1、原料奶新鮮度和摻雜異物檢驗(yàn)方法水解蛋白的檢出 YLNB 1.151. 器材1.1 量筒10 mL、100 mL、250 mL1.2 具塞刻度比色管10 mL1.3 小燒杯50 mL1.4 移液管1 mL、5 mL1.5 濾紙11 cm1.6 比色管架1.7 容量瓶（棕色）250 mL、100 mL1.8 玻璃棒1.9 小牛角勺1.10 吸水紙2. 試劑2.1 打底標(biāo)樣（簡(jiǎn)稱“底標(biāo)”）配制：含3 水解蛋白粉奶樣配制方法，用精密天平（萬(wàn)分之一感量），用50 mL潔凈干燥小燒杯稱取水解蛋白粉0.750 g，然后用自產(chǎn)新鮮未摻假牛奶少量多次（每次30-40 mL鮮奶）溶解，并無(wú)損轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶

2、中，最后用同種鮮奶定容至250 mL刻度，蓋上瓶塞，反復(fù)顛倒振搖50次以上，以保證充分溶解并混勻。2.2 5%汞（）鹽溶液：用潔凈小燒杯在天平上稱取硝酸汞（AR級(jí)）試劑12.5 g，小心地用10 mL量筒量取4 mL濃硝酸倒入小燒杯中，進(jìn)而加蒸餾水溶解并無(wú)損轉(zhuǎn)移至250 mL棕色容量瓶中（用少許蒸餾水沖洗小燒杯3-4次均轉(zhuǎn)移至容量瓶中），最后用蒸餾水定容至250 mL，搖勻。2.3 飽和苦味酸溶液：用小牛角勺取苦味酸兩小勺，小心地置入100 mL棕色容量瓶中，用洗瓶沖洗試劑至瓶下部，再加入蒸餾水至刻度，反復(fù)振搖50次，并放置過(guò)夜使之達(dá)到溶解平衡即為飽和溶液（注意觀察容量瓶底部始終應(yīng)有固體試劑殘

3、留才為飽和狀態(tài)）。3.方法取10 mL具塞比色管若干支，編號(hào)后置于比色管架上，用1 mL移液管吸取1.00 mL“底標(biāo)”奶液注入每支比色管中，再用5ml移液管吸取待測(cè)奶樣4.00 mL注入加標(biāo)比色管中，注意記錄樣號(hào)與管號(hào)對(duì)應(yīng)關(guān)系，然后蓋塞充分振蕩混勻樣品。用另一支5 mL移液管吸取5 %硝酸汞溶液5.00 mL依次加入各樣品管中，蓋塞搖勻，等待5分鐘（在此期間，準(zhǔn)備好與比色管相同個(gè)數(shù)的50 mL潔凈小燒杯，折好濾紙置各燒杯上）后，將各比色管中奶樣倒入濾紙中進(jìn)行無(wú)漏斗過(guò)濾操作，約2分鐘后，各燒杯中濾液即達(dá)5 mL以上，此時(shí)棄去濾紙及其內(nèi)容物，用另一5 mL移液管分別移取濾液各2.00 mL分別注

4、入另一組（即比色管架上已備好的另一排10mL比色管）中，再用一支5 mL移液管吸取2.00 mL飽和苦味酸溶液分別加入各個(gè)盛濾液比色管中，蓋塞搖勻，然后在白色或黑白相間或透明空間背景下觀察混濁情況，若有淡黃色渾濁出現(xiàn)即為陽(yáng)性。操作時(shí)以未摻假鮮奶做對(duì)照，即移取該奶樣4.00 mL注入編為“0”號(hào)的比色管中，加入5 mL汞鹽試液，以下操作同于樣品檢測(cè)。4. 檢測(cè)原理及有關(guān)說(shuō)明4.1 加入汞鹽即可使乳中蛋白質(zhì)變性凝聚，通過(guò)過(guò)濾操作即可除去，但水解蛋白與汞鹽不發(fā)生沉淀反應(yīng)，通過(guò)該步驟即可實(shí)現(xiàn)乳中固有蛋白與人為加入的蛋白質(zhì)成分分離。4.2 因苦味酸具有比汞鹽更強(qiáng)的沉淀作用，其與水解蛋白中的堿性基團(tuán)（氨基）作用即可形成難溶的有機(jī)鹽類沉淀，故使體系出現(xiàn)渾濁，當(dāng)水解蛋白粉在奶樣中含量高于1 %時(shí)，此操作步驟則會(huì)較快出現(xiàn)淺黃色沉淀析出的現(xiàn)象。4.3 任何難溶物均具有與溫度密切相關(guān)的溶度積常數(shù)，水解蛋白粉與苦味酸的作用也不例外，操作中給待檢樣中加入“底標(biāo)奶樣”是為了提高檢測(cè)方法的靈敏度，即通過(guò)該措施可以達(dá)到含量萬(wàn)分之五水解蛋白粉的奶樣穩(wěn)定檢出陽(yáng)性結(jié)果的目的。4.4苦味酸性狀：苦味酸化學(xué)名稱為2，4，6-三硝基苯酚，為黃色晶體或粉末，苦味有毒，密度1.763，熔點(diǎn)122，不易吸濕，難溶于冷水，較易溶于熱水、乙醇、氯仿、苯和乙醚。具有強(qiáng)烈爆炸性，是軍事上最早使用的一種烈性炸藥。易