血損傷;心肌功能中圖分類號 R245 文獻標識碼 A 文章編號 1673-7210202201c-0134-04Abstract Objective To explore the effect of different acupoints of electroacupuncture on myocardial function in rats with myocardial ischemia injury. Methods Sixty
4、 male Wistar rats were randomly divided into four groups by random number table method: normal group, model group, acupoint patibility group, normal distribution group, with 15 rats in each group. Building methods: subcutaneous injection of Isoproterenol Hydrochloride 5 mL/kg was given. Normal group
5、: the same dose of 0.9% sodium chloride solution was injected, once a day, for one week. Model group was made the model. Acupoint patibility group: the successful rats of the model were taken, and each day, the electric needle of the double “neiguan, double “zusanli and “guanyuan were performed resp
6、ectively for two weeks. Normal distribution group: neiguan, double shenmen and danzhong were performed respectively, the followed method was as the same as the acupoint patibility group. The changes of electrocardiogram in rats, and the activities of superoxide dismutase SOD, glutathione peroxidase
7、GSH-Px and malondialdehyde MDA were observed. Results pared with normal group, the heart rate HR in model group was accelerated significantly, and the amplitude of S-T segment was significantly enhanced, the differences were highly statistically significant P 0.01. After the electroacupuncture inter
8、vention, the HR of the acupoints in the acupoint patibility group and normal distribution group was decreased, and the amplitude of S-T was decreased, which had statistically significant differences pared with those of model group P 0.05. pared with the normal group, the activities of myocardial SOD
9、 and GSH-Px in the model group were decreased significantly, and the content of MDA was increased significantly, the differences were highly statistically significant P 0.01. After the electroacupuncture intervention, the activities of SOD and GSH-Px of the myocardium of the rats in the acupoint pat
10、ibility group and normal distribution group were significantly increased, and the content of MDA was decreased, which had statistically significant differences pared with those of model group P 0.05. pared with normal distribution group, the activities of myocardial SOD and GSH-Px in the acupoint pa
