1、第四章土壤氮的分析第1頁，共77頁。第四章 土壤氮的分析 第一節(jié) 土壤全氮的分析要點：1、了解土壤中氮素的存在形態(tài)及含量。2、掌握開氏法測定土壤全氮的原理。3、熟悉開氏法測定全氮的步驟。4、掌握蒸餾法測定氨的原理及條件。第2頁，共77頁。一、概述1、氮對植物生長發(fā)育的意義 氮是植物營養(yǎng)中最重要的元素之一，是植物體內(nèi)許多重要有機化合物的組分，也是遺傳物質(zhì)的基礎(chǔ)。蛋白質(zhì)的組分核酸和核蛋白的組分葉綠素的組分酶的組分維生素的組分生物堿的組分植物激素的組分第3頁，共77頁。第4頁，共77頁。2. 土壤氮的含量黑鈣土栗鈣土灰鈣土土類含氮量g.kg-10.4-1.052.56-6.95西東暗棕壤土類含氮量g

2、.kg-11.68-3.64北棕 壤0.9-3.05南0.6-1.48褐 土黃棕壤紅 壤磚紅壤第5頁，共77頁。3. 土壤氮的形態(tài)有機態(tài)，占全氮的95 半分解的有機質(zhì) 微生物軀體 腐殖質(zhì) 有機氮每年大約有13釋放出來供植物吸收。無機態(tài)，占全氮的5 銨態(tài)氮 硝態(tài)氮 亞硝態(tài)氮固定態(tài)氮：占全氮的3-8，主要是銨離子第6頁，共77頁。二、土壤全氮的測定方法方法類型： 干燒法 濕燒法第7頁，共77頁。（一）干燒法1931年，瑞典人杜馬（Dumas）創(chuàng)立的干燒法基本原理：樣品在CO2氣流中燃燒（600C），以CuCuO作催化劑，使所有的N都轉(zhuǎn)變成N2，氣流通過堿液（濃KOH、NaOH）除去CO2后，測定N

3、2的體積，計算樣品全N含量。方法特點： 經(jīng)典方法 結(jié)果準確，回收率高， 儀器裝置及操作復(fù)雜、費時， 在土壤N素分析中很少采用。第8頁，共77頁。干燒法近年來由于儀器分析技術(shù)的進步，此方法在一些新開發(fā)的儀器分析氮中應(yīng)用較多，例如：1、用注射管測量微量的N2體積(微升計),如氮自動分析儀，土壤稱樣量最多為0.2克，燃燒溫度為950-1050，測N2體積，可測準樣品中0.05% N。2、用熱導(dǎo)池測量N2和CO2的導(dǎo)熱系數(shù)，如日本C/N自動分析儀，一般多用于植物，農(nóng)藥的分析，不適于含N低的土壤樣品。第9頁，共77頁。（二）濕燒法開氏法1883年，丹麥人開道爾（J.Kjeldahl）創(chuàng)立。 方法特點：設(shè)

4、備簡單易得，結(jié)果可靠，目前大多實驗室采用該方法。第10頁，共77頁。三、土壤全氮的測定半微量開氏法（一）方法原理（二）操作步驟及注意事項1、樣品預(yù)處理樣品消煮2、消煮液中銨的測定第11頁，共77頁。三、土壤全氮的測定半微量開氏法（一）方法原理： 含N有機物在催化劑作用下，與濃H2SO4高溫共煮，使有機N轉(zhuǎn)化成NH4-N（(NH4)2SO4），然后在堿性溶液中蒸餾出NH3，用H3BO3吸收，再用標準酸溶液直接滴定H3BO3吸收的NH3，根據(jù)酸的用量來計算N含量。第12頁，共77頁。三、土壤全氮的測定半微量開氏法（二）樣品的消煮1、消煮過程的化學反應(yīng)： 在開氏反應(yīng)中，有機C被濃H2SO4氧化成CO

5、2而逸失，即： C + 2 H2SO4（濃）= CO2 + SO2 + 2 H2O對N而言： 有機N + H2SO4（濃） NH4+第13頁，共77頁。2、消煮加速劑 濃H2SO4是中強氧化劑，單靠它不能很快完成各類含N有機物的開氏反應(yīng)，因此需要加入加速劑，以縮短消煮時間。加速劑按照其效用可分為： 增溫劑 催化劑 氧化劑第14頁，共77頁。2、消煮加速劑（1）增溫劑：K2SO4或無水Na2SO4 提高消煮溶液的沸點，加速高溫分解過程。 消煮溫度要求控制在360-410C，一般用加鹽量的多少來控制消煮液溫度的高低，按每毫升濃H2SO4中含0.3-0.8g鹽。第15頁，共77頁。2、消煮加速劑（2

