微生物實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)操作指導(dǎo)書(shū)(包含無(wú)菌室、樣品準(zhǔn)備、培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)操作、廢棄物、報(bào)告及儀器校準(zhǔn)等)_第1頁(yè)
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1、微生物實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)操作指導(dǎo)(包含無(wú)菌室、樣品準(zhǔn)備、培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)操作、廢棄物、報(bào)告及儀器校準(zhǔn)等)目錄一、無(wú)菌室的要求二、樣品準(zhǔn)備三、培養(yǎng)基與試劑制備的制備和殺菌四、微生物實(shí)驗(yàn)操作五、微生物實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告七、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的校準(zhǔn)、維護(hù)和性能驗(yàn)證一. 微生物無(wú)菌室基本要求及管理1.1 無(wú)菌室的基本建設(shè)要求1.1.1 根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室所涉及的生物安全等級(jí),無(wú)菌室的設(shè)計(jì)和建設(shè)應(yīng)符合GB 50364和GB 19489的相關(guān)要求。1.1.2 無(wú)菌室大小應(yīng)能夠滿足檢驗(yàn)工作的需要,內(nèi)墻為淺色,地面和地面應(yīng)光滑,墻壁與地面、天花板連接處應(yīng)呈凹弧形,無(wú)縫隙,無(wú)死角,易于清潔和消毒。1.1.3 無(wú)菌室入口處應(yīng)

2、設(shè)置緩沖間,緩沖間內(nèi)應(yīng)安裝非手動(dòng)式開(kāi)關(guān)的洗手盆,并可有毛巾。緩沖間應(yīng)有足夠的面積以保證操作人員更換工作服及鞋帽。1.1.4 無(wú)菌室內(nèi)工作臺(tái)的高度約80cm,工作臺(tái)應(yīng)保持水平,工作臺(tái)二應(yīng)無(wú)滲漏,耐腐蝕,易于清潔、消毒。1.1.5 無(wú)菌室內(nèi)光照應(yīng)分布均勻,工作臺(tái)面的光照度應(yīng)不低于540Ix。1.1.6 無(wú)菌室應(yīng)具備適當(dāng)?shù)耐L(fēng)和溫度調(diào)節(jié)的條件。無(wú)菌室的推薦溫度為20,相對(duì)濕度為40%60%。1.1.7 緩沖間及操作室內(nèi)均應(yīng)設(shè)置能達(dá)到空氣消毒效果的紫外燈或其他適宜的消毒裝置。1.2 無(wú)菌室的管理1.2.1 無(wú)菌室在使用前和使用后應(yīng)進(jìn)行有效的消毒。1.2.2 無(wú)菌室的滅菌效果應(yīng)至少每?jī)芍茯?yàn)證一次。1.2

3、.3 應(yīng)制定清潔、消毒、滅菌、使用和應(yīng)急處理程序。1.2.4 應(yīng)記錄環(huán)境檢測(cè)結(jié)果,并歸檔保存。1.2.5 不符合規(guī)定時(shí)應(yīng)立即停止使用1.3 微生物實(shí)驗(yàn)室消毒處理方法1.3.1 無(wú)菌室1.3.1.1 紫外線消毒(1)在室溫20C 25時(shí),220V30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)70W/cm2,低于此值時(shí)應(yīng)更換,適當(dāng)數(shù)量的紫外燈,確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。(2)紫外線消毒時(shí),無(wú)菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔干燥。(3)在無(wú)人條件下,可采取紫外線消毒,作用時(shí)間應(yīng)30min,室內(nèi)濕度20%或40%、相對(duì)濕度大于60%時(shí),應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)照射時(shí)間。(4)用紫外線消毒物品表面時(shí),應(yīng)使

