1、關(guān)于經(jīng)典液相色譜法第一張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月2 第1節(jié) 液-固吸附柱色譜法（LSC） 經(jīng)典的液固吸附色譜（liquid solid adsorption chromatography，LSC）是以吸附劑為固定相，有機(jī)溶劑為流動相，利用不同組分在吸附劑上吸附性能的差異，進(jìn)行分離分析的方法。 用于分離分析極性至弱極性的化合物，不適用于分離分析強極性的物質(zhì)。一、基本原理 1吸附與吸附平衡 第二張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月3 吸附過程是試樣中組分分子與流動相分子爭奪吸附劑表面活性中心的過程。圖10-1 吸附色譜示意圖m.流動相 a.吸附劑 Xm.流動相中溶質(zhì)分子 Ym

2、.流動相分子 Xa.被吸附的溶質(zhì)分子 第三張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月4這種吸附平衡過程可表示為吸附平衡常數(shù): 因為流動相的量很大， 近似于常數(shù)，而且吸附只發(fā)生于吸附劑表面，所以，吸附平衡常數(shù)可寫成第四張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月5CS為溶質(zhì)在固定相表面的分析濃度， Cm為溶質(zhì)在流動相中的分析濃度 K與組分的性質(zhì)、吸附劑的活性、流動相的 性質(zhì)及溫度有關(guān)。第五張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月6 K值小，說明該物質(zhì)的吸附能力弱，在固定相中滯留時間短，移動速率快，先流出色譜柱；若K值大，說明該物質(zhì)的吸附能力強，在固定相中滯留時間長，移動速率慢，后流出色譜柱。在一

3、定條件下，不同組分因吸附系數(shù)的差異得以分離。 2吸附等溫線 在一定溫度下，某一組分在固定相和流動相 之間達(dá)到平衡時，以組分在固定相中的濃度Cs為縱坐標(biāo)，以組分在流動相中的濃度Cm為橫坐標(biāo)得到的曲線。 第六張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月7等溫線有三種類型：線性、凸形和凹形。通常在低濃度時，每種等溫線均呈線性，而高濃度時，等溫線則呈凸形（常見）或凹形。吸附等溫柱內(nèi)溶質(zhì)濃度分布柱內(nèi)溶質(zhì)濃度的分布曲線流出曲線 保留時間與進(jìn)樣量的關(guān)系 第七張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月8二、 吸附劑 1. 對吸附劑的要求： (1)表面積大，具有一定的吸附能力。 (2)不應(yīng)與流動相發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

4、(3)粒度要細(xì)，一般為150目左右。2. 常用吸附劑有機(jī)類 活性炭、淀粉、葡萄糖、聚酰胺、大孔 樹脂等無機(jī)類 氧化鋁、硅膠、活性炭、碳酸鈣、 硅藻土等（1）硅膠（SiO2xH2O）第八張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月9結(jié)構(gòu)：內(nèi)部硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)多孔結(jié)構(gòu) 表面有硅醇基氫鍵作用吸附活性中心 游離羥基(I) 鍵合羥基() 硅醚結(jié)構(gòu)() 硅醚結(jié)構(gòu)()沒有吸附活性。 第九張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月10由于硅膠具有弱酸性，能與堿起反應(yīng)，只適用于分離酸性和中性化合物。 堿性氧化鋁 pH 910 適于分析堿性、中性物質(zhì) 中性氧化鋁 pH7.5 適于分析酸性堿性和中性物質(zhì) 酸性氧化鋁 pH

5、 45 適于分析酸性、中性物質(zhì)（2）氧化鋁(3) 聚酰胺 由酰胺聚合而成的高分子物質(zhì)。第十張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月11 酰胺基中的羰基與酚類、黃酮類、酚類中的羥基或羧基形成氫鍵；酰胺基中的氨基與醌類、硝基類中的醌基、硝基形成氫鍵而產(chǎn)生吸附作用。 （4）大孔吸附樹脂 一種不含交換基團(tuán)，具有大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑。理化性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸、堿及有機(jī)溶劑。大孔樹脂可分為非極性和中等極性兩類，在水溶液中吸附力較強且有良好的吸附選擇性，而在有機(jī)溶劑中吸附能力較弱。第十一張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月12硅膠含水量（%）氧化鋁含水量（%）活度級別05152538036101