6、）催化劑：Hg、HgO、CuSO4、Se等。 其中以Hg、Se催化效率較高，而Cu次之，但使用安全，不易引起N素損失。 現(xiàn)多采用Cu-Se混合使用。第16頁，共77頁。Hg 1、Hg的催化效率雖高，但有毒， 2、而且Hg在測定過程中與NH4+生成配合物，在以后加堿蒸餾時也不能釋放出來，使測值偏低。HgO + (NH4)2SO4 Hg SO4 + H2ONH3NH3第17頁，共77頁。Se1、催化效率高，有毒，2、用量過多，溫度過高或時間過長，均易導(dǎo)致N素損失。 4NH4+ + 3SeO32- + 2H+ = 2N2 + 3Se + 9H2O3、如果用量不多或與Cu按比例混合使用，可達到較好效果

7、。 Se能使有機C很快氧化成CO2，但不能加速有機NNH4-N，雖然能使消煮液很快變清亮，但有機N并未轉(zhuǎn)化完全，所以后煮時間較長。 催化過程： Se + 2 H2SO4 H2SeO3 + 2 SO2 + H2O H2SeO3 SeO2 + H2O SeO2 + C Se + CO2第18頁，共77頁。CuSO41、催化效率不如Hg、Se，但毒性小，使用安全，2、不易引起N素損失。催化過程為：4CuSO4+3C+2H2SO42Cu2SO4+4SO2+3CO2+2H2OCu2SO4+2H2SO42CuSO4+SO2+2H2O第19頁，共77頁。目前最常用的加速劑現(xiàn)在普遍采用Cu-Se與鹽按比例配成

8、的加速劑，它既起到縮短消煮時間，又能防止N素損失的作用。加速劑的比例為：K2SO4(或無水Na2SO4)：CuSO45H2O ：Se粉的重量比為 100 ：10 ：1按比例混合，研細后使用。第20頁，共77頁。（3）氧化劑有HClO4、KMnO4、K2Cr2O7、H2O2等，其中以HClO4較好，但氧還電位太高，作用很激烈，加入量稍多，極易使N素損失，使結(jié)果偏低。K2Cr2O7、KMnO4在消煮時易暴濺，控制不好也易引起N素損失。H2O2較安全，但也要控制量(作植株分析用)。 總之，使用上述氧化劑都必須特別小心。第21頁，共77頁。氮磷聯(lián)合測定 在H2SO4-HClO4消煮中，如果對測定的要求

9、不太高時，可在同一試液中測N、P，但要求精度高時不宜作N、P聯(lián)合測定。因為二者矛盾在于：為了完全回收P，HClO4用量應(yīng)多些；而為了完全回收N，則要求HClO4用量少些，所以聯(lián)合測定時只好折中處理，使回收率達到95%即可。第22頁，共77頁。N、P、K聯(lián)合測定 在H2SO4-HClO4消煮，N、P、K聯(lián)測中，土壤K只是近似于全K，因許多粘土礦物硅酸鹽晶格上的K在開氏消煮中不會被釋放出來，而P容易釋放， 植物中K本來成離子態(tài)，所以，植物中的K可以完全被轉(zhuǎn)到溶液中。第23頁，共77頁。3、 H2SO4用量： 加入濃H2SO4的量要考慮土壤有機質(zhì)類型、含量以及加鹽量的多少等因素。 一般是0.5-1.

10、5g土（含N約1mg時）加5ml濃H2SO4。加酸的同時要做空白測定，以消除試劑誤差。第24頁，共77頁。4、加熱溫度與時間（1）加熱溫度加熱溫度在360-410C，才能使土壤有機N化合物分解完全，也不引起N的損失。 對溫度的控制：自動控溫器或消煮管中H2SO4蒸汽冷凝回流的高度在瓶頸上部1/3處冷凝回流為宜。 先用小火加熱，待瓶內(nèi)反應(yīng)緩和時（1015min），再加強火力使消煮的土液保持微沸。第25頁，共77頁。4、加熱溫度與時間（2）加熱時間控制適當?shù)募訜釙r間可以保證土樣中的有機N全部轉(zhuǎn)化為NH4-N，又不致因時間過長而引起N素損失。當消煮液和土粒全部變?yōu)榛野撞⒙詭ЬG色后，再消煮一小時，這1