4、照射表面受到紫外線的直接照射,且應(yīng)達(dá)到足夠的照射劑量。(5)人員在關(guān)閉紫外燈至少30min后方可入內(nèi)作業(yè)。(6)按照GB 15981的規(guī)定,評(píng)價(jià)紫外線的消毒與殺菌效果。1.3.1.2 臭氧消毒(1)封閉無(wú)菌室內(nèi),無(wú)人條件下,采用20mg/m3濃度的臭氧,作用時(shí)間應(yīng)30min。消毒后室內(nèi)臭氧濃度0.2mg/m3時(shí)方可入內(nèi)作業(yè)。(2)按照GB/T 18202的規(guī)定,檢測(cè)室內(nèi)臭氧的濃度。1.3.1.3 無(wú)菌室空氣滅菌效果驗(yàn)證方法(沉降法)(1)在消毒處理后與開(kāi)展檢驗(yàn)活動(dòng)之前期間采樣。(2)取樣點(diǎn)的選擇應(yīng)基于人員流量情況和做試驗(yàn)的頻率。一般情況下,無(wú)菌室面積30m2時(shí),從所設(shè)定的條對(duì)角線選取3點(diǎn),即中

5、心1點(diǎn),兩端各距離墻1m處各取1點(diǎn);無(wú)菌室面積30m2時(shí),選取東西北中5點(diǎn),其中東點(diǎn)、南點(diǎn)、西點(diǎn)、北點(diǎn)均距離墻lm.1.3.2 生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo):裝配與包裝車(chē)間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)2500CFU/m3工作臺(tái)表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)20CFU/cm2工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)300CFU/只手,并不得檢出致病菌。二. 樣品的準(zhǔn)備食品生產(chǎn)線每?jī)尚r(shí)取樣1次,異常停機(jī)時(shí)再取一次。每天取樣12瓶,然后在12瓶中隨機(jī)抽取3瓶做微生物檢測(cè)。做微生物之前,在緩沖間用75%的酒精對(duì)樣品外表進(jìn)行殺菌。之后送到傳遞窗口處。避免樣品對(duì)無(wú)菌間造成二次污染。2.1 工作臺(tái)面與工人手表面采樣與測(cè)試方法2.1.1樣品采集工作臺(tái):將

6、經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5cm*5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面,用以浸有滅菌生理鹽水的棉簽在其內(nèi)涂抹10次,然后剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。工人手:被檢人五指并攏,用以浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面,從指尖到指端來(lái)回涂擦10次,然后剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。2.1.2 細(xì)菌菌落總數(shù)檢測(cè)將已采集的樣品在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室,每支采樣管充分混勻后取1mL樣液,放入滅菌平皿內(nèi),傾注營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,每個(gè)樣品平行接種兩個(gè)平皿,置35土2培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。2.2 空氣采樣與測(cè)試方法2.2.1 樣品采集在動(dòng)態(tài)下進(jìn)行。室內(nèi)面

7、積不超過(guò)30m3,在對(duì)角線上設(shè)里中外三點(diǎn):里、外點(diǎn)位置距墻1m;室內(nèi)面積超過(guò)30m3,設(shè)東西南北中5點(diǎn),周?chē)?點(diǎn)距墻1m。采樣時(shí),將含營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平板(真徑9cm)置采樣點(diǎn)(約桌面高度),打開(kāi)平皿蓋,使平板在空氣中暴露5min。2.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)在采樣前將準(zhǔn)備好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置35土2培養(yǎng)24h,取出檢查有無(wú)污染,將污染培養(yǎng)基剔除。將已采集的培養(yǎng)基在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室,于35土2培養(yǎng)48h,觀察結(jié)果,計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。三、培養(yǎng)基與試劑制備的制備和殺菌3.1 試劑的配制3.1.1 無(wú)菌生理鹽水的配制用精確到0.01g的電子稱(chēng)稱(chēng)取8.5g微生物檢測(cè)專(zhuān)用鹽,在100mL燒杯中用二次凈化水溶解

8、后,轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈化水定容到1000mL備用。3.1.2 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配制稱(chēng)取35g營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用二次凈化水在250mL的燒杯中溶解后,轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈化水定容到1000mL。然后用250mL的錐形瓶分裝備用。3.2 試劑的分裝3.2.1 生理鹽水的分裝將配置好的生理鹽水用500mL的量筒按照每個(gè)錐形瓶裝225mL的量進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶,并用牛皮紙將瓶口包扎好。3.2.2 營(yíng)養(yǎng)瓊脂的分裝將配置好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂用500mL的錐形瓶裝進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶,并用牛皮紙將瓶口包扎好。3.2.3 孟