6、5表10-1 硅膠、氧化鋁的含水量與活度級別的關(guān)系2. 吸附劑的吸附活性： 氧化鋁、硅膠的吸附力的大小, 還與其含水量有較大的關(guān)系：第十二張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月13 活度級數(shù) 含水量 活性 吸附能力 小 少 大 強 大 多 小 弱 加熱除水，活性提高，吸附力加強（活化） 吸水，活性下降，吸附力減弱。 三、色譜條件的選擇 選擇色譜分離條件時，必須從吸附劑、被分離物質(zhì)、流動相(洗脫劑)三方面進(jìn)行綜合考慮。 第十三張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月141. 被分離物質(zhì)的極性被分離物質(zhì)的極性越大,被吸附劑吸附得越牢!常見的化合物極性大小順序: 烷烴 烯烴 醚類 硝基化合物

7、二甲胺 脂類 酮類 醛類 硫醇 胺類 酰胺 醇類 酚類 羧酸類 被分離物質(zhì)的極性與結(jié)構(gòu)的關(guān)系 (1) 基本母核相同 , 基團(tuán)極性愈大 , 分子極性愈大。 基本母核相同 , 極性基團(tuán)數(shù)目愈多 , 分子極性愈大。(2) 分子雙鍵多, 吸附力 。(3) 空間排列 , 影響極性。例如羥基處于能形成分子內(nèi)氫鍵的位置時第十四張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月152. 吸附劑的活性: 吸附劑的活性大，對被測組分的吸附能力強 物質(zhì)的極性 吸附劑活性 大 小 防吸附太牢,難洗脫 小 大 防tR太小,不易分離3. 流動相的極性 流動相極性大，對被測組分的洗脫能力強第十五張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022

8、年6月16常用流動相極性強弱順序: 石油醚 環(huán)己烷 四氯化碳 苯 甲苯 乙醚 氯仿 醋酸乙酯 正丁醇 丙醇 乙醇、甲醇 1 , 說明B+ 較牢地結(jié)合在樹脂上 KB/A 1 , 說明A+ 較牢地結(jié)合在樹脂上 所以KB/A說明了樹脂對A+、 B+兩種離子選擇性交換的能力,故也稱之為選擇性系數(shù)。 第二十一張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月22 用離子交換樹脂分離不同離子時，樣品組分離子與流動相離子在樹脂上產(chǎn)生競爭交換，交換能力弱的離子易被流動相洗脫。選擇性系數(shù)大的離子交換能力強，保留時間長，后流出色譜柱。結(jié)果各種離子按選擇性系數(shù)的大小順序被洗脫。二、離子交換樹脂結(jié)構(gòu)與分類離子交換樹脂是具有網(wǎng)

9、狀立體結(jié)構(gòu)的高分子多元酸或多元堿的聚合物。常用的是聚苯乙烯型離子交換樹脂。它是以苯乙烯和二乙烯苯聚合而成球形網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，聚苯乙烯型磺酸基陽離子交換樹脂的制備：第二十二張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月23磺酸化交聯(lián)劑如果用其它基團(tuán)代替磺酸基，就可以得到一系列陽離子交換樹脂。例如COOH、OH等。這些基團(tuán)上的氫離子可被樣品溶液中的陽離子交換。 RSO3-H+ + X+ RSO3-X+ + H+ 第二十三張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月24陰離子交換樹脂具有與陽離子交換樹脂同樣的有機(jī)骨架，只是在骨架上引入了可離解的堿性基團(tuán)，如季胺基(NR 3OH )等，就成為陰離子交換樹脂。其交換

10、反應(yīng)如下：三、離子交換樹脂的性能 1. 交聯(lián)度: 交換樹脂中 , 交聯(lián)劑(二乙烯苯)的含量為交聯(lián)度 , 以重量百分比表示。第二十四張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月25 交聯(lián)度 網(wǎng)眼 交換速度 離子 選擇性 大 小 慢 小離子 好 小 大 快 大小離子 差 陽離子交換樹脂一般交聯(lián)度8 % 陰離子交換樹脂一般交聯(lián)度4 % 2. 交換容量: 交換容量是指每克干樹脂能參加交換反應(yīng)的活性基團(tuán)數(shù)。一般為110mmol/g。它反映了離子交換樹脂進(jìn)行離子交換反應(yīng)的能力，決定于網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)內(nèi)所含有的酸性或堿性基團(tuán)的數(shù)目。樹脂的結(jié)構(gòu)與組成、溶液的pH等因素都影響交換容量。第二十五張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于

