1、2015 年黑龍江省高職院?！笆称奉?lèi)專(zhuān)業(yè)”（國(guó)標(biāo)法檢測(cè)食品中大腸菌群） 學(xué)生技能大賽賽項(xiàng)規(guī)程二0一五年九月一、賽項(xiàng)名稱(chēng)2015 年黑龍江省高職院?！笆称奉?lèi)專(zhuān)業(yè)” （國(guó)標(biāo)法檢測(cè)食品中大腸菌群）學(xué)生技能大賽。二、參賽對(duì)象與比賽方式（一）參賽對(duì)象參賽選手為黑龍江省高職院校食品類(lèi)專(zhuān)業(yè)的在校學(xué)生 （三二連讀與五年制高職應(yīng)為 4-5 年級(jí)學(xué)生） ， 年齡 25 周歲以下 （1990年 10 月 7 日后出生 ） ； 往屆省級(jí)以上 （ 含省級(jí) ） 本賽項(xiàng)獲三等獎(jiǎng)以上（含三等獎(jiǎng)）的選手不能參加本次比賽。指導(dǎo)教師須是同校在職專(zhuān)任教師。（二）比賽方式本次競(jìng)賽中每個(gè)參賽隊(duì)由 1 名參賽選手組成， 每名選手獨(dú)立完成現(xiàn)

2、場(chǎng)操作比賽，每所學(xué)?？蓤?bào)1-2 個(gè)參賽隊(duì)，每名選手限1名指導(dǎo)教師， 1 名教師可同時(shí)指導(dǎo) 2 名選手。選手與指導(dǎo)教師的對(duì)應(yīng)關(guān)系一旦確定，不得隨意更改。三、比賽時(shí)間與比賽地點(diǎn)（一）比賽時(shí)間2015 年 10 月 17 日。（二）比賽地點(diǎn)黑龍江職業(yè)學(xué)院第二校區(qū) （ 黑龍江省哈爾濱市雙城區(qū)迎賓路162 號(hào)） 。四、競(jìng)賽內(nèi)容與說(shuō)明1、競(jìng)賽內(nèi)容根據(jù)食品微生物檢測(cè)的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目和社會(huì)關(guān)注熱點(diǎn)， 選擇具有代表性的檢測(cè)項(xiàng)目 “國(guó)標(biāo)法檢測(cè)食品中大腸菌群” 作為操作考核內(nèi)容，在國(guó)標(biāo)中有兩種法一大腸菌群MPN+數(shù)法和大腸菌群平板計(jì)數(shù)法， 根據(jù)本次大賽的指導(dǎo)思想和競(jìng)賽原則， 同時(shí)考慮到競(jìng)賽項(xiàng)目的可操作性，本次大賽選擇

3、“大腸菌群MPN+數(shù)法”作為競(jìng)賽項(xiàng)目。檢驗(yàn)程序及操作技術(shù)依照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù) （ GB4789.3-2010 ）進(jìn)行考核評(píng)判。本項(xiàng)目主要考察學(xué)生在食品微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)施過(guò)程中所涉及的樣品稀釋液的制備、樣品的接種、無(wú)菌操作、發(fā)酵結(jié)果的判斷及數(shù)據(jù)處理等環(huán)節(jié)的基本操作技能， 以及在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的操作文明和操作安全意識(shí)。競(jìng)賽內(nèi)容具體分為兩個(gè)環(huán)節(jié)， 第一環(huán)節(jié)為初發(fā)酵試驗(yàn)， 主要包括采樣、 制備樣品稀釋液、 樣液接種； 第二環(huán)節(jié)為復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，包括初發(fā)酵結(jié)果觀察判斷、轉(zhuǎn)接種、復(fù)發(fā)酵結(jié)果觀察、出具檢驗(yàn)報(bào)告。2、競(jìng)賽說(shuō)明本賽項(xiàng)由一名選手獨(dú)立完成整個(gè)操作過(guò)程， 并要求參賽選手在0.5