11、hr叫后煮，其作用是促使土壤中復(fù)雜的有機N化合物分解完全，全部轉(zhuǎn)化為NH4-N。第26頁，共77頁。5、消煮器 鋁塊消煮器、遠紅外消煮器第27頁，共77頁。6、開氏法不能分解的氮1（1）有少量含雜環(huán)N、N-N鍵、N-O鍵等有機化合物（如偶N硝基、肼、腙）不能完全分解， 但它們在土壤中含量很少，所以開氏N中不包括在內(nèi)。第28頁，共77頁。6、開氏法不能分解的氮2（2）不包括全部NO3-N、NO2-N。 NO3-N在消煮過程中不會完全還原為NH4+，而且易揮發(fā)，一般土壤中含量不超過全N量的1%，所以可以忽略不計。 如果某些土壤NO3-N含量較多或?qū)θ玁量要求準確度較高時，則需采用改進法。 包括硝態(tài)

12、氮和亞硝態(tài)氮的消煮： 高錳酸鉀鐵粉第29頁，共77頁。6、開氏法不能分解的氮3（3）晶格固定態(tài)NH4+ NH4+被固定在礦物晶格中，一般不能被水、鹽溶液所提取，因此也不包括在開氏N中。 若要包括在內(nèi)，則需用HF-H2SO4處理。第30頁，共77頁。（二）消煮液中銨的測定1、原理：加堿使溶液中銨態(tài)氮以“氨”逸出，而得以分離用滴定法（或電位滴定法）測NH4+，也有用擴散法、比色法、氨電極法。第31頁，共77頁。2、蒸餾法測定銨蒸餾裝置圖第32頁，共77頁。第33頁，共77頁。第34頁，共77頁。2、蒸餾法測定銨（1）氨的吸收液類型： 消煮液加堿（NaOH）堿化，使NH4+NH3，逸出的NH3可用：

13、標準酸吸收，再用標準堿滴定多余的酸，根據(jù)凈用酸量計算NH4+的量。（目前在土壤、植物氮測定中一般不用，在測定肥料中氮時使用）現(xiàn)在普遍采用的是用H3BO3溶液吸收NH3，然后用標準酸滴定吸收的NH3。 NH4+ + OH- = NH3 + H2O NH3 + H3BO3 = NH4+ + H2BO3- H+ + H2BO3- = H3BO3第35頁，共77頁。（2）硼酸吸收液指示劑 H3BO3中加入混合指示劑溴甲酚綠-甲基紅，指示劑的變色范圍pH4.2-4.9，酸性時紅色，堿性時蘭綠色。 用H3BO3吸收前，把此混合液調(diào)到pH4.5，為紫紅色，此時正好是滴定終點。第36頁，共77頁。（3）硼酸吸

14、收液用量 H3BO3是一元弱酸，一分子H3BO3只能吸收一分子NH3 NH3 + H3BO3 = NH4 H2BO3 1ml 2% H3BO3吸收的NH3量為 0.92 mg N 在半微量開氏法蒸餾中，一般是1 mg N，用5mL 2% H3BO3吸收NH3足夠了。第37頁，共77頁。（4）硼酸吸收液優(yōu)點與用酸吸收比較，用H3BO3吸收NH3有以下幾個優(yōu)點：A、僅用一種標準酸溶液即可測出NH3含量，準確度高；B、H3BO3用量不必準確，只要足夠即可，而標準酸的用量要求準確；C、H3BO3液中加入指示劑，可檢查接受瓶是否干凈、蒸餾瓶中的堿是否足夠。第38頁，共77頁。 （5）NaOH的用量以保證

15、NH4+全部蒸出為原則，主要是根據(jù)加入濃H2SO4的量來計算的。濃H2SO4加入5ml，10mol/LNaOH用量： 36mol/L(1/2H2SO4)5ml = 10mol/L(NaOH) V V = 18ml實驗中一般加20ml 10mol/LNaOH。第39頁，共77頁。如何判斷加堿量是否合適？可以根據(jù)加堿后的幾種現(xiàn)象來判斷： 液變混濁，有藍色絮狀Cu(OH)2沉淀生成 溶液變?yōu)樽睾稚鞚?，Cu(OH)2CuO； 接收瓶中H3BO3液由紫紅色藍色。 以上說明加堿適量。第40頁，共77頁。（6）空白測定： 一般不大于0.40mL。（7）注意事項： 蒸餾時餾出液的溫度勿超過40C，以防NH3