9、加拉紅瓊脂的分裝將配置好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂用500mL的錐形瓶裝進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶,并用牛皮紙將瓶口包扎好。3.2.4 乳糖膽鹽肉湯的分裝將配置好的乳糖膽鹽用10mL的量管分裝在玻璃試管中,試管規(guī)格為15*150mm,錐形瓶裝進(jìn)行分裝。分裝好用乳膠錐形瓶塞塞好錐形瓶,并用牛皮紙將瓶口包扎好。3.3 培養(yǎng)基和試劑滅菌3.3.1 培養(yǎng)基通常應(yīng)采用高壓濕熱滅菌法,121滅菌15min,特殊培養(yǎng)基按使用者的特殊要求進(jìn)行滅菌(如含糖培養(yǎng)基,115滅菌20min。)3.3.2 部分培養(yǎng)基(如嗜鹽瓊脂培養(yǎng)基,膽硫乳培養(yǎng)基等),只能煮沸滅菌。3.3.3 對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基或添加物質(zhì),應(yīng)采用膜過(guò)濾方

10、法進(jìn)行過(guò)濾除菌。3.3.4 即用型試劑不需滅菌,應(yīng)參見(jiàn)相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)或供應(yīng)商使用說(shuō)明,直接使用。3.4 試劑的殺菌3.4.1 生理鹽水的殺菌將分裝完畢的生理鹽水,放在殺菌釜內(nèi),擺放好。然后關(guān)上殺菌釜, 打開(kāi)電源,升溫到80時(shí),打開(kāi)放氣閥進(jìn)行放氣,帶放氣閥門(mén)噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121開(kāi)始計(jì)時(shí),殺菌30min停止加熱,進(jìn)行自然冷卻,待壓力回歸零時(shí),打開(kāi)放氣閥門(mén)進(jìn)行放氣。等待條菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜,將生理鹽水取出送往微生物操作間的小窗內(nèi)。3.4.2 營(yíng)養(yǎng)瓊脂的殺菌將分裝完畢的營(yíng)養(yǎng)瓊脂,放在殺菌釜內(nèi),擺放好。然后關(guān)上殺菌釜,打開(kāi)電源,升溫到80時(shí),打開(kāi)放氣閥進(jìn)行放氣,帶放氣閥門(mén)

11、噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121開(kāi)始計(jì)時(shí),殺菌30min停止加熱,進(jìn)行自然冷卻,待壓力回歸零時(shí),打開(kāi)放氣閥門(mén)門(mén)進(jìn)行放氣。等待殺菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜,將生理鹽水取出送往微生物操作間預(yù)處理間的水浴鍋,進(jìn)行保溫,水浴鍋的溫度46土1.3.5 培養(yǎng)基的配制3.5.1 孟加拉紅瓊脂培養(yǎng)基的配制稱(chēng)取36g營(yíng)養(yǎng)瓊脂用二次凈化水在250mL的燒杯中溶解后,轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈化水定容到1000mL。然后用250mL的錐形瓶分裝備用。3.5.2 乳糖膽鹽肉湯的配制稱(chēng)取36g營(yíng)養(yǎng)瓊脂用二次凈化水在250mL的燒杯中溶解后,轉(zhuǎn)移到1000mL的無(wú)色透明的容量瓶并用二次凈

