1、 SPD-20A高效液相色譜儀確認方案文件編號: ZD-VP-06-438起草人： 起草日期： 審核人： 審核日期： 批準人： 批準日期： 頒發(fā)部門：驗證委員會分發(fā)部門：質(zhì)量管理部目 錄概述3驗證目的3驗證依據(jù)及驗證范圍3驗證工作小組3驗證方案審批3驗證方案起草3驗證方案會簽3驗證方案批準3驗證方案實施3驗證的準備4文件資料的確認4售后服務(wù)4關(guān)鍵性儀表及消耗性備品備件4安裝檢查4計算機的安裝情況檢查5安裝確認結(jié)論及批準5安裝驗證內(nèi)容 5評價設(shè)備性能、質(zhì)量、適用性是否符合采購質(zhì)量標準要求5評價儀器的安裝條件是否符合GMP及供應(yīng)商提議的要求5起草標準操作規(guī)程5儀器校正5運行確認（也即功能試驗）5測

2、試項目和認可標準5驗證所需的材料5玻璃儀器設(shè)備5試劑、標準溶液5其它輔助設(shè)備5軟件系統(tǒng)安全性確認(必要時)5運行確認的實施6運行確認評價及結(jié)論7性能確認(適用性預(yù)試驗)7擬訂再驗證項目及周期7驗證結(jié)論 7概述高效液相色譜法系采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動相泵入裝有填充劑的色譜柱，對供試品進行分離測定的色譜法。注入供試品，由流動相帶入柱內(nèi)，各組分在柱內(nèi)被分離，并依次進入檢測器，由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄和處理色譜信號，得到測定結(jié)果。由于應(yīng)用了各種特性的微粒填料和加壓的液體流動相，本法具有分離性能高、分析速度快的特點。SPD-20A 高效液相色譜儀是根據(jù)質(zhì)量控制的目的和要求，在調(diào)研的基礎(chǔ)上，公司于 2009

3、年 8 月購置的精密儀器，其生產(chǎn)廠為 日本島津 ，主要用于樣品的 含量測定 分析測試。 由 組成。 應(yīng)用軟件為 ，版本號 。驗證目的 按照 GMP 的要求，需要對該儀器進行安裝確認、運行確認、性能確認，以確定目前的實驗室環(huán)境能否滿足該儀器的正常操作和使用，儀器是否具有良好的檢測性能，能否滿足驗證可接受標準和我們?nèi)粘７治鰷y試工作的需要。驗證范圍及驗證依據(jù)本方案適用于對高效液相室 SPD-20A 高效液相色譜儀的驗證。 本方案驗證依據(jù)GB/T21187-2007高效液相色譜儀檢定規(guī)程 高效液相色譜儀操作規(guī)程驗證工作小組組 長 姓 名職務(wù)/職稱部門成 員 驗證方案審批驗證方案起草起草部門簽名日 期中

4、心化驗室 質(zhì)量管理部 驗證方案會簽部 門簽 名日 期質(zhì)量管理部質(zhì)量管理部 驗證方案批準批 準 人簽 名日 期質(zhì)量管理部 驗證方案實施實施部門職 責(zé)中心化驗室負責(zé)儀器的安裝確認。質(zhì)量管理部負責(zé)儀器的運行確認、性能的確認。驗證的準備文件資料的確認序號文件/資料編號存放地1設(shè)備采購合同2原版操作說明書 安裝手冊和維修手冊（如必要）3儀器操作規(guī)程SOP4儀器使用、維修記錄5中華人民共和國國家計量檢定規(guī)程 JJG694-20076儀器檔案（如必要）7中國藥典（2010版）附錄8標準物質(zhì)證書9驗證方案結(jié)論：檢查人 檢查日期 復(fù)核人 復(fù)核日期 售后服務(wù)維修單位：聯(lián)系 ：地址： ：聯(lián)系人： 檢查人 日期 關(guān)鍵