16、揮發(fā)，注意打開冷凝水。 蒸出液以50mL為宜。第41頁，共77頁。3、擴散法測定銨適用于含N少（約0.05-0.2mgN）的土壤，消煮液放在外室，H3BO3放內(nèi)室，室溫20C，擴散24小時。此法受室溫、液層厚度、內(nèi)室大小等因素的影響。擴散皿第42頁，共77頁。4、利用開氏法原理設(shè)計的定氮儀現(xiàn)在已有多種半自動和自動定N儀器如：（1）Fuss-Tecator 、及型定N儀。 1030、1035型自動定N儀，此儀器帶有微處理機，從消煮、蒸餾到滴定，最后結(jié)果自動顯示數(shù)據(jù)全部自動化（只需2分鐘），每人可做120160樣次。（2）“FIA”流動注射儀和“CFA”連續(xù)流動分析儀， 分析速度大大提高。比色均采

17、用靛酚蘭比色法。第43頁，共77頁。第二節(jié) 土壤有效氮的測定講授重點：1、掌握土壤有效養(yǎng)分測定方法選擇的依據(jù)。2、了解土壤有效氮的存在形態(tài)，及其常用測定方法的特點。3、掌握土壤堿解氮測定的方法原理、反應(yīng)條件及操作技術(shù)。4、掌握土壤無機氮測定的浸提方法。5、了解土壤銨態(tài)氮及硝態(tài)氮測定的方法原理第44頁，共77頁。土壤有效養(yǎng)分：是指在一定時間內(nèi)，通常是指一 個生長季節(jié)內(nèi)，作物可以吸收、利用的土壤養(yǎng)分。土壤養(yǎng)分具有不同的化學形態(tài)和存在狀態(tài)，一般簡化為三部分： 難溶性養(yǎng)分 活性養(yǎng)分 溶液中的養(yǎng)分 固相 液相 非有效養(yǎng)分 有效養(yǎng)分活性養(yǎng)分又可稱為可溶態(tài)、易分解態(tài)、易水解態(tài)養(yǎng)分。一、有效養(yǎng)分的概念第45頁

18、，共77頁。用化學方法測定有效養(yǎng)分的基本設(shè)想： 選用適當?shù)幕瘜W試劑與土壤作用，將其中的有效部分溶解出來，經(jīng)過分離后用定量分析方法加以定量測定，以此量作為土壤供肥的強度或容量指標。所以，測定方法分為兩部分： （1） 有效養(yǎng)分的浸提（前處理，預(yù)處理） （2） 浸出液中養(yǎng)分的定量（定量或測定） 有效養(yǎng)分測定方法的中心是用化學試劑溶解有效養(yǎng)分，從而分離出來測定之。 關(guān)鍵在于浸提方法的選擇。第46頁，共77頁。浸提方法包括：浸提劑種類，土液比，時間等。最重要的是浸提劑，其選擇的原則（依據(jù)）是：（1）浸出的土壤養(yǎng)分量應(yīng)與作物吸收量（或植物對 養(yǎng)分的反應(yīng)）有良好的相關(guān)性；（2）快速、簡便；（3）適應(yīng)性廣，包

19、括：A 一種浸提劑適用多種元素； B 各類土壤； C 各實驗室都可用。（4）成本低?；瘜W方法測定土壤有效養(yǎng)分的數(shù)值不是植物吸收養(yǎng)分的絕對數(shù)量，而只是一個相對值。第47頁，共77頁。二、土壤中N的形態(tài)無機N： 固相上：固定態(tài)NH4+，交換態(tài)NH4+ 液相上：溶液中NH4+，NO3-，NO2-有機N： 進入土中的動植物殘體經(jīng)過復(fù)雜變化形成不同形態(tài)的化合物，并以不同狀態(tài)存在。第48頁，共77頁。土壤有效N定義：當季作物可以吸收利用的N。 土壤有效氮反映土壤近期內(nèi)氮素供應(yīng)情況形態(tài)：（1）無機N：NH4+，NO3-，NO2- （液） 交換態(tài)NH4+ 非交換態(tài)NH4+（2）易水解的有機態(tài)N（易礦化N）：