12、化水定容到1000mL。然后用250mL的錐形瓶分裝備用。3.6 培養(yǎng)基的殺菌3.6.1 孟加拉紅瓊脂的殺菌將分裝完畢的營(yíng)養(yǎng)瓊脂,放在殺菌釜內(nèi),擺放好。然后關(guān)上殺菌釜,打開(kāi)電源,升溫到80時(shí),打開(kāi)放氣閥進(jìn)行放氣,帶放氣閥門(mén)噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121開(kāi)始計(jì)時(shí),殺菌30min停止加熱,進(jìn)行自然冷卻,待壓力回歸零時(shí),打開(kāi)放氣閥門(mén)進(jìn)行放氣。等待殺菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜,將生理鹽水取出送往微生物操作間預(yù)處理間的水浴鍋,進(jìn)行保溫,水浴鍋的溫度46士1。3.6.2 乳糖膽鹽肉湯的殺菌將分裝完畢的乳糖膽鹽發(fā)酵管,放在殺菌釜內(nèi),擺放好。然后關(guān)上殺菌金,打開(kāi)電源,升溫到80時(shí),打開(kāi)放氣閥進(jìn)

13、行放氣,帶放氣閥門(mén)噴出大量水蒸氣時(shí)關(guān)上放氣閥。升溫至121開(kāi)始計(jì)時(shí),殺菌30min停止加熱,進(jìn)行自然冷卻,待壓力回歸零時(shí),打開(kāi)放氣閥門(mén)進(jìn)行放氣。等待殺菌釜內(nèi)氣壓全部排凈完后打開(kāi)殺菌釜,將生理鹽水取出送往微生物操作間的小窗內(nèi)。3.7 培養(yǎng)皿和吸量管的殺菌培養(yǎng)皿將培養(yǎng)基處理完,用84消毒液浸泡30min后,用洗潔精清洗干凈后用干燥箱烘干(160、30min)后,用牛皮包扎好,在160干熱殺菌2小時(shí)。1mL的吸量管也用84消毒液浸泡30min后,用洗潔精清洗干凈后用干燥箱烘干(160、30min)后,用牛皮紙包扎好,在160干熱殺菌2小時(shí)。3.8 器具和設(shè)備滅菌3.8.1 濕熱滅菌:采用高壓滅菌器,

14、121滅菌20min,適用于玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等按照GB 15981的規(guī)定,評(píng)價(jià)高壓滅菌器的殺菌效果。3.8.2 干熱滅菌:采用干燥箱滅菌,160滅菌2h,180滅菌1h,適用于玻璃器皿,不銹鋼器具等。3.8.3 液體消毒劑消毒:使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑對(duì)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面進(jìn)行消毒??砂凑誈B 15981的規(guī)定,評(píng)價(jià)自配或商業(yè)消毒劑的消毒效果;可按照ISO 18593,監(jiān)測(cè)工作臺(tái)面、器具或設(shè)備表面的消毒效果。3.9 培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題3.9.1 培養(yǎng)基不能凝固的原因制備過(guò)程中過(guò)度加熱;低pH值造成培養(yǎng)基酸解;稱(chēng)量不正確;瓊脂未完全溶解;培養(yǎng)基成分未充分混勻。3.9.2 培

15、養(yǎng)基pH值不正確的原因制備過(guò)程中過(guò)度加熱;水質(zhì)不佳;外部化學(xué)物質(zhì)污染;測(cè)定pH值時(shí)溫度不正確;pH計(jì)未正確校準(zhǔn);脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差。3.9.3 培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀的原因制備過(guò)程中過(guò)度加熱;水質(zhì)不佳;脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;pH未正確控制。3.9.4 培養(yǎng)基顏色異常的原因制備過(guò)程中過(guò)度加熱;水質(zhì)不佳;脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;pH不正確;外來(lái)污染。3.9.5 培養(yǎng)基出現(xiàn)抑制重復(fù)性差制備過(guò)程中過(guò)度加熱;水質(zhì)不佳;脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;使用成分不正確,如:成分稱(chēng)量不準(zhǔn),添加物濃度不正確。3.9.6 培養(yǎng)基選擇性差的原因制備過(guò)程中過(guò)度加熱;脫水培養(yǎng)基質(zhì)量差;配方使用不對(duì);添加成分不正確,如加入添加成分時(shí)培養(yǎng)基過(guò)熱或添加濃度錯(cuò)