11、2022年6月26第4節(jié) 空間排阻柱色譜法（SEC）利用被測組分分子大小不同，在固定相上選擇性滲透，實現(xiàn)分離。主要用于大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、多糖等的分離。 固定相多孔性凝膠 流動相水凝膠過濾色譜 流動相有機(jī)溶劑凝膠滲透色譜 一、基本原理1分子篩效應(yīng) 第二十六張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月27體積大的組分完全不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)的孔隙中，只能經(jīng)過凝膠顆粒之間的間隙隨流動相最先流出色譜柱；而體積小的組分，可滲入凝膠顆粒內(nèi)的孔隙中，因此在流經(jīng)凝膠顆粒之間的間隙和全部凝膠顆粒的孔隙之后，最后流出；介于大小分子中間的組分，只能進(jìn)入一部分顆粒內(nèi)較大的孔隙，在中間時間段流出。 根據(jù)溶質(zhì)分子大小的不同

12、進(jìn)行分離的現(xiàn)象稱為分子篩效應(yīng)2滲透系數(shù)KP 第二十七張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月28Xm與Xs分別代表在孔外流動相中和凝膠孔隙中同等大小的溶質(zhì)分子。平衡時，兩者濃度之比為滲透系數(shù)根據(jù)空間排阻理論，凝膠孔內(nèi)外同等大小的分子處于擴(kuò)散平衡狀態(tài) Kp僅取決于待測分子尺寸和凝膠孔徑大小，與流動相的性質(zhì)無關(guān)第二十八張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月29在凝膠孔徑一定時，當(dāng)分子大到不能進(jìn)入凝膠所有空隙時（排斥極限）， XS=0，則KP=0；而當(dāng)分子小到能進(jìn)入所有空隙時（全滲透）， XS=Xm，KP=1；分子尺寸在上述兩種分子之間時，能進(jìn)入部分空隙， 0KP1.在高分子溶液中，相同成分的

13、分子尺寸大小與分子量成比例，因此，在一定范圍內(nèi)，KP與分子量相關(guān)，分子量小，KP大。第二十九張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月30排斥極限與全滲透之間對應(yīng)的分子量范圍稱為凝膠的分子量范圍。選擇凝膠時應(yīng)使試樣的分子量落入此范圍。當(dāng)組分的分子量在凝膠的分子量范圍之內(nèi)時，其保留體積與滲透系數(shù)有如下關(guān)系:VS為凝膠孔隙的總體積（固定相體積），Vm為凝膠的粒間體積（流動相體積）二、固定相和流動相第三十張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月31固定相常用的凝膠有葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠和.聚苯乙烯凝膠等。 要選擇對樣品的溶解好，又能潤濕凝膠，粘度要低的溶劑，否則，會限制分子擴(kuò)散而影響分離效果

14、。一般水溶性試樣選水溶液，非水溶性試樣選四氫呋喃、氯仿、甲苯和二甲基甲酰胺等有機(jī)溶劑。流動相第5節(jié) 薄層色譜法（TLC）第三十一張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月32 將固定相均勻地涂鋪在具有光潔表面的玻璃、塑料或金屬板上形成薄層，在此薄層上進(jìn)行色譜分離分析的方法稱為薄層色譜法（TLC）。鋪有固定相的板子稱為薄層板簡稱薄板。在薄層色譜法中使用的流動相又稱為展開劑。 按分離機(jī)制薄層色譜法可分為吸附、離子交換、分配和分子排阻色譜法等。按薄層板的分離效率不同，又可分為經(jīng)典薄層色譜法(TLC)及高效薄層色譜法(HPTLC)。本節(jié)主要討論應(yīng)用最為廣泛的吸附薄層色譜法。操作過程：第三十二張，PPT

15、共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月33特點：設(shè)備簡單，操作方便，分析速度快，分離效率高，靈敏度高，顯色方便，結(jié)果直觀，預(yù)處理簡單。應(yīng)用：定性、藥物雜質(zhì)檢查、純度測定一、基本原理 1.分離過程 將混合組分的試液, 點在鋪了吸附劑的玻璃板一端, 在密閉容器中用適當(dāng)?shù)娜軇?(展開劑、流動相) 展開, 各組分不斷地被吸附, 解吸附 隨展開劑前移, 利用吸附劑對不同組分的吸附能力 (吸附平衡常數(shù))不同, 產(chǎn)生差速遷移, 而達(dá)到分離。第三十三張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月342. 比移值 RfA= a / c RfB = b / c一般要求組分的 值在0.20.8之間。Rf = 0 ，被固定完全