4、 個(gè)小時(shí)內(nèi)完成初發(fā)酵試驗(yàn)（15 分種 ）和復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)（15 分鐘 ）的各步操作內(nèi)容，如超時(shí)，將按超出時(shí)間的長(zhǎng)短酌情扣分。另外參賽選手還應(yīng)明確一點(diǎn)， 競(jìng)賽過(guò)程中用到的初發(fā)酵管、 初發(fā)酵結(jié)果、復(fù)發(fā)酯管、復(fù)發(fā)酯結(jié)果及MPN僉索表均由工作人員事先準(zhǔn)備好， 參賽選手只要按照競(jìng)賽內(nèi)容里規(guī)定項(xiàng)目依據(jù)國(guó)標(biāo)要求完成各步操作。五、評(píng)分辦法和評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)1、評(píng)分辦法本項(xiàng)競(jìng)賽評(píng)分嚴(yán)格按照公平、公正、公開(kāi)的原則。競(jìng)賽成績(jī)按照百分制計(jì)分。競(jìng)賽成績(jī)的評(píng)定完全依照賽前制定的技術(shù)文件中的主要考核內(nèi)容及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)， 根據(jù)選手實(shí)際操作表現(xiàn)， 由現(xiàn)場(chǎng)裁判組進(jìn)行客觀評(píng)判、 計(jì)分。 有關(guān)現(xiàn)場(chǎng)操作考核內(nèi)容及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)另見(jiàn)文件中相關(guān)標(biāo)題。在競(jìng)賽過(guò)程

5、中， 參賽選手如有不服從裁判判決、 擾亂賽場(chǎng)秩序、舞弊等不文明行為，由裁判長(zhǎng)按照規(guī)定扣減相應(yīng)分?jǐn)?shù)，情節(jié)嚴(yán)重的取消競(jìng)賽資格，競(jìng)賽成績(jī)記 0 分。2、對(duì)考評(píng)員的要求（ 1）不得少于3 人。（ 2）提前15min 到達(dá)考核現(xiàn)場(chǎng)，熟悉考核規(guī)則、評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。（ 3）按評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立評(píng)分。不得涂改考核記錄表。3、評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)表1主要考核內(nèi)容及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目考核內(nèi)容分值評(píng)分細(xì)則扣分主要扣分點(diǎn)記 錄得 分樣品 的稀 釋?zhuān)?5 分）稱(chēng)取25 g樣品，放入盛有 225 mL生理鹽水的尤由均 質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器 拍打1 min2 min ,制成 1:10的樣品勻液。樣品勻 液的pH值應(yīng)在6.57.5 之間，必要時(shí)分別用1

6、mol/L NaOH 或 1 mol/L HCl調(diào)節(jié)。5稱(chēng)量（稱(chēng)取方法、無(wú) 菌操作）5拍擊式均質(zhì)器的使 用（方法、操作熟練 程度）5進(jìn)彳T pH值測(cè)試用1 mL無(wú)菌吸管吸取1:10 樣品勻液1 mL沿管壁緩緩 注入9 mL生理鹽水的尢菌 試管中，振搖t管或換用1支1 mL尢菌吸管反復(fù)吹 打，使其混合均勻，制成 1:100的樣品勻液。根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估 計(jì)，按上述操作，依次制成 十倍遞增系列稀釋樣品勻 液。5吸管使用（打開(kāi)方式、取液、倜節(jié)液向、放1夜）5稀釋樣品（順序、混勻、 換管）4試管操作（開(kāi)塞、管口 火菌、持法、蓋塞）2酒精燈無(wú)菌區(qū)操作4操作熟練程度初發(fā)酵 試驗(yàn)（15 分）每個(gè)樣品，選

7、才i 3個(gè)適宜的 連續(xù)稀釋度的樣品勻液，每 個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫 酸鹽胰蛋白月東（LST）肉湯， 每管接種1mL53個(gè)稀釋度的選擇5接種（發(fā)酵管的數(shù)量、 接種量）5從制備樣品勻液至樣 品接種完畢，全過(guò)程不 超過(guò)15 min36 C 1 C 24 h2 h, 觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn) 生，24 h 2 h產(chǎn)氣者進(jìn)行 復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，如未產(chǎn)氣則繼 續(xù)培養(yǎng)至48 h 2 h ,產(chǎn)氣 者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣 者為大腸菌群陰性。0根據(jù)已準(zhǔn)備好的初發(fā) 酵管樣品判定結(jié)果，記 錄在報(bào)告單上，此處在 原始記錄及報(bào)告處進(jìn) 行評(píng)分復(fù)發(fā)酵 試驗(yàn)（20分）用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯 管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移 種于煌綠乳