5、性儀表及消耗性備品備件：見附件2 檢查人 日期 安裝檢查對照使用說明書要求安裝，確認環(huán)境、電源等符合要求。檢查內(nèi)容要求方法結(jié)果環(huán)境室內(nèi)不得存放與實驗無關(guān)的易燃、易爆和強腐蝕性的物質(zhì)，無強烈的機械震動和電磁干擾。目測環(huán)境溫度1535溫濕度儀測環(huán)境相對濕度35%75%溫濕度儀測安裝位置儀器應(yīng)平穩(wěn)而牢固地安置在工作臺上按要求安裝電壓220V22V電壓儀測頻率50Hz接地接地良好接地電阻表測定電源線與插孔吻合按要求安裝氣體管路氣體管路應(yīng)適用。按要求安裝冷卻水流量充足、穩(wěn)定目測 檢查人 日期 計算機的安裝情況檢查項 目安裝的主要軟件文件格式安裝位置數(shù)據(jù)文件保存位置密碼復(fù)雜性工作站安裝安裝確認結(jié)論及批準結(jié)

6、論：所有物品與檢查清單相符，實驗室電、氣設(shè)計安裝合理，實驗室環(huán)境良好，符合儀器安裝要求。氣、電及管路連接符合供貨方的要求。儀器安裝 檢查人 日期 批準人 日期 安裝確認評價設(shè)備性能 、質(zhì)量、適用性是否符合采購質(zhì)量標準要求：見附件3。評價儀器的安裝是否符合GMP及供應(yīng)商提議的要求查閱設(shè)備采購定單、操作手冊等，列出設(shè)備安裝、使用所需條件，包括溫度、濕度、通風(fēng)條件、電路等。檢查儀器安裝與使用所處的環(huán)境條件，是否符合上述要求。檢查結(jié)果記錄于附件4。起草標準操作規(guī)程(可驗證后補充)標準操作規(guī)程維護保養(yǎng)規(guī)程校正規(guī)程儀器校正由廠商技術(shù)人員現(xiàn)場安裝、調(diào)試，進行運行確認前的校正。運行確認（功能試驗）測試項目和認

7、可標準根據(jù)中華人民共和國國家計量檢定規(guī)程JJG694-2007、中國藥典（2010版）附錄確定。如無相關(guān)標準，參考儀器說明書確定。驗證所需的材料玻璃儀器設(shè)備 計量玻璃儀器需徹底清洗并經(jīng)檢定，一般玻璃儀器要保證潔凈。試劑、標準溶液 a) 甲醇（色譜純）；純化水（0.45nm微孔濾膜過濾）b) 丙酮（色譜純）；c) 0.25mg/ml的甲硝唑?qū)φ掌罚籨) 流動相：0.3%丙酮-水；甲醇：水（20:80）。儀器a) 安捷倫1200高效液相色譜儀；b) 用于藥品預(yù)處理和衍生的各種玻璃儀器和設(shè)備。軟件系統(tǒng)安全性確認打開計算機開關(guān)，待屏幕運行 Windows xp 操作系統(tǒng)以后，由可以授權(quán)操作該儀器的檢驗

8、員設(shè)定登陸用戶名、密碼，重新啟動系統(tǒng)。再讓其他不知被授權(quán)人員登陸，嘗試輸入用戶名和密碼，嘗試能否進入計算機系統(tǒng)，連續(xù)嘗試 5 次。不知用戶名和密碼的操作人，應(yīng)無法登陸計算機系統(tǒng)。結(jié) 論： 檢查人： 日期： 運行確認的實施儀器各單元開機性能確認泵及進樣器：打開電源開關(guān)，泵及進樣器進行自檢，并顯示主畫面。檢測器：打開電源開關(guān)，檢測器燈打開，并進行自檢6min，氘燈在三個內(nèi)置波長257nm、521nm、656nm處校準，若偏差小于1nm，自檢通過，若大于1nm，出現(xiàn)自檢錯誤提示。泵流量設(shè)定值誤差和流量穩(wěn)定性誤差的確認250mm；溫度：室溫。 b)測試方法：啟動儀器，以水作為流動相，待壓力穩(wěn)定后，在流

9、動相出口處用稱重過的10ml容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，收收集五分鐘流出的流動相，精密稱定，每個流速測定三次，記錄測試溫度，按下列計算流量設(shè)定值誤差S1和穩(wěn)定性誤差S2。 SS = (Fm -Fs) / Fs100%SR =（Fmax-Fmin）/100%式中：SS為泵流量設(shè)定值誤差（%）；SR為流量穩(wěn)定性誤差（%）；Fm=（W2-W1）/(t),為流量實測值（ml/min）；W2容量瓶+流動相（g）； 3 W1容量瓶的質(zhì)量（g）；Fs流量設(shè)定值實驗室溫度下水的密度（g/cm ）； t收集流動相的時間（min）； 同一組測量值的算術(shù)平均值（ml/min）； Fmax同一組測量中流量最大值

