1、鏈球菌等致病菌在侵染人體時(shí)，可產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶，試分析透明質(zhì)酸酶在鏈球菌侵染過(guò)程中的作用是，其意義可能是O現(xiàn)代生物技術(shù)訓(xùn)練題L20114月，JMCB(分了細(xì)胞工物學(xué)報(bào))在線出版了“十細(xì)胞工題專輯，集小刊載了干細(xì)胞研究領(lǐng)域的多項(xiàng)最新研究成果。醫(yī)孑上常用器1?移植來(lái)治療人類的某匹疾病而利用人類胚胎干細(xì)胞可以解抉器官移植中的恨務(wù)問(wèn)題。卞列敘述錯(cuò)課的是()A.胚盼十細(xì)胞兵冇體積小、核大、核仁明顯、茨門(mén)質(zhì)合成旺盛等特點(diǎn)&胚胎丁細(xì)胞.除了可以來(lái)白內(nèi)細(xì)胞團(tuán)外，證可來(lái)n原始的性腺胚胎干細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞I或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能矚維持不分化的狀態(tài)將亦胎丁細(xì)胞成功誘導(dǎo)分化為胰島B細(xì)胞后，若用標(biāo)記的胰島素基因作探

2、針對(duì)胚胎十細(xì)胞和胰島B細(xì)胞的mRNA進(jìn)行檢測(cè)，均能形成雜交帶(不定項(xiàng))土壤農(nóng)桿菌能將自身Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到植物染色體DNA上，誘發(fā)植物形成腫瘤。T-DNA中含有植物生長(zhǎng)素合成酶基因(S)和細(xì)胞分裂素合成酶基因(R),它們的表達(dá)與否能影響相應(yīng)植物激素的含量，進(jìn)而調(diào)節(jié)腫瘤組織的生長(zhǎng)與分化。據(jù)圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是()丁i質(zhì)粒的T-DNA生芽瘤A.當(dāng)細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值升高時(shí)，誘發(fā)腫瘤生根b清除腫瘤組織中的土壤農(nóng)桿菌后，腫瘤不再生長(zhǎng)與分化圖中腫瘤組織可在不含細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)基因通過(guò)控制酶的合成控制代謝，進(jìn)而控制腫瘤組織生長(zhǎng)與分化透明質(zhì)酸酶是一種能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸的活性

3、，從而提高組織中液體滲透能力的酶。下圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)獲得新透明質(zhì)酸酶基因的過(guò)程,Ncol和Xhol為限制酶識(shí)別位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)圖中新透明質(zhì)酸酶基因的獲得是重疊延伸PCR技術(shù)在基因的定點(diǎn)突變方面的應(yīng)用，圖中的目的是為了o透明質(zhì)酸酶基因上的一段核昔酸序列為“-ATCTCGAGCGGG-”,則對(duì)該段核昔酸序列進(jìn)行剪切的Xhol酶識(shí)別的核昔酸序列(6個(gè)核昔酸)為o(2)構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時(shí),所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列有/沒(méi)有)專一性要求。早期利用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來(lái)發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)A?1Ncol透明質(zhì)酸酶基因NcolXhol重疊延伸PCR新

4、透明質(zhì)酸酶基囲Xhol勢(shì)，最可能的原因是O(3)人體細(xì)胞間質(zhì)有基膜粘連蛋白、多糖(如透明質(zhì)酸)、蛋白多糖等成分。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞的做法為O葉綠體基因工程是將外源基因?qū)肴~綠體中的一項(xiàng)工程技術(shù)，煙草葉綠體基因工程在基礎(chǔ)研究、遺傳改良以及生物反應(yīng)器研究等方面都發(fā)揮了極為重要的作用，表現(xiàn)出巨大的應(yīng)用前景。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：葉綠體基因工程常將含有外源基因的質(zhì)粒包裹在金粉上，通過(guò)轟擊進(jìn)入葉綠體中從而實(shí)現(xiàn)目的基因的導(dǎo)入，這種目的基因?qū)氲姆椒ǚQ。葉綠體基因組分為基因區(qū)和基因間隔區(qū)，葉TOC o 1-5 h z綠體中基因間隔區(qū)序列通常被作為插入位點(diǎn)，其優(yōu)點(diǎn)是O在分子水平上檢測(cè)目的基