8、糖膽鹽肉湯（BGLB管中10接種環(huán)的使用（持法、 灼燒火菌、冷卻、取培 養(yǎng)物、灼燒多余培養(yǎng) 物）5產(chǎn)氣管的選擇5酒精燈無(wú)菌區(qū)操作36 C 1 C 48 h2 h, 觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者，計(jì) 為大腸菌群陽(yáng)性管。0根據(jù)已準(zhǔn)備好的復(fù)發(fā) 酵管樣品判定結(jié)果，記 錄在報(bào)告單上，此處在 原始記錄及報(bào)告處進(jìn) 行評(píng)分大腸菌 群最可 能數(shù)（MPN 的報(bào)告按復(fù)發(fā)酵確證的大腸菌群 LST陽(yáng)性管數(shù),檢索MPNa, 報(bào)告每g （mL）樣品中大腸 菌群的MPN直。0結(jié)果記錄在報(bào)告單上， 此處在原始記錄及報(bào) 告處進(jìn)行評(píng)分文明操作（10 分）實(shí)驗(yàn)后臺(tái)面整理干凈、物品 歸位、器皿無(wú)破損5物品的整理歸位5器皿的破損情況原始 記錄及

9、報(bào)告 （20 分）觀察現(xiàn)象與記錄一致、清 楚、無(wú)涂改10觀察現(xiàn)象的記錄征得評(píng)委同意，每改1次扣0.5分報(bào)告結(jié)果規(guī)范、正確、無(wú)涂 改10結(jié)果的報(bào)告每改1次，扣1分完成 時(shí)間 （30min）共用（）分鐘開(kāi)始：結(jié)束：0提前，不加分不扣分 按時(shí)，不加分不扣分 超時(shí)：每超1分鐘，扣 1分（最多扣10分）合計(jì)日日月月評(píng)審專(zhuān)家簽字: 核分人簽字：六、黨賽規(guī)則1、選手參加考試競(jìng)賽順序?qū)⑼ㄟ^(guò)抽簽決定。2、參賽選手進(jìn)入賽場(chǎng)，不允許攜帶任何書(shū)籍和其他紙質(zhì)資 料（相關(guān)技術(shù)資料由組委會(huì)提供），不允許攜帶通訊工具和存儲(chǔ) 設(shè)備?，F(xiàn)場(chǎng)操作考核項(xiàng)目的操作規(guī)程、數(shù)據(jù)記錄紙、簽字筆等將 由組委會(huì)統(tǒng)一提供，現(xiàn)場(chǎng)提供的物品各參賽選手可

10、以根據(jù)競(jìng)賽需 要自行選擇使用。3、參賽選手必須在正式比賽前 15分鐘到賽場(chǎng)候考室報(bào)到,報(bào)到時(shí)應(yīng)持本人學(xué)生證、身份證，并攜帶（佩戴）大賽組委會(huì)簽發(fā)的參賽證、胸牌。只有等比賽正式開(kāi)始后，方可進(jìn)行操作。4、比賽期間，參賽選手必須嚴(yán)格遵守賽場(chǎng)紀(jì)律，不得在賽場(chǎng)內(nèi)大聲喧嘩，不得作弊或弄虛作假；同時(shí)，必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，確保設(shè)備和人身安全，并接受裁判員的監(jiān)督和警示。若因選手因素造成設(shè)備故障或損壞， 無(wú)法進(jìn)行比賽， 裁判長(zhǎng)有權(quán)終止該隊(duì)比賽； 若因非選手個(gè)人因素造成設(shè)備故障的， 由裁判長(zhǎng)視具體情況做出裁決。5、在競(jìng)賽規(guī)定時(shí)間結(jié)束時(shí)各參賽選手應(yīng)立即停止操作，不得以任何理由拖延競(jìng)賽時(shí)間。 參賽選手欲提前結(jié)束比賽，