16、誤。四、微生物實(shí)驗(yàn)操作4.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備4.1.1 無(wú)菌操作臺(tái)和微生物操作間殺菌消毒。每次做實(shí)驗(yàn)之前,用75%的酒精對(duì)無(wú)菌操作臺(tái)和微生物操作間進(jìn)行噴灑消毒,然后開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)上面的紫外燈對(duì)無(wú)菌操作臺(tái)殺菌30min以上。同時(shí),開(kāi)啟微生物操作間紫外燈對(duì)空氣殺菌消毒30min以上。4.1.2 微生物檢驗(yàn)人員的工作服、帽、口罩和鞋子的殺菌。微生物檢驗(yàn)人員的工作服、帽、口罩和鞋子在實(shí)驗(yàn)之前,在微生物操作緩沖間用紫外燈殺菌30min以上。操作人員在進(jìn)入微生物操作間時(shí),先用香皂清洗手,然后用消毒好的毛巾擦干手,再用75%的酒精對(duì)手進(jìn)行噴灑殺菌。4.1.3 營(yíng)養(yǎng)瓊脂和孟加拉紅培養(yǎng)基外表面的殺菌。營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基

17、在拿進(jìn)微生物操作間時(shí),先用75%的酒精噴酒消毒,因?yàn)殄F形瓶外表面容易長(zhǎng)菌,同時(shí)在打開(kāi)錐形瓶塞是用酒精燈對(duì)瓶塞外表烤邊進(jìn)行殺菌。微生物操作時(shí),倒平板時(shí),培養(yǎng)皿應(yīng)該靠近酒精燈,同時(shí)每次對(duì)錐形瓶口烤下。4.1.4 乳糖膽鹽發(fā)酵口和樣品的口殺菌。五、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理5.1 對(duì)于培養(yǎng)物及其污染的物品(如斜面,用過(guò)的吸量管、細(xì)菌培養(yǎng)皿等),應(yīng)使用適當(dāng)濃度的自配或商業(yè)液體消毒劑(參照D.1)對(duì)處理后一定時(shí)間,或121高壓滅菌至少30min,或者其他有效處理措施。將處理物倒入特殊標(biāo)識(shí)的垃圾袋內(nèi),直接送到指定地點(diǎn)。5.2 對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體及相關(guān)廢棄物,按照GB 14925的規(guī)定進(jìn)行處理。5.3 記錄并保留廢棄物

18、和處理的記錄。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告6.1 菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)可用肉眼觀察,必要時(shí)用放大鏡,記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。選取南落數(shù)在30CF到300CFU之間、無(wú)基延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù),低于30CFU平板記錄具體菌落數(shù),大于300CFU的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí),則不宜采用,而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù):若狀菌落不到平板的一半,而其余一半菌落分布又很均勻,即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2,代表一個(gè)平板菌落數(shù)。6.2 菌落總數(shù)的計(jì)算方法若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi),計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值,再將平均

19、值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),作為每g(mL)樣品中菌落總數(shù)的結(jié)果。若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi),按公式計(jì)算。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)大于300CFU,則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),其他平板可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)小于30CFU,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均不在30CFU300CFU之間,其中一部分小于30CFU或大于300CFU,則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。6.3

20、 菌落總數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)小于100CFU時(shí),按照“四舍五入”原則修約,以整數(shù)報(bào)告。菌落數(shù)大于或等于100CFU時(shí),第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約:取前2位數(shù)字,后面用0代替位數(shù):也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計(jì)數(shù),則報(bào)告菌落蔓延。若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng),則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。6.4 霉菌和醇母菌計(jì)數(shù)可用肉眼觀察,必要時(shí)用放大鏡,記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。選取菌落數(shù)在10CFU到150CFU的平板、根據(jù)菌落形態(tài)分別計(jì)數(shù)霉菌和醉母數(shù)。霉菌蔓延生長(zhǎng)覆蓋整個(gè)平板的可記錄為多不可數(shù)。菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。6.5 霉菌和醇母菌菌落總數(shù)的計(jì)算方法計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)稀釋信數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),其他平板可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)小于10

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