5、因是否成功表達(dá)的方法是O煙草對(duì)奇霉素(一種抗生素)具有較強(qiáng)的敏感性，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，質(zhì)粒上的奇霉素抗性基因可作為，其作用是O與細(xì)胞核基因工程相比，葉綠體基因工程能防止細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的蛋白酶對(duì)目標(biāo)蛋白的消化作用，其原因是,并且由于,不會(huì)造成基因污染。植物冠瘻病是由于植物受損傷后，傷口流出的液體中含有酚類、氨基酸、糖類等有機(jī)物，誘導(dǎo)根癌T-Dru區(qū)域生長(zhǎng)索裂索基因基因.左邊界X冠廳贛代謝荃丙冠遵堿合成基囲右邊界宜制起始悅點(diǎn)土壤農(nóng)桿菌入侵，引起植物細(xì)胞異常增殖而形成的植物瘤。植物冠瘻病與根癌土壤農(nóng)桿菌質(zhì)粒上T-DNA有密切的關(guān)系，其質(zhì)粒結(jié)構(gòu)如下圖所示：質(zhì)粒存在于許多細(xì)菌以及酵母菌等生物細(xì)胞中,是擬核和

6、細(xì)胞核外能夠自主復(fù)制的,在基因工程中一般可用作O植物冠瘻病的形成與根癌土壤農(nóng)桿菌質(zhì)粒中的基因有關(guān)，使植物產(chǎn)生較多的，細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂失控,并誘導(dǎo)合成植物中沒(méi)有的冠瘻堿等物質(zhì)，冠瘻堿中含有豐富的碳源和氮源，對(duì)于根癌土壤農(nóng)桿菌來(lái)說(shuō)，冠瘻堿的作用是O有科學(xué)家從桃樹(shù)冠瘦病病株旁邊的土壤中，分離出一株放射土壤桿菌K84能產(chǎn)生抑制根癌土壤農(nóng)桿菌生長(zhǎng)的農(nóng)桿菌素，但是K84對(duì)冠瘦病只具有預(yù)防作用，請(qǐng)結(jié)合植物感染根癌土壤農(nóng)桿菌后，植物冠瘻病形成的原理，闡述K84對(duì)冠瘻病只具有預(yù)防作用的原因:第一步：從豬囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞。1j插入j形成mT7H8118H9、/野生e$細(xì)胞基因j同源重組0-DZHI匸二EHZE

7、HI0-突變es細(xì)胞基因基因進(jìn)行替換?；虼虬屑夹g(shù)是指利用外源性DNA與細(xì)胞DNA的相同或相似序列，在特定位點(diǎn)上進(jìn)行替換，從而改變細(xì)胞遺傳特性的方法。該技術(shù)可應(yīng)用于解決人體對(duì)移植的豬器官產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)上，即利用基因打靶技術(shù)對(duì)豬細(xì)胞a1,3半乳糖昔轉(zhuǎn)移酶基因進(jìn)行改造，以消除a-1,3半乳糖昔轉(zhuǎn)移酶引起的免疫排斥。其主要過(guò)程如下：第二步：在與靶基因(需要改造的基因)相同的外源性DNA上，插入新霉素抗性基因，構(gòu)建打靶載體。第三步：打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，與細(xì)胞DNA中的靶第二、三步示盍圖(6-1底示不同的基因片段)第四步：改造后的胚胎干細(xì)胞篩選、增殖等。回答下列問(wèn)題：選取豬胚胎干細(xì)胞作為基因改造