11、 應(yīng)向現(xiàn)場(chǎng)裁判員舉手示意并記錄比賽終止時(shí)間， 比賽終止后， 不得再進(jìn)行任何與比賽有關(guān)的操作。6、競(jìng)賽操作結(jié)束時(shí)，各參賽選手要按照大賽要求提交競(jìng)賽材料，按照現(xiàn)場(chǎng)考試要求的名字進(jìn)行命名，如不符合命名規(guī)則，體現(xiàn)單位信息與編號(hào)信息的，該隊(duì)競(jìng)賽成績(jī)將被取消。七、競(jìng)賽技術(shù)規(guī)范（一）競(jìng)賽項(xiàng)目行業(yè)、職業(yè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)競(jìng)賽項(xiàng)目的命題結(jié)合食品微生物檢測(cè)職業(yè)崗位的技能需求，并參照 GB 4789.3-2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)制定。（二）賽場(chǎng)場(chǎng)地和環(huán)境1、本次競(jìng)賽在指定比賽賽場(chǎng)進(jìn)行，操作比賽地點(diǎn)為黑龍江職業(yè)學(xué)院食品藥品學(xué)院實(shí)訓(xùn)室，比賽區(qū)環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)要求照明、 控溫良好，能提供穩(wěn)定的水、電。2、競(jìng)賽

12、所需試劑以及部分溶液，由組委會(huì)事先準(zhǔn)備好，弁 標(biāo)示清楚，整齊放路在每位選手的比賽用品中，其余所用試劑、 設(shè)備等（表2、3）,也按照要求，事先放路在比賽區(qū)域內(nèi)，供選 手取用。表2競(jìng)賽項(xiàng)目所用主要設(shè)備、儀器、材料序號(hào)名稱(chēng)規(guī)格備注1拍擊式均質(zhì)器JX-05選手共用2電子天平選手共用3超凈工作臺(tái)選手共用4接種環(huán)每人1個(gè)5酒精燈每人1個(gè)6無(wú)菌吸管1mL每人4個(gè)7無(wú)菌試管18X 180mm每人3個(gè)8初發(fā)酵管18X 180mm每人1套9復(fù)發(fā)酵管18X 180mm4套共用10無(wú)菌均質(zhì)袋每人1個(gè)1175%酉精棉球每人1瓶12pH試紙精密每人1本13吸水球?qū)Ｓ闷筋^小吸水球每人1個(gè)14火柴每人1盒15記號(hào)筆每人1支1

13、6嘉士利早餐餅干袋裝、無(wú)夾心每人1袋17玻璃棒每人1個(gè)表3競(jìng)賽項(xiàng)目所用主要試劑、培養(yǎng)基清單序號(hào)名稱(chēng)數(shù)量備注1月桂基硫酸鹽胰蛋白月東肉湯9 mLX 9每人一套2煌綠乳糖膽鹽肉湯10 mLX 9每人一套3尤由生埋鹽水含225mL的錐形瓶4尢菌 1 mol/L NaOH50mL5尢菌 1 mol/L HCl50ml九、獎(jiǎng)勵(lì)辦法競(jìng)賽只設(shè)單項(xiàng)獎(jiǎng)，將評(píng)出一、二、三等獎(jiǎng)和優(yōu)秀獎(jiǎng)，獲獎(jiǎng)比 例分別為參賽人數(shù)的10% 20% 30%其余為優(yōu)秀獎(jiǎng)。獲獎(jiǎng)選手 和獲省內(nèi)三等以上（含三等）獎(jiǎng)項(xiàng)學(xué)生的指導(dǎo)教師，由省教育廳 頒發(fā)相應(yīng)證書(shū)。十、申訴與仲裁（一）申訴1、參賽隊(duì)對(duì)不符合競(jìng)賽規(guī)定的設(shè)備、工具等材料，有失公正的評(píng)判、獎(jiǎng)勵(lì)以及對(duì)工作人員的違規(guī)行為等， 均可以提出申訴。2、中訴應(yīng)在比賽結(jié)束后 1小時(shí)內(nèi)提出，超過(guò)時(shí)效將不予受 理。申訴時(shí)，應(yīng)按照規(guī)定的程序由參賽隊(duì)領(lǐng)隊(duì)向大賽組委會(huì)遞交 書(shū)面申訴報(bào)告。報(bào)告中應(yīng)對(duì)申訴事件的現(xiàn)象、發(fā)生的時(shí)間、涉及 到的人員、申訴依據(jù)與理由等進(jìn)行充分的、實(shí)事求是的敘述。事 實(shí)依據(jù)不充分、僅憑主觀臆斷的申訴不予受理。 申訴報(bào)告須有中 訴的參賽選手、指導(dǎo)教師和領(lǐng)隊(duì)的簽名。3、大賽組委會(huì)在收到申訴報(bào)告后，應(yīng)在3小時(shí)內(nèi)做出是否受理申訴的答復(fù)并受理申訴。4、參賽隊(duì)不得采取過(guò)激行為攻擊工作人員，否