1、空氣潔凈技術(shù)與消毒滅菌的驗(yàn)證許鐘麟工作室9/15/20221一、消毒與滅菌之不同消毒： 用物理或化學(xué)方法殺死部分真菌、細(xì)菌繁殖體和部分病原微生物，但不一定殺死芽孢。滅菌： 殺死包括芽孢在內(nèi)的所有微生物。9/15/20222二、在藥廠消毒、滅菌的對(duì)象人體物件、表面空氣9/15/20223三、主要消毒、滅菌方法人體： 手消毒、穿無(wú)菌服。物體、表面： 化學(xué)藥劑消毒，一定要一種以上。 無(wú)法消毒的地方也可以煙熏 濕熱滅菌 干熱滅菌（進(jìn)入空氣要通過高效） 輻射滅菌（考慮對(duì)象是否適用，紫外不接受） 環(huán)氧乙烷滅菌（其他辦法不能用時(shí)） 過濾滅菌（無(wú)法在最終容器滅菌時(shí)）9/15/20224三、主要消毒、滅菌方法（

2、續(xù)）空氣見下表1 ：消毒方式消毒原理消毒效率單區(qū)靜電高壓電場(chǎng)形成電暈，產(chǎn)生自由電子和離子，因碰撞和吸附到塵菌上使其帶電，在集塵極上沉積下來(lái)被除去。對(duì)較大顆粒和纖維效果差，會(huì)引起放電。優(yōu)點(diǎn)是能清除塵菌而阻力小，缺點(diǎn)是清洗麻煩、費(fèi)時(shí)，必須有前置過濾器，可能產(chǎn)生臭氧和氮氧化物，可形成二次污染。50%（某些產(chǎn)品測(cè)試只有20左右）等離子氣體在加熱或強(qiáng)電磁場(chǎng)作用下產(chǎn)生高度電離的電子云，其中活性自由基和射線對(duì)微生物有很強(qiáng)的廣譜殺滅作用。無(wú)法去除塵粒。66.7負(fù)離子在電場(chǎng)、紫外、射線和水的撞擊下使空氣電離而產(chǎn)生，68.20%可吸附塵粒等變成重離子而沉降，缺點(diǎn)是有二次揚(yáng)塵，在空調(diào)系統(tǒng)中用處不大。蒼術(shù)熏中藥73.

3、40%9/15/20225三、主要消毒、滅菌方法（續(xù)）消毒方式消毒原理消毒效率納米光催化75% （某些產(chǎn)品測(cè)試結(jié)果只有30幾，甚至出現(xiàn)負(fù)值）在日光、紫外照射下，催化活性物質(zhì)表面氧化分解揮發(fā)性有機(jī)蒸氣或細(xì)菌，轉(zhuǎn)化為CO2和水。要求被消毒空氣必須與催化物質(zhì)充分接觸，要一定時(shí)間，隨表面附塵效果大減，一定要有前置過濾器。紫外照射還產(chǎn)生臭氧。實(shí)驗(yàn)中甚至出現(xiàn)負(fù)值。甲醛熏化學(xué)藥劑，已宣布致癌77.42%紫外照應(yīng)用于空調(diào)系統(tǒng)由于空氣流速高，細(xì)菌受照劑量小，效果差，只能除菌不除塵，有臭氧發(fā)生。WHO、歐盟GMP都宣布其為通常不被接受的方法，更不能作最終滅菌。82.90%電子滅菌燈物理方法85%雙區(qū)靜電電離極和集

4、塵極分開90%（某些產(chǎn)品測(cè)試只有約60）9/15/20226三、主要消毒、滅菌方法（續(xù)）消毒方式消毒原理消毒效率臭氧淡藍(lán)色氣體，較強(qiáng)氧化作用，其分解產(chǎn)生的氧原子可以氧化、穿透細(xì)菌細(xì)胞壁而殺死細(xì)菌。廣譜殺菌但不能除塵，室內(nèi)必須無(wú)人，損壞多種物品，對(duì)表面微生物作用小。對(duì)人的呼吸道有危害。報(bào)導(dǎo)不主張用。91.82%物理阻隔方法，常規(guī)風(fēng)口上使用阻力僅10Pa上下，是粗效的1/3，但效率達(dá)高中效（對(duì)0.5m微粒效率達(dá)7080以上）重量輕，安裝方便，無(wú)二次污染9298超低阻高中效過濾器高效過濾器物理阻隔，無(wú)副作用，一次性，衛(wèi)生部消毒規(guī)范指出潔凈室空氣滅菌只用空氣凈化過濾方式。阻力大見下表29/15/202

5、27三、主要消毒、滅菌方法（續(xù)）年份菌種大小m效率600.010.01299.999（0.1m/s濾速）66199.999（0.2m/s濾速）0.0940.1799.97（0.3m/s濾速）199.9993（0.3m/s濾速）680.050.4599.97（0.5m/s濾速）770.5199.97（0.1m/s濾速）771100（0.13m/s濾速）2004199.999999.99999（濾速為cm量級(jí)）表29/15/20228細(xì)菌對(duì)濾材的穿透對(duì)于細(xì)菌和濾材特性缺乏了解的人，總是擔(dān)心“活”的細(xì)菌能否貫穿濾材的問題。有人從用過的高效過濾器上取下部分濾材，把它精密置于培養(yǎng)基上面進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)果如表

