1、.性傳播疾病的實(shí)驗(yàn)室診斷1.講授內(nèi)容 性病概述（性病的概念、危害、研究范圍） 梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷（臨床、實(shí)驗(yàn)室診斷） 淋病的實(shí)驗(yàn)室診斷（臨床、實(shí)驗(yàn)室診斷） 非淋菌性尿道炎（臨床、實(shí)驗(yàn)室診斷） 生殖器皰疹（臨床、實(shí)驗(yàn)室診斷） 尖銳濕疣的實(shí)驗(yàn)室診斷（臨床、實(shí)驗(yàn)室診斷）2性?。╒enereal diseases, VD）是指通過(guò)性交傳染的、具有明顯生殖器損害癥狀的全身性疾病，亦稱為經(jīng)典性病。包括梅毒、淋病、 軟下疳和性病性淋巴肉芽腫。性傳播疾?。╯exually transmitted diseases , STD）：是指通過(guò)性接觸可以傳染的一組傳染病，在我國(guó)，人們簡(jiǎn)稱為性病。其概念不同于經(jīng)典性病，包

2、容的病種 20余種。性病防治管理辦法: 梅毒，淋病，尖銳濕疣，非淋菌性尿道炎，生殖器皰，軟下疳，性病性淋巴肉芽腫，艾滋病。STD是自古就有的，只是由于人類活動(dòng)范圍的擴(kuò)大，交流增多，性行為更隨意，性病的范圍在不斷擴(kuò)大。性病在我國(guó)廣泛流行，它不僅危害個(gè)人健康，也殃及家庭，遺害后代，同時(shí)還危害社會(huì),成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生和社會(huì)問(wèn)題。.性傳播疾病的概念3性病的危害(1) 感染性病后不及時(shí)發(fā)現(xiàn)并徹底治療，不僅可損害人的生殖器官，導(dǎo)致不孕不育、異位妊娠、早產(chǎn)、流產(chǎn)和死胎等，有些性病還可損害心臟、腦等人體的重要器官，甚至導(dǎo)致死亡。有些性病一旦染上是難以治愈的，如尖銳濕疣、生殖器皰疹。 有相當(dāng)一部分的性病患者癥狀

3、較輕或沒(méi)有任何明顯的癥狀，但卻可以通過(guò)各種性病傳播途徑傳給其他健康人。4性病的危害(2) 性病的流行還給家庭帶來(lái)嚴(yán)重危害。例如淋病，通常情況是，夫婦中的一方由于某種原因而感染上淋病，然后通過(guò)夫妻間的性生活，傳染給對(duì)方，家中的孩子或是通過(guò)母嬰途徑傳播，或是通過(guò)日常生活的接觸而被感染，使得一家人都深受其害。 性病還能促進(jìn)艾滋病的傳播和流行。5陜西省皮膚性病防治所 朱參勝1.臨床：早期、準(zhǔn)確診斷，發(fā)現(xiàn)無(wú)癥狀感染者評(píng)估治療效果，判斷治愈指導(dǎo)臨床用藥，耐藥性監(jiān)測(cè)2.流行病學(xué)監(jiān)測(cè)：2011.7病例報(bào)告患病率調(diào)查耐藥監(jiān)測(cè)3. 科研： 基礎(chǔ)性 應(yīng)用型研究Generated by Foxit PDF Creat

4、or Foxit Software For evaluation only.性病實(shí)驗(yàn)室診斷的應(yīng)用6.性病研究范圍性病防治管理辦法指定的8種性病1. 梅毒2. 淋病3. 尖銳濕疣4. 非淋菌性尿道炎5. 生殖器皰疹6. 軟下疳7. 性病性淋巴肉芽腫8. 艾滋病7梅毒概念：梅毒（英文名稱：syphilis）是由蒼白（梅毒）螺旋體(Treponema pallidum)引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病(VD, STD)。絕大多數(shù)是通過(guò)性途徑傳播，臨床上可表現(xiàn)為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潛伏梅毒。臨床上以陰部糜爛，外發(fā)皮疹，筋骨疼痛，皮膚起核而潰爛，神情癡呆為主要表現(xiàn)的傳染病。是中華人民共和國(guó)傳染病防

5、治法中，列為乙類防治管理的病種。.一、梅毒syphilis8一期梅毒：標(biāo)志性臨床特征是硬下疳，潛伏期24周，外生殖器部位發(fā)生暗紅色硬腫塊、淺潰瘍，有軟骨樣硬度，周圍淋巴結(jié)腫大。二期梅毒：在一期梅毒12個(gè)