20、一般為全N的1-3%（一年），與其形態(tài)和存 在狀態(tài)有關(guān)。第49頁，共77頁。有效氮測定方法類型1、培養(yǎng)法：好氣培養(yǎng)法、嫌氣培養(yǎng)法2、化學方法：易水解性N：酸解、堿解無機N：化學提取 第50頁，共77頁。三、培養(yǎng)法測定土壤可礦化N（一）好氣培養(yǎng)法：基本原理： 將土壤置于培養(yǎng)箱中，在好氣條件下培養(yǎng)一定時間，利用土壤中的微生物將土壤中的易水解的有機N礦化成無機N，然后測定培養(yǎng)前后釋放出來的無機N（NH4-N，NO3-N）。 培養(yǎng)條件： （1）溫度：25-35C （25，30，35C） （2）水分（通氣性）：50-60%（最大持水量）為保持通氣性，土樣常與砂粒（或蛭石）混合后培養(yǎng)。 （3）時間：2-4

21、周（2，3或4周）第51頁，共77頁。3、好氣培養(yǎng)法的優(yōu)缺點優(yōu)點：（1）測定原理有理論依據(jù)（與田間礦化相似）（2）與植物吸N量相關(guān)性高，常作為其他方法的參比（3）與盆栽法相比，時間較短缺點： （1）與化學法相比，時間長 （2）條件要求嚴格，尤其水分不易掌握 （3）培養(yǎng)時間短結(jié)果不可靠，培養(yǎng)時間長則易生成有害物質(zhì)，抑制進一步的硝化作用。 所以，有一種培養(yǎng)法是用0.01mol L-1CaCl2淋洗生成的NO3-，再繼續(xù)培養(yǎng)。第52頁，共77頁。 （二）嫌氣培養(yǎng)法： 1、 基本原理：將土壤淹水處于嫌氣條件下，置 于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間，利用厭氣微生物 將土壤有機N礦化成NH4-N，然后測定NH4-N

22、 含量（扣除原有的NH4-N）。 2、 培養(yǎng)條件： （1）土壤淹水，處于嫌氣態(tài) （2）溫度：30-40C （30或40C） （3）時間：1-2（1或2周）第53頁，共77頁。3、優(yōu)缺點：優(yōu)點：（1）條件易于控制，不必考慮水分、通氣矛盾（2）與好氣法相比，快速、準確，重現(xiàn)性好（3）培養(yǎng)時間相對較短（4）可靠性也好，不僅適用于水田，也適用于旱田缺點： （1）有反硝化問題，可加液體石蠟來消除（2）與化學法相比，時間仍長第54頁，共77頁。培養(yǎng)方法與化學方法的比較生物方法特點：測定的是土壤中氮素潛在供應(yīng)能力。方法較繁瑣，需要較長的培養(yǎng)時間測出結(jié)果與作物生長有較高相關(guān)性化學方法特點：快速、簡便由于對易礦

23、化氮了解不夠，提取劑選擇往往缺乏理論依據(jù)，土壤氮釋放主要受微生物控制，化學試劑不能象微生物那樣有選擇性地釋放土壤中某部分有效氮。測出結(jié)果與作物生長相關(guān)性不及生物培養(yǎng)方法。第55頁，共77頁。 四、化學方法測定土壤供N能力（一）易水解性N（潛在有效N）： 著眼點是測定土壤中容易分解的那部分有機態(tài)N。 1. 堿水解性N（堿解N）： NaOH-擴散法： 2.0g土 + 10.00ml 1mol/L NaOH，401C， 240.5h 擴散皿第56頁，共77頁。堿解擴散法注意事項如果測定土樣包括NO3-N,需加入FeSO4-Ag2SO4，使NO3-N還原為NH3涂抹堿性膠液時注意防止污染內(nèi)室加堿后立即

24、蓋上毛玻璃滴定時用玻璃棒攪拌內(nèi)室硼酸溶液，切不可搖動擴散皿。第57頁，共77頁。 2、酸水解法： （1）0.5 mol L-1（1/2 H2SO4）浸提法 以 1：20水土比，浸提24h，測定浸提出的有機N、NH4+、NO3- 。 （2）6 mol L-1 HCl （3）1 mol L-1 H2SO4第58頁，共77頁。酸解法與堿解法的比較酸解法：不適合石灰性土壤 操作手續(xù)繁長，堿解法： 不僅能測出土壤氮供應(yīng)強度， 也能看出供應(yīng)容量和供應(yīng)速率， 試驗證明與田間試驗結(jié)果相關(guān)性好第59頁，共77頁。 （二）無機N：（NH4+，NO3-，NO2-） 意義： 無機N本身是速效N，是植物吸收利用的主要形