8、的細(xì)胞，原因是胚胎干細(xì)胞在功能上具O該改造過(guò)程中，靶基因具體是指；插入新霉素抗性基因需要的酶是,插入該抗性基因的作用是(答出兩點(diǎn))。改造后的胚胎干細(xì)胞經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)發(fā)生增殖和分化，培育出不合成a1,3半乳糖昔轉(zhuǎn)移酶的特定器官，再經(jīng)過(guò)一系列改造后為器官移植做準(zhǔn)備。(4)運(yùn)用基因打靶技術(shù)進(jìn)行基因改造的原理是,該技術(shù)在一定程度上解決了人體移植器官的短缺難題。人體移植器官短缺是一個(gè)世界性難題。科學(xué)家想通過(guò)生物工程技術(shù)尋求可替代的移植器官。回答下列相關(guān)問(wèn)題：科學(xué)家正試圖利用基因工程方法對(duì)小型豬的器官進(jìn)行改造，采用的方法是將器官供體基因組導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制的表達(dá)，再通過(guò)無(wú)性繁殖，培育出無(wú)免疫排斥反應(yīng)的移植

9、器官。此過(guò)程可能用到的生物工程技術(shù)有(寫(xiě)出至少三種)O胚胎移植前，首先要對(duì)受體母豬進(jìn)行處理，以保證其生殖器官的生理環(huán)境適合胚胎發(fā)育。將發(fā)育至?xí)r期的胚胎，植入受體母豬體內(nèi)，還需要對(duì)受體母豬進(jìn)彳匸檢查，來(lái)確定移植是否成功。若對(duì)移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)，宜取囊胚期白細(xì)胞進(jìn)行鑒定，一般采用SRY-PCR方法，選擇出現(xiàn)陰性反應(yīng)，則胚胎性別為o一部分科學(xué)家提出，可以通過(guò)對(duì)患者進(jìn)行體細(xì)胞核移植，培養(yǎng)成胚胎。再?gòu)闹蟹蛛x出胚胎干細(xì)胞，利用將胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)成特定器官，進(jìn)行移植。轉(zhuǎn)基因和細(xì)胞核移植(克隆)等生物技術(shù)存在安全性和倫理問(wèn)題，如科學(xué)家賦予轉(zhuǎn)基因生物某些特殊性狀，它們有可能成為“入侵的外來(lái)物種”，威脅

10、生態(tài)系統(tǒng)中其他生物的生存，這屬于轉(zhuǎn)基因生物的(“食品安全”、“生物安全”或“環(huán)境安全”)問(wèn)題；我國(guó)政府對(duì)待克隆人的態(tài)度是，不反對(duì)治療性克隆。答案：l.D.2.AB(1)保護(hù)透明質(zhì)酸酶基因，防止Ncol限制酶破壞目的基因-CTCGAG-或-GAGCTC-沒(méi)有(毛霉酵母菌)是真核細(xì)胞，有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的主要成分(或分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸)破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵(或?yàn)榧?xì)菌提供能源物質(zhì))(1)基因槍法避免了外源基因插入后對(duì)葉綠體內(nèi)源基因表達(dá)造成影響(保持葉綠體基因結(jié)構(gòu)完整性或防止葉綠體基因結(jié)構(gòu)被破壞)抗原一抗體雜交標(biāo)記基因?yàn)榱髓b別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)(便于目的基因的篩選和鑒定)葉綠體為雙層膜結(jié)構(gòu)，將表達(dá)的蛋白質(zhì)束縛在葉綠體內(nèi)，避免了目的蛋白與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)蛋白酶的接觸外源基因不會(huì)隨花粉傳播擴(kuò)散(1)環(huán)狀DNA分子運(yùn)載體(2)生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、冠瘻堿合成生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素為根癌土壤農(nóng)桿菌提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(3)根癌土壤農(nóng)桿菌使植物生長(zhǎng)根瘤的原理是其質(zhì)粒的T-DNA區(qū)段可整合到植物的基因中，一旦整合，合成生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、冠瘻堿使植物細(xì)胞生長(zhǎng)，分裂形成瘤狀結(jié)構(gòu)，再解決根瘤的問(wèn)題就較為困難，因此放射性土壤桿菌K84只能對(duì)冠瘻病起到預(yù)防作用。(1)發(fā)育的全能性(豬細(xì)胞的)