11、tibility group were significantly increased, and the content of MDA was decreased significantly, the differences were statistically significant P 0.05. Conclusion patibility of acupuncture acupoints method has very good protection effect for myocardial ischemia, which can effectively reduce the myoc
12、ardial cell degeneration and the myocardial tissue damage, and it can provide basis for clinical controlling the myocardial ischemic diseases with acupuncture. Key words Acupoint patibility; Electroacupuncture; Myocardial ischemia injury; Myocardial function心肌缺血是因心臟的血液灌注量小、心臟供氧才能弱而導致的心肌能量代謝異常,不能維持心臟
13、正常運行的一種病理特征1。心肌缺血的發(fā)活力制較為復雜,目前較為集中的觀點是自由基的大量產生、細胞內鈣離子的超載、心肌細胞的凋亡、中性粒細胞的過度浸潤、能量代謝的異常及內皮細胞功能異常等均參與其發(fā)生2-3。中醫(yī)學認為心肌缺血屬“胸痹心痛的范疇,本虛標實為其根本病機,以補虛瀉實為其治療原那么4。多項研究顯示,內關穴是歷代針灸醫(yī)案治療心胸疾病的首選要穴,電針“內關可保護缺血的心肌細胞5-6。本研究在已有文獻7-8的根底上,以“內關為主穴瀉標實,配伍“足三里“關元穴補本虛,并與對照常規(guī)配穴法進展比照,觀察電針以“內關為不同腧穴配伍對心肌缺血損傷大鼠的治療效應。1 材料與方法1.1 實驗動物及分組Wis
14、tar大鼠60只,雄性,1113周齡,體重180220 g,SPF級,均購自西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心,合格證號:SCXK陜2022-0011,室溫條件下適養(yǎng)1周。按隨機數(shù)字表法將其分為正常組、模型組、腧穴配伍組、常規(guī)配穴組,每組各15只。本研究經動物倫理委員會審批通過。1.2 儀器與試劑主要儀器:BIOBASE TD-6M離心機山東博科生物產業(yè);日立全自動生化分析儀7600羅氏;BL-420F生物功能實驗裝置泰盟科技;華佗牌Hans電針儀深圳市百合醫(yī)療器械;華佗牌毫針蘇州醫(yī)療用品廠,0.25 mm15 mm。主要試劑:鹽酸異丙腎上腺素美國Sigma,批號:202221;肌鈣蛋白TcTnT
15、試劑盒美國Sigma,批號:202205;超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px、丙二醛MDA試劑盒南京建成,批號:A001、A003、A005。1.3 模型制作取鹽酸異丙腎上腺素100 mg溶于100 mL 0.9%氧化鈉溶液中,以5 mL/kg皮下注射大鼠背部來制作動物心肌缺血損傷模型,1次/d,連續(xù)1周。以心電圖S-T段變異幅度0.1 mV為評價模型成功的標準。1.4 方法正常組:于正常大鼠背部皮下注射0.9%氯化鈉溶液5 mL/kg,1次/d,連續(xù)1周;模型組:制作心肌缺血動物模型;腧穴配伍組:制作心肌缺血動物模型,取造模成功的大鼠,電針其雙內關穴、雙足三里穴及關元穴,每
16、天各1次,后進展一樣于正常組的皮下注射,連續(xù)2周;常規(guī)配穴組:制作心肌缺血動物模型,每天電針雙“內關、雙“神門及“膻中各1次,后進展一樣于正常組的皮下注射,連續(xù)2周。1.5 取穴及電針方法參照?小動物針灸技法手冊?9及?大鼠穴位圖譜的研制?10取穴。內關穴:大鼠前肢橈骨內側,與尺骨接合部下方1/3處,即離腕關節(jié)3 mm左右的尺橈骨縫間,腕橫紋上34 mm,針刺深度直刺23 mm,用毫針直刺穿皮達筋間,捻轉60 s;足三里穴:在膝關節(jié)下的外側,腓骨頭下約5 mm,直刺35 mm即可;關元穴:取大鼠臍下正中25 mm,即臍與恥骨結合上緣中點連線的上3/5與下2/5的交界處,呈45角向劍突方向斜刺3
17、 mm;神門穴:前肢腕橫紋側,直刺約2 mm;膻中穴:動物兩乳連線中間點位置,即前胸正中部,呈約15角斜刺2 mm11-15。腧穴配伍組和常規(guī)配穴組分別取穴,毫針針刺后接電針儀。其中腧穴配伍組同側內關穴和足三里穴配為一組電極;淺刺腹部關元穴附近處皮膚,作為輔助電極,與關元穴配為一組電極。常規(guī)配穴組同側內關穴和神門穴配為一組電極;淺刺胸部膻中穴附近皮淺薄刺,作為輔助電極,與膻中穴配為一組電極。連續(xù)波,頻率80次/min,強度1 mA,通電15 min,以大鼠肢體和胸腹部有明顯震顫為度,1次/d,連續(xù)3周。1.6 觀察指標各組大鼠心電圖的變化情況:詳細操作:干預后第2天,10%水合氯醛0.35 m