25、態(tài)。 易水解性N、培養(yǎng)法的N，最后都需要測定NH4+或NO3- 土樣的特殊性：新鮮樣品 （1） 采樣后要求冷凍或冷藏 （2） 快速干燥使NO3-變化極小，但對NH4+影響大第60頁，共77頁。1、浸提： NH4-N：陽離子、交換態(tài)，存在于土壤膠體表面。 浸提劑：1-2 mol L-1 KCl或NaCl 浸提方法：淋洗法或平衡法 NO3-N（NO2-）：不被膠體吸附，用水即可浸出。 但溶液易渾濁，要得清亮溶液，可加CaSO4、 KAl(SO4)2、KCl、NaCl、CuSO4-CaO等。第61頁，共77頁。2、硝態(tài)氮的測定酚二磺酸法： 1863年Sprenge提出，1929年Harper改進方法

26、原理：酚二磺酸在無水條件下，與硝酸起硝化反應(yīng)，生成硝基酚二磺酸。生成物在酸性條件下為無色，在堿性條件下為穩(wěn)定的黃色，可根據(jù)黃色的強度用比色法測定NO3-N的含量。適用范圍： 0.1 2 mg L-1方法特點 此法重復(fù)性好，準確性高，常作測定微量NO3-N的參比方法。 但需要蒸干，手續(xù)較麻煩。第62頁，共77頁。干擾因素消除1、Cl-：土壤含Cl- 大于15 mg kg-1時，會干擾測定，可通過加入Ag2SO4消除2、有機質(zhì)：顏色干擾，用活性碳除去。3、NO2-與顯色劑也呈黃色，但一般土壤含NO2-極少，可忽略不計。 當NO2-含量大于1 mg kg-1時，可加入尿素或硫脲或 氨基磺酸（2%NH

27、2SO3H）破壞它。 HNO2 + NH2SO3H = N2 + H2SO4 +H2O第63頁，共77頁。 3、硝態(tài)氮的測定紫外分光光度法：（1）NO3-等的紫外吸收特性及測定波長的選擇：NO3-在203nm和300nm處各有一個吸收峰，203nm處的靈敏度是300nm處的1000倍。在203nm附近測定含量少的樣品，如土壤NO3-N；在300nm附近測定含量高的樣品，如肥料NO3-N。第64頁，共77頁。210203300波長NO3-有機質(zhì)、Cu2+、Fe3+ OH-、CO32-、HCO3-、NO2-一般無機鹽吸收值選用210nm波長，雖然犧牲一定的靈敏度，但可消除多數(shù)無機鹽的干擾第65頁，

28、共77頁。干擾物的消除：A、OH-、CO32-、HCO3-可加入酸，酸化而消除。B、NO2-：一般土壤含量極少，不會造成干擾；如含量高可加入氨基磺酸消除，其對NO3-無作用。 HNO2 +NH2SO3H = N2 + H2SO4 + H2O 過量的氨基磺酸在210nm處無吸收值。C、Fe3+、Cu2+等土壤中含量少，一般不會造成干擾。若多時，可用差值法（Zn還原法）消除。第66頁，共77頁。D、有機質(zhì)的干擾： 有機質(zhì)在210nm處有較高的吸收值，因此，紫外法測定NO3-N，有機質(zhì)是主要的干擾物質(zhì)。可通過差值法測定消除其干擾。第67頁，共77頁。NO3-N測定的差值法（Zn還原法） 根據(jù)吸光度具

29、有可加性，在210nm 處，兩次測定試液的吸光度。 第一次，取一份試液酸化測定吸收值A(chǔ)1； 第二次，取另一份試液酸化后，加還原劑使NO3-還原成非NO3-物質(zhì)，再測定試液的吸收值A(chǔ)2。 兩次測定差值（A1-A2）即被認為是NO3-N的吸光度。第68頁，共77頁。4、亞硝態(tài)氮的測定：常用的方法是Griess比色法（重氮-偶聯(lián)法）。 原理：在酸性介質(zhì)中，HNO2與重氮試劑（對氨基苯磺酰胺）進行重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，然后重氮鹽與偶合試劑（N-(1-萘基)乙二胺）進行偶合反應(yīng)，生成紅色的偶氮化合物，其顏色深淺與NO2-N含量成正比，可用比色法測定。第69頁，共77頁。銨態(tài)氮的測定方法擴散法蒸餾法（浸提-蒸餾法）靛酚藍比色法納氏試劑比色法第70頁，共77頁。5、銨態(tài)氮的測定擴散法：原理：利用MgO的弱堿性（pH 11），在擴散皿中直接與土壤作用，使NH3逸出，而不破壞土壤膠體和有機質(zhì)，而且是在