微生物實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基配方_第1頁(yè)
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1、 /13培養(yǎng)基的配制:先將瓊脂加入900mL蒸餾水中,加熱溶解,再加入磷酸氫二鉀及蛋白胨,使溶解,補(bǔ)足蒸餾水至1000mL,調(diào)pH至7.27.4。加入乳糖,混勻溶解后,115c滅菌20min。稱取亞硫酸鈉置一無菌空試管中,加入無菌水少許使溶解,再在水浴中煮沸10min后。立刻滴加于20mL5%堿性復(fù)紅乙醇溶液中,直至深紅色褪成淡粉紅色為止。將此亞硫酸鈉與堿性復(fù)紅的混合液全部加至上述已滅菌的并仍保持熔化狀態(tài)的培養(yǎng)基中,充分混勻,倒平板,放冰箱中備用,貯存時(shí)間不宜超過2周。26、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基)TOC o 1-5 h z蛋白胨水培養(yǎng)基100mL20%乳糖溶液2mL2%伊紅水溶液2mL

2、0.5%美藍(lán)水溶液1mL培養(yǎng)基的配制:將已滅菌的蛋白胨水培養(yǎng)基(PH7.6)加熱熔化,冷卻至60左右時(shí),再把已滅菌的乳糖溶液,伊紅水溶液及美藍(lán)水溶液按上述量以無菌操作加入。搖勻后,立即倒平板。乳糖在高溫滅菌易被破壞必須嚴(yán)格控制滅菌溫度,115滅菌20min。27、乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(“水的細(xì)菌學(xué)檢查”用)TOC o 1-5 h z蛋白胨|10g牛肉膏3g乳糖5g氯化鈉5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL蒸餾水1000mL培養(yǎng)基的配制:將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化鈉加熱溶解于1000mL蒸餾水中,調(diào)pH至7.27.4。加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混勻,分裝于有小倒管的試管中。115滅菌2

3、0min。牛奶粉100g石蕊0.075g水1000mLpH6.8121滅菌15min。29、LB(Luria-Bertani)培養(yǎng)基蛋白胨10g酵母膏5g氯化鈉10g蒸餾水1000mLpH7.0121滅菌20min。30、基本培養(yǎng)基磷酸氫二鉀10.5g磷酸二氫鉀4.5硫酸銨1g二水合檸檬酸鈉0.5g蒸餾水1000mL121滅菌20min。需要時(shí)滅菌后加入:糖(20%)10mL維生素B1(硫胺素)(1%)0.5mL七水合硫酸鎂(20%)1mL鏈霉素(50mg/mL)4mL,終濃度200ug/mL氨基酸(10mg/mL)4mL,終濃度40Ug/mLpH自然(7.0)31、庖肉培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制:(

4、1)、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g,切成小方塊,置1000mL蒸餾水中,以弱火煮1小時(shí),用紗布過濾,擠干肉汁,將肉汁保留備用。將肉渣用絞肉機(jī)絞碎,或用刀切成細(xì)粒。(2)、將保留的肉汁加蒸餾水,使總體積為20001,加入蛋白胨20g,葡萄糖2g,氯化鈉5g,及絞碎的肉渣,置燒瓶搖勻,加熱使蛋白胨溶化。(3)、取上層溶液測(cè)量pH,并調(diào)整其達(dá)到8.0,在燒瓶壁上用記號(hào)筆標(biāo)示瓶?jī)?nèi)液體高度,121滅菌15min后補(bǔ)足蒸發(fā)的水分,重新調(diào)整pH值8.0,再煮沸1020min,補(bǔ)足水量后調(diào)整pH7.4。(4)、將燒瓶?jī)?nèi)容物搖勻,將溶液和肉渣分裝于試管中,肉渣約占培養(yǎng)基的1/4左右。經(jīng)121滅菌15min后備

5、用,如當(dāng)日不用,應(yīng)以無菌操作加入已滅菌的石蠟凡士林,以隔絕氧氣。32、乳糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基乳糖5g牛肉膏5g酵母膏5g蛋白胨10g葡萄糖10g氯化鈉5g瓊脂粉15gpH6.8水1000mL33、馬鈴薯牛乳培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制:200g馬鈴薯(去皮)煮出汁,脫脂鮮乳100mL,酵母膏5g,瓊脂粉15g,加水1000mLpH7.0。制平板培養(yǎng)基時(shí),牛乳與其他成分分開滅菌,倒平板前再混合。34、尿素瓊脂培養(yǎng)基尿素20g瓊脂15g氯化鈉5g磷酸二氫鉀2g蛋白胨1g酚紅0.012g蒸餾水1000mLpH6.80.2培養(yǎng)基的配制:在蒸餾水或去離子水100mL中,加入上述所有成分(除瓊脂外)?;旌暇鶆颉_^濾滅菌。將瓊脂加入9

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