18、L/100 g進展大鼠麻醉,仰臥位固定于操作臺,用針狀電極刺入動物肢體皮下,參考人體標準導聯(lián)連接的方法,將左下肢接正極,右上肢接?極,行泰盟BL-420F生物功能實驗系統(tǒng)檢測所有大鼠的心率HR及S-T段電壓的改變情況。心肌SOD、GSH-Px和MDA檢測:左心室其余心肌組織剪碎液氮冷凍,每組各取心肌組織0.2 g溶于9倍體積的0.9%氯化鈉溶液中研磨;研磨液離心,30004000 r/min,10 min,取上清液;心肌組織總SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量的檢測按照酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA法以試劑盒說明書進展操作。1.7 統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0對所得數(shù)據(jù)進展統(tǒng)計分析。計量
19、資料以均數(shù)標準差xs表示,多組間比擬采用方差分析,組間兩兩比擬采用LDS-t檢驗。以P 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2 結果在實驗過程中,除模型組死亡1只外,余下各組均無動物死亡。2.1 各組HR和心電圖S-T段振幅結果比擬與正常組比擬,模型組HR加快明顯,S-T段振幅抬高顯著P 0.01;電針干預后,腧穴配伍組及常規(guī)配穴組HR有所減慢,S-T段振幅抬高降低,與模型組比擬,差異有統(tǒng)計學意義P 0.05。見表1。2.2 各組大鼠心肌總SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量測定結果比擬 與正常組比擬,模型組大鼠心肌SOD活性、GSH-Px活性顯著降低,MDA含量顯著升高P 0.01;電針干預后,
20、腧穴配伍組及常規(guī)配穴組大鼠心肌SOD活性、GSH-Px活性升高,MDA含量降低,與模型組比擬,差異有統(tǒng)計學意義P 0.05;與常規(guī)配穴組比擬,腧穴配伍組心肌SOD活性、GSH-Px活性升高,MDA含量降低,差異有統(tǒng)計學意義P 0.05。見表2。3 討論心肌缺血一旦發(fā)生,會嚴重影響到心室復極正常化進展,缺血區(qū)相關導聯(lián)的S-T段會出現(xiàn)明顯的異常16,本結果中模型組大鼠的心電圖導聯(lián)S-T段變異幅度達0.18 mV,提示心肌出現(xiàn)缺血損傷,造模成功。心肌缺血在中?t辨證醫(yī)學中屬“心痛“胸痹,多為臟腑氣血缺乏、心脈失養(yǎng)、閉塞不暢所致。其病位在心,病性為標實本虛。標實者,多為勞逸失度、膏粱厚味、七情內傷,致
21、氣血所瘀不通后致痛;本虛者,多因久病體衰、稟賦有缺、營血虛少,使得心之氣血缺乏17-18。本研究以中醫(yī)傳統(tǒng)的“治未病理論作為根據(jù),采用“標本配穴,即選用固護正氣的關元穴、足三里穴為本,以祛除邪氣的內關穴為標。MDA是機體內氧自由基作用于脂質過氧化代謝的最終產物,其含量能反映細胞氧化損傷的程度19-20。SOD和GSH-Px是一類抗自由基損傷的活性酶,前者能反映機體去除氧自由基的才能,后者能保護細胞膜穩(wěn)定性,減輕線粒體膜脂質過氧化程度和心肌線粒體不可逆損傷21。本研究提示心肌細胞受到氧自由基的過度攻擊,細胞脂質過氧化程度較高,氧化損傷較為嚴重,與模型組電鏡顯示線粒體損傷的結果一致,再次從微觀角度
22、證實心肌缺血模型制作成功。不同腧穴配伍間的差異一直是根底針灸學研究的重點,合理的腧穴配伍能進步針灸療效。標本配穴法是根據(jù)中醫(yī)“治未病理論提出的腧穴配伍理論?!氨炯凑龤庵荆皹思床⌒爸畼?,“本穴與“標穴配伍旨在扶正祛邪。本研究中所選的關元穴是元陰、元陽關藏出入之所,有補元氣、益腎精、扶人體之成效;足三里為胃經合穴和胃腑下合穴,發(fā)揮調理脾胃,補益氣生化血之成效。本研究中的兩穴相配,可調脾補腎、補益正氣。內關穴為八脈交會穴之一,發(fā)揮寧心定智、理氣寬胸之效。本研究中,注射鹽酸異丙腎上腺素之后,模型組大鼠心肌組織受損傷嚴重,這與心臟超聲及心肌病理檢測一致,且腧穴配伍可顯著升高心肌缺血大鼠心肌SOD活性
23、、GSH-Px活性,降低MDA含量,提示腧穴配伍針刺法具有較好的保護心肌缺血的效果,電針標本配穴可有效減輕心肌細胞變性及心肌組織的損傷,其機制可能是針灸通過調控氧自由基作用來改善心肌缺血,這為臨床運用針灸治療心肌缺血性疾病提供理論根底和科學根據(jù)。參考文獻1 Wei N,Chi M,Deng L,et al. Antioxidation Role of Different Lateral Stellate Ganglion Block in Isoproterenol-Induced Acute Myocardial Ischemia in Rats J. Reg Anesth Pain Med
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