16、吸附, K Rf = 1 ，組分不被固定相吸附, K 0 ) 0 Rf 1第三十四張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月35 比移值是薄層色譜的基本定性參數(shù)，它說明組分在色譜系統(tǒng)中的保留行為。比移值的數(shù)值除與組分的性質(zhì)有關(guān)外，還與薄層板的性質(zhì)(活性等)、展開劑的性質(zhì)(極性、組成等)和溫度有關(guān)。影響Rf 值的因素很多，測量重復(fù)性較差 3相對比移值 在一定條件下，吸附平衡常數(shù)越大，容量因子k就越大，則比移值越小。第三十五張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月36討論對照品與被測組分在完全相同條件下展開，可以消除系統(tǒng)誤差，大大提高重現(xiàn)性和可靠性；對照品可以是后加入純物質(zhì)，也可是樣品中已知組分

17、。相對比移值Rst與組分、對照品性質(zhì)等因素有關(guān)，可以大于或小于1。AB對cab第三十六張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月37二、固定相吸附柱色譜的固定相薄層色譜也可以使用,如硅膠、Al 2O 3等，但粒度比柱色譜更細(xì)。硅膠微帶酸性，適用于酸性及中性物質(zhì)的分離。 薄層色譜用硅膠粒度為40m，硅膠G 硅膠 + 煅石膏（CaSO4） 硅膠H 硅膠(未加任何物質(zhì))硅膠HF254 硅膠+熒光物質(zhì)硅膠GF254 硅膠+煅石膏+熒光物質(zhì)氧化鋁一般適用于堿性物質(zhì)和中性物質(zhì)的分離 第三十七張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月38三、展開劑在吸附薄層色譜法中，展開劑選擇的一般原則與吸附柱色譜法中選擇

18、流動相的原則相同，主要根據(jù)被分離物質(zhì)的極性、吸附劑的活性以及展開劑本身的極性來選則。第三十八張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月39 實驗中，一般先選擇單一溶劑展開，對難分離組分，則需使用二元、三元甚至多元的溶劑系統(tǒng)。 在多元展開劑中占比例較大的主要溶劑起溶解樣品和基本分離的作用，占比例較小的溶劑起調(diào)整Rf 值、改善分離度和對某些組分的選擇性作用。 如某一物質(zhì)在用苯作展開劑時，移動距離太小，說明展開劑的極性太小，此時可以加入一定量的乙醇等極性大的溶劑。再視分離的效果適當(dāng)改變?nèi)軇┑呐浔?，如?乙醇為91、82或73等。必要時甚至還要加一些酸或堿。一般希望Rf值在0.20.8之間較為滿意。

19、第三十九張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月40四、操作方法1. 薄層板制備 薄層板分為硬板與軟板。軟板的制備是直接將吸附劑置于玻璃板上并使成為一均勻薄層便制成了一塊軟板。硬板的制備需要以下幾個步驟： 載板的準(zhǔn)備。 勻漿的制備：制備勻漿時有時需要加一些粘合劑，常用粘合劑有煅石膏、羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）等。第四十張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月41煅石膏：吸附劑的9-15%左右羧甲基纖維素鈉CMC-Na：0.5-1%水溶液 例如，取一定量的硅膠H放入研缽中，加入3倍量的含有0.3%0.7%羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）的水溶液，朝同一方向研磨成均勻稀糊狀. 鋪板 手工涂鋪

20、法 機(jī)械涂鋪法 第四十一張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月42活化：將鋪好的薄層板先涼干，再在105110進(jìn)行加熱活化，活化的程度等要根據(jù)樣品的性質(zhì)決定。2.點樣 （1）樣品溶液的制備 應(yīng)盡量避免用水作溶劑，因為水溶液斑點容易擴(kuò)散，且不易揮發(fā)。一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等揮發(fā)性有機(jī)溶劑，最好用與展開劑極性相似的溶劑。水溶性樣品可先用少量水溶解，再用甲醇或乙醇稀釋定容。第四十二張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月43（2）點樣量點樣量的多少視薄層的性能及顯色劑的靈敏度等而定，在檢測器靈敏度足夠時，應(yīng)降低點樣量。點樣量太多，展開后會出現(xiàn)斑點過大或拖尾等現(xiàn)象，而影響分離效果。點樣體積

21、一般在幾到幾十微克（ 1 10l）, 點樣量太大, 斑易拖尾, 影響分離效果。(3)點樣方法點樣方式：接觸式點樣與噴霧式點樣點樣形狀；點狀、條狀點樣點樣器具微量進(jìn)樣器、定量毛細(xì)管；底距： 1.52cm點距：0.5 1cm原點直徑： 23 mm。（邊點邊熱風(fēng)吹）第四十三張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月44第四十四張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月45起始線第四十五張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月463.展開 將點好樣的薄層板浸入展開劑中，展開劑借薄層板上固定相的毛細(xì)作用攜帶樣品組分在薄層板上遷移一定距離的過程稱為展開。（1）展開裝置 常用的展開裝置有直立型的單槽色譜缸