10、（ml/min）； Fmin同一組測量中流量最小值（ml/min）。 c）測試標準： 流量設(shè)定值F（ml/min）測量次數(shù)333收集流動相時間（min）251510允許誤差SS5%3%3%SR3%2%2% a)測試條件： 流動相：0.3%丙酮-水 檢測波長：254nm 流速：1.000ml/min 柱溫：30。 b)測試方法：按下表設(shè)置梯度洗脫順序，以兩通代替色譜柱連接管路，先用超純水沖洗系統(tǒng)，待基線平穩(wěn)后開始執(zhí)行梯度程序，畫出梯度變化曲線，測定三次，取各梯度級高度的平均值，由曲線圖測量100%B（C）梯度級平均高度各梯度級實際體積%，每個梯級的理論體積%和實際體積%之差即為梯度準確度，以最大

11、差值為梯度準確度誤差。 梯度洗脫表時間A通道（C通道）：超純水B通道（D通道）：0.3%丙酮水溶液100%0%100%0%0%100%0%100%20%80%20%80%40%60%40%60%60%40%60%40%80%20%80%20%100%0%24min100%0%c)測試標準：梯度準確度誤差1%。a)測試條件： 色譜柱：C18色譜柱 檢測波長：320nm 進樣量：20 柱溫：37b)測試方法： 對照品置于進樣瓶，共進樣6針，記錄峰面積，求6針RSD。c）測試標準：RSD1.5% a)測試條件： 色譜柱：C18色譜柱 檢測波長：320nm 進樣量：（1、5、10、15、20） 柱溫：

12、37 b)測試方法：對照品置于進樣瓶，不同進樣量各進一針，記錄峰面積，求進樣量與峰面積的相關(guān)系數(shù)。 c）測試標準：相關(guān)系數(shù)r 以水流過流通池做一空白掃描，然后以手動的方式將甲硝唑?qū)φ掌酚盟♂?0倍后注入流通池，掃描250nm-400nm波長范圍內(nèi)的吸收情況，得到甲硝唑溶液在紫外可見光區(qū)的吸收光譜曲線。記錄其在275nm、300nm、320nm、350nm附近波長處的最大或最小吸收波長，分別找出各點最大或最小波長與標準波長之差即為波長示值誤差；重復(fù)測定三次，各點最小與最大之差即為波長重復(fù)性誤差。檢測器波長的示值誤差1和重復(fù)性誤差2 波長275nm附近（max）300nm附近(min)320nm

13、附近(max)350nm附近(min)實測波長標準波長272nm302nm320nm360nm測定次數(shù)3333示值誤差1重復(fù)性誤差2a) 測試條件： 色譜柱：C18色譜柱 檢測波長：320nm 進樣量：20 柱溫：37b)測試方法： 將儀器各部分連接好，開機，記錄基線30-40分鐘，計算基線漂移和噪聲。 c）測試標準：基線噪聲：10-4AU；基線漂移：10-4AU/hr。a)測試條件：流動相：甲醇-水（20:80） 對照品：（5、10、25、50、100）g/ml咖啡因?qū)φ杖芤?色譜柱：C18色譜柱 檢測波長：320nm 進樣量：20 柱溫：37b)測試方法： 5個濃度對照品置于不同進樣瓶中，

14、各進一針，記錄峰面積，求個對照品濃度與峰面積的相關(guān)系數(shù) c）測試標準：相關(guān)系數(shù)r a)測試條件： 流動相：甲醇-水（20:80） 對照品：110-7g/ml甲硝唑?qū)φ杖芤?色譜柱：C18色譜柱 檢測波長：320nm 進樣量：20 柱溫：37 b)測試方法： 以流動相沖洗系統(tǒng)至基線平穩(wěn)后，進樣，記錄色譜圖，由色譜圖峰高及基線噪音，按下式計算最 小檢測濃度CC = 2N C H 式中：C最小檢測濃度，g/ml N基線噪音峰度，mAU C標準溶液濃度，g/ml H標準溶液色譜峰高，mAU c）測試標準：110-8g/ml咖啡因溶液。8.4.9 運行確認評價及結(jié)論9. 性能確認(適用性試驗)9.1檢查

