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文檔簡介

1、實驗42,6-二氯酚靛酚法測定還原性抗壞血酸 實驗?zāi)康纳飿悠分锌偪箟难岚ㄟ€原型和脫氫型兩種。2,6-二氯酚靛酚法測定的結(jié)果僅能反映還原性抗壞血酸的含量。本次實驗?zāi)康募凑莆者€原性抗壞血酸測定的原理和基本方法。 尿中還原性抗壞血酸的測定原理還原性抗壞血酸與染料（紅色）在酸性條件下生成脫氫型維生素C和無色染料，利用這種顏色變化可對其進行標定。實驗步驟1抗壞血酸溶液的標定：把抗壞血酸溶液5mL(約200ug/mL)、6%KI 0.5mL和淀粉溶液三滴，加入到錐形瓶，然后用0.001N KIO3標定，終點為淡藍色。抗壞血酸標液濃度（mg/mL）=VKIO30.088/VvitC3C6H6O6+KI

2、O3C6H4O6+KI+3H2O IO3-+5I-+6H+=3I2+3H2O22，6-二氯酚靛酚染料的標定：抗壞血酸標液5.0mL 與1%草酸5.0mL加入到錐形瓶，然后用待定濃度的染料滴定至淡紅色，15秒不退色為止。T染=CvitCVvitC/V染料3尿樣滴定：尿樣5mL與1%草酸5.0mL加入到錐形瓶，用2，6二氯酚靛酚滴定至淡紅色15秒不退色為止，記錄染料用量。 結(jié)果計算尿中還原型抗壞血酸含量(mg/mL)=T染V染/V尿 尿肌酐測定原理肌酐與堿性苦味酸作用，生成桔紅色苦味酸肌酐，可根據(jù)顏色進行比色測定。實驗步驟1制取尿樣稀釋液，取尿樣5mL于100mL容量瓶。用蒸餾水定容至刻度。2制定

3、標準曲線及尿樣測定。3依次加入以上試劑混勻，在水浴箱內(nèi)加熱20分鐘，再用721分光光度計比色測定：比色波長510nm，0管調(diào)零，繪制A-Q 標準曲線。肌酐標準曲線標準管和樣品管的配制（mL）管號012345尿樣0.1mg/mL肌酐0.00.10.20.30.40.5-尿稀釋液-0.5蒸餾水0.50.40.30.20.10.00苦味酸試劑2.02.02.02.02.02.02.0反應(yīng)體系可擴大一倍，總體積為5.0mL。結(jié)果計算尿中肌酐含量（g/mL）尿樣管相當于標準管之毫克數(shù)/（實際用尿量1000）實際用尿量=0.55/100衛(wèi)生學評價尿中還原型VitC(mg)/肌酐（g）比值：正常：男性9，女性15相當于VitC

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