22、和雙槽色譜缸、圓形色譜缸、臥式色譜缸等。 第四十六張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月47(2)展開方式 一般展開方式 ：上行、下行、雙向等展開距離：615cm注意點： 展開劑浸薄層板下端0.5cm, 不能浸住起始線, 層析缸應(yīng)密閉。 先飽和1530分鐘,再展開,防止邊緣效應(yīng)。 第四十七張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月48 邊緣效應(yīng)是指同一物質(zhì)的色譜斑點，在薄層板上兩邊緣部分的Rf值大于中間部分的Rf值的現(xiàn)象。 這是由于色譜缸內(nèi)溶劑蒸氣未達(dá)飽和，造成展開劑的蒸發(fā)速率在薄層板兩邊與中間部分不等。展開劑中極性較弱和沸點較低的溶劑在邊緣揮發(fā)的快些，致使邊緣部分的展開劑中極性溶劑比例增

23、大，故Rf值相對變大。 第四十八張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月49原點12雙向展開4.斑點定位 有色化合物直接定位第四十九張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月50無色化合物紫外燈下檢出熒光板上有暗斑顯色劑定位噴霧或浸漬顯色蒸氣顯色顯色劑有通用型和專用型兩種。通用型顯色劑有碘、硫酸溶液、等。碘使許多化合物顯色，如生物堿、氨基酸衍生物、肽類、脂類及皂甙等。它的最大特點是與物質(zhì)的反應(yīng)是可逆的，當(dāng)?shù)馍A揮去后，斑點便于進(jìn)一步處理。硫酸能對大部分有機(jī)化合物顯色，但它是破壞性顯色劑。斑點有熒光物理撿出法化學(xué)撿出法第五十張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月51 專用顯色劑是指對某個或

24、某一類化合物顯色的試劑，例如茚三酮是氨基酸的專用顯色劑，。羧酸可用酸堿指示劑作顯色劑，含酚羥基物質(zhì)可噴三氯化鐵鐵氰化鉀試劑進(jìn)行顯色。 顯色劑直接由噴霧器噴灑在硬板上，立即顯色或加熱至一定溫度顯色。五、定性分析1. 利用Rf 值定性或相對比移值Rst（在同一塊板上）2. Rf 值+斑點顏色特征（原位化學(xué)反應(yīng)）;3. 多種展開劑體系展開進(jìn)行驗證;4. 與其他技術(shù)聯(lián)用。第五十一張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月52六、定量分析（一）洗脫法 薄層分離 取下斑點 洗脫 離心 取上清液進(jìn)行測定 （二）薄層掃描法 又稱原位定量薄層掃描法 1.基本原理第五十二張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月

25、53 用一束一定波長、一定強度的紫外或可見光對薄層板進(jìn)行掃描，測定薄層板上的樣品斑點對光的吸收強度或斑點經(jīng)激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光強度，所得關(guān)系曲線下的面積與色譜斑點中待測物質(zhì)的濃度或量成正比 。薄層掃描法的分類掃描方式吸收法熒光法反射法透射法大多用于凝膠色譜非透明界質(zhì)薄層板第五十三張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月54方程是薄層掃描法定量的依據(jù)。Kubelka-Munk古柏爾卡-曼克第五十四張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月55 通常在薄層掃描中都是以空白板為基準(zhǔn)，測定相對透光率及相對反射率來計算薄層色譜斑點的吸光度。透射法 空白薄層和樣品斑點的透射率分別為第五十五張，PPT共六十

26、五頁，創(chuàng)作于2022年6月56 反射法示意圖 I0為照射光強度；j0為空白板反射光強度； j為斑點處反射光強度空白薄層和樣品斑點的反射率分別為斑點的吸光度第五十六張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月57SX=20SX=10SX=0根據(jù)Kubelka-Munk方程，色譜斑點中待測物質(zhì)的吸光度A與被測物質(zhì)存在嚴(yán)格的定量關(guān)系，但不是一種直線關(guān)系。因此，薄層掃描定量不遵從于Lambert-Beer定律。 第五十七張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月58SX=0SX=10SX=20為方便定量，必須對其曲線進(jìn)行校直。 第五十八張，PPT共六十五頁，創(chuàng)作于2022年6月59Kubelka-Munk曲線的校直： 日本島津CS系列的薄層色譜掃描儀均有線性補償器，其工作原理即根據(jù)Kubelka-Munk方程式用電路系統(tǒng)將彎曲的曲