6、3所列，可見在過濾器背面的濾材培養(yǎng)不出細(xì)菌。因此，細(xì)菌的貫穿問題也就被否定了。此外，培養(yǎng)結(jié)果還說明，在預(yù)過濾器迎風(fēng)面上部附著的細(xì)菌數(shù)，達(dá)到整個(gè)氣流中的細(xì)菌數(shù)的90，高效過濾器迎風(fēng)面上附著的細(xì)菌數(shù)僅占10。這也說明，由于細(xì)菌等價(jià)直徑大，大部分已在預(yù)過濾器上被過濾下來(lái)了。9/15/20229表3 高效過濾器濾材表面附著細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)結(jié)果濾材位置在過濾器上部取樣在過濾器中部取樣迎風(fēng)面濾材表面17粒4粒背風(fēng)面濾材表面009/15/202210微生物在濾材上的繁殖 這是技術(shù)人員和醫(yī)護(hù)人員所共同關(guān)心的問題。細(xì)菌的繁殖應(yīng)有合適的溫度、濕度和營(yíng)養(yǎng)。對(duì)于以無(wú)機(jī)材料制成的濾材，由于缺乏必要的營(yíng)養(yǎng)，細(xì)菌在其上的生存是很

7、困難的（雖然現(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)，幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西）。有人把在手術(shù)室中使用了13000h以后的高效過濾器濾材取下一些作試樣，按照以下三種條件處理： 9/15/202211 把濾材的集塵面精密置于培養(yǎng)基上。 按照的方法再向?yàn)V材上滴下無(wú)菌蒸餾水，使其充分潤(rùn)濕。 按照的方法，并保存相對(duì)濕度為90。培養(yǎng)結(jié)果是： 只的條件下，可見到濾材上形成枯草菌和真菌的菌落（23個(gè)/cm2）；在的條件下，僅有霉菌的小菌落形成；在的高濕條件下，認(rèn)為細(xì)菌完全不能發(fā)育。9/15/202212這一試驗(yàn)結(jié)果表明，多數(shù)細(xì)菌在被過濾器捕集下來(lái)以后，由于濕度、營(yíng)養(yǎng)源不合適（溫度影響且不談）即趨于自然死亡，或者僅有一部分芽孢形成的菌落

8、或者真菌一類生存下來(lái)。如果在高濕度下沒有營(yíng)養(yǎng)源，細(xì)菌也生存不下來(lái)，反之，只要有營(yíng)養(yǎng)源，即使在普通環(huán)境中細(xì)菌也得以生存并發(fā)育。蒸餾水本身雖無(wú)營(yíng)養(yǎng)，但可能有助于濾材上含營(yíng)養(yǎng)微粒的溶解，而這一點(diǎn)可能比高濕度條件對(duì)細(xì)菌還有利。9/15/202213四、空氣滅菌的主流方法 菌附于塵上，要除塵、菌，只有過濾和靜電，能兩者兼顧，但后者必須要有預(yù)過濾，其性價(jià)比遠(yuǎn)低于過濾，所以空氣的消毒滅菌技術(shù)中空氣過濾是主流，反映在國(guó)外各類標(biāo)準(zhǔn)中。新風(fēng)、回風(fēng)和部分送風(fēng)超低阻高中效無(wú)菌送風(fēng)高效排風(fēng)高效、零泄漏9/15/202214五、空氣消毒滅菌效果的驗(yàn)證按新GMP對(duì)無(wú)菌區(qū)微生物應(yīng)進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，見表4：級(jí)別浮游菌cfu/m3沉

9、降菌（90mm)cfu/4h表面微生物接觸碟（55mm)cfu/皿5指手套cfu/手套A1111B10555C1005025D20010050是平均值單個(gè)皿可少于4h空氣量應(yīng)多于1m3多皿接力9/15/202215六、生物制品需要的級(jí)別級(jí)別生物制品灌裝前不經(jīng)除菌過濾灌裝前經(jīng)除菌過濾其他100級(jí)（背景為靜態(tài)百級(jí)動(dòng)態(tài)萬(wàn)級(jí)）制品的配制、合并、灌封、凍干、加塞；細(xì)胞的制備；添加穩(wěn)定劑、佐劑及滅活劑等工序半成品制備中的接種與收獲萬(wàn)級(jí)制品的配制、合并、精制；半成品制備中的細(xì)胞培養(yǎng)；添加穩(wěn)定劑、佐劑、滅活劑；接種后雞胚的孵化和細(xì)菌培養(yǎng)除菌過濾和超濾工序；體外免疫診斷試劑的陽(yáng)性血清和抗原、抗體的分裝9/15/202216六、生物制品需要的級(jí)別（續(xù)）級(jí)別生物制品灌裝前不經(jīng)除菌過濾灌裝前經(jīng)除菌過濾其他10萬(wàn)級(jí)雞胚的孵化；溶液或穩(wěn)定劑的配制與滅菌；血清等的提取和血漿的合并；非低溫提?。环盅b前巴氏消毒；軋蓋及最終容器精洗；口服劑發(fā)酵密閉系統(tǒng)環(huán)境（暴露部分需無(wú)菌操作）深部組織創(chuàng)傷和大面積體表創(chuàng)面用品；酶聯(lián)免疫吸附劑的包裝、配液、分裝與干燥；膠體金試劑、聚合酶鏈反應(yīng)試劑（PCR）、紙片法試劑等其他體外免疫試劑制備9/15/202217七、生物制品的生產(chǎn)條件要獨(dú)立廠房：如卡介苗或用活性微生物的制