1、1 .2.2連接液相1 .2.2連接液相1.0目的為了指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)分析員在實(shí)驗(yàn)工作中正確使用WatersAcquityUPLC超高效液相色譜儀，特制定本規(guī)程。2.0范圍適用于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)工作中對WatersAcquityUPLC超高效液相色譜儀的操作。3.0職責(zé)實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)工作中使用WatersAcquityUPLC超高效液相色譜儀時應(yīng)遵循本規(guī)程。部門負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)審核本規(guī)程并保證其實(shí)施。QC部門負(fù)責(zé)日常運(yùn)行的監(jiān)管。4.0操作規(guī)程4.1試劑準(zhǔn)備使用色譜純試劑配制的流動相和清洗液.強(qiáng)洗針液用較高比例的甲醇或乙腈的水溶液（如80/20）,弱洗針液用純水或含少量甲醇或乙腈的水溶液（如10/90）,清

2、洗柱塞密封墊SealWash）溶液應(yīng)使用純水或5%10%甲醇溶液。4.2液相開機(jī)先打開UPLC所有模塊電源（最后打開SO（SampleOrganizer）電源），打開Analystsoftware,點(diǎn)擊液相控制界面，圖1。ACQUITYConsole進(jìn)入自動啟動液相：點(diǎn)擊system,點(diǎn)擊control,選擇startupsystem,彈出圖2控制界面，PrimeSolvents中選擇需要進(jìn)行SM(SampleManger)和BSMBinarySolventManager)的相關(guān)項(xiàng)目。依次在Opitonal和EquilibratetoMethod中按實(shí)驗(yàn)start，儀器自動進(jìn)行清洗等準(zhǔn)備工作。

3、如果BSM,SM,SO等顯示control,reset相關(guān)部分。圖2連接液相各個部分(如果BSM,SM,SO等顯示紅色字體,說明儀器和軟件連接失敗,control,reset）。選擇BSM，點(diǎn)擊control，選擇Primesealwash，進(jìn)彳丁柱塞桿的PrimeA/BSolvents,選擇A1（或A2）、B1（或B2）進(jìn)行溶劑脫氣操作，時間設(shè)定5min，Prime時流速已設(shè)選擇BSM,點(diǎn)擊control，Washneedle清洗注射器和進(jìn)樣針，見圖4。在次數(shù)（進(jìn)行分別選擇Primesyringes，Numberofcycles中輸入要灌注的5次左右的灌注），點(diǎn)擊OK。圖44.2.3配置SO

4、:在SM中選擇Configure，選擇SampleOrganizer,在彈出的窗口選擇SO，見圖5。在Platesetup中可以設(shè)置SO中的樣品盤類型，見圖6。5在so中選擇圖6Configure,選擇Scanandstoreshelflayou,tSO進(jìn)行樣品盤掃描，自動識別樣品盤類型，如果識別錯誤，繼續(xù)執(zhí)行該步驟。勾選Disableshelfcheck可以禁止SO進(jìn)行 再次掃描，在樣品盤類型識別并設(shè)定無誤情況下使用，見圖中設(shè)定SO的內(nèi)部溫度。7。在圖7右側(cè)的temperature圖74.2.4色譜柱信息，見圖8，在此設(shè)置4.3定量環(huán)的更換 選擇所需更換的定量環(huán)，在SM右側(cè)的六通閥上更換。然

5、后在SM中選擇Maintain中選擇Replace,點(diǎn)擊Samplesyringe,點(diǎn)擊OK,見圖9。此時注射器柱塞桿下降到指定位置，擰下固定螺絲，取下注射器。安裝新的注射器，點(diǎn)擊reset。在Configure中選擇VolumeConfigure設(shè)置新更換的定量環(huán)和注射器體積,見圖10。然后選擇Primesyringes,進(jìn)行注射器灌注,直到注射器中沒有氣泡存在。再次選擇Maintain中選擇Leaktest，點(diǎn)擊Samplesyringe，點(diǎn)擊OK，進(jìn)行檢漏測試。測試通過,定量環(huán)及注射器更換完成（waters的不同體積定量環(huán)對應(yīng)特定體積的注射器，不能混用）。更換新的定量環(huán)需要進(jìn)行體積校準(zhǔn)，

6、在Maintain中選擇Characterize，點(diǎn)擊CharacterizeNeedleandLoopVolume，點(diǎn)擊sstart，見圖11。如果測試失敗，檢查loop和sypinge是否漏液，再次執(zhí)行灌注loop和sypinge，然后重新進(jìn)行體積測試。測試pass，定量環(huán)更換完成。leFZj0IIItrTATInjectnanairw#Countavrwii“T*lfIt*.I Prtmiisuwedksolvent104.4液相報錯信息，點(diǎn)擊Logs，顯示相關(guān)報錯信息，12。見圖Sc.lw.丄*PUM-rivIJIf|fdt圖124.5方法編輯器中需要注意的設(shè)置在Analystsoft

7、ware中點(diǎn)擊ACQUITYMethodEditor，進(jìn)入方法設(shè)置界面。在ACQ-SM中設(shè)置強(qiáng)洗和弱洗的體積，在TempertureControl中設(shè)置柱溫和樣品室的溫度，在AlamBand中設(shè)置允許范圍（如果不在此設(shè)置，而在Console中設(shè)置實(shí)驗(yàn)所需溫度，可能會導(dǎo)致儀器運(yùn)行時柱溫箱和樣品室控溫關(guān)閉，樣品實(shí)際在室溫下運(yùn)行），見圖13。1513點(diǎn)擊右下角的Advanced，可以打開進(jìn)樣模式，選擇Moreinfo可以查看不同體積定量環(huán)在不同進(jìn)樣模式下準(zhǔn)確的進(jìn)樣體積范圍，滿環(huán)進(jìn)樣時需要填充定量環(huán)的體積等信息，見圖14。圖14在ACQ-BSM中設(shè)置壓力范圍。SealWash的時間為樣品運(yùn)行期間多長時

8、間清洗一次4.6液相關(guān)機(jī)先用乙腈/水或者甲醇/水沖洗系統(tǒng)20min左右，再用純的有機(jī)試劑沖洗系統(tǒng)10min,緩慢降低流速至零，用甲醇水執(zhí)行Primesealwash,清洗柱塞桿。然后關(guān)閉SM,BSM,SO的電源開關(guān)。4.7注意事項(xiàng)在啟動液相時先打開SM電源，再打開SO電源，然后resetSM，resetSO。如果連接失敗，重新啟動SM和SO，再次rese。如果還是出現(xiàn)連接錯誤，則完全關(guān)閉電腦，關(guān)閉液相系t統(tǒng)，再重新啟動電腦，液相系統(tǒng)按之前步驟進(jìn)行連接。5.0專有名詞及定義SM：SamplemanagerSO：SampleOrganizerBSM：BinarySolventManagerSamplesyringe：樣品注