15、項目：甲硝唑氯化鈉注射液中甲硝唑含量的測定。9.2 檢查的目的和標準：檢查儀器在測試供試品的過程中，含量測定的相對偏差。檢查依據(jù)為中國藥典2010年版二部。9.3驗證所需要的材料和儀器（同運行確認）。 a)測定條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水（20:80）為流動相，檢測波長為320nm，溫度為37，理論板數(shù)按甲硝唑計算不得少于2000。b)對照品溶液的配制：精密稱定甲硝唑?qū)φ掌芳s25 mg，精密稱定，置于100ml容量瓶中，加流動相（甲醇-水（20:80）溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液（0.25mg/ml）。c）供試品溶液的制備：精密量取本品5ml置100ml容量瓶中，加

16、流動相（甲醇-水（20:80）稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液（0.25mg/ml）。 d）測定：精密量取對照品和供試品各20l注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。 甲硝唑（C6H9N3O3）+=+=+=%= A樣C標 A標C樣式中： A樣 為供試品的峰面積； A標 為對照品的峰面積； C樣 為供試品的濃度； C標 為對照品的濃度。 e）測定標準：含甲硝唑應(yīng)為標示量的93.0%107.0%。 10. 擬訂再驗證項目及周期設(shè)備動力、質(zhì)量部根據(jù)設(shè)備儀器情況，確定再驗證周期項目及周期（附件6），報驗證委員會審核。11.驗證評價及結(jié)論（附件5）附件：1驗證方案申請及批準書（附件

17、1）2關(guān)鍵性儀表及消耗性備品情況（附件2）3儀器組成信息及性能、質(zhì)量及適用性評價表（附件3）4儀器安裝條件檢查記錄（附件4）5驗證評價及結(jié)論（附件5）6再驗證項目及周期（附件6）7驗證證書（附件7）附件1. 儀器驗證方案申請及批準書驗證方案名稱島津SPD-20A高效液相色譜儀驗證方案擬驗證時間驗證方案號放置地點精密儀器室驗證負責(zé)人驗證參加人員驗證內(nèi)容（參數(shù)）驗證依據(jù)驗證方案（輔助資源） 起草人 部門 年 月 日驗證委員會審 批 驗證委員會： 年 月 日附件2.關(guān)鍵性設(shè)備及消耗性備品情況儀器名稱高效液相色譜儀型 號島津SPD-20A制造廠商儀器編號生產(chǎn)日期企業(yè)編號使用部門中心化驗室放置地點高效液

18、相室關(guān)鍵性設(shè)備設(shè)備名稱生產(chǎn)廠家或型號校正證書編號保存處校正周期消耗性備品品 名生產(chǎn)廠家和型號單 位數(shù) 量保存處確認使用部門 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日附件3. 儀器組成信息及性能、質(zhì)量及適用性評價表儀器名稱高效液相色譜儀型 號島津SPD-20A 制造廠商儀器編號生產(chǎn)日期企業(yè)編號使用部門質(zhì)檢中心放置地點精密儀器室主機輔件性能質(zhì)量要求評價結(jié)果確認使用部門 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日驗證委員會 年 月 日附件4.儀器安裝條件檢查記錄儀器名稱高效液相色譜儀型 號 島津SPD-20A制造廠商儀器編號生產(chǎn)日期企業(yè)編號使用部門放置地點高效液相室設(shè)備條件要求實際條件溫度1535濕度35%75%電壓220V22V其它條件工作臺不受陽光直射。室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體或其它影響測定的氣體干擾。周圍應(yīng)無影響測定的強電場、磁場周圍應(yīng)無強烈震動。排風(fēng)裝置良好確認使用部門 年 月 日質(zhì)量管理部 年 月 日驗證委員會 年 月 日附件5.驗 證 記 錄（參考）驗證對象 島津SPD-20A高效液相色譜儀驗證時間驗證方法驗證編號溫度相對濕度驗證方法描述：驗證記錄：序號 檢測參數(shù) 參數(shù)標準值 檢測結(jié)果 （或前次檢測結(jié)果）檢測： 年 月 日 年 月 日數(shù)據(jù)分析處理： 分析人： 年 月 日驗證評價及結(jié)論 負責(zé)人： 年 月 日備注：附件6.再驗證項目及周期設(shè)備編號設(shè)備名稱高效液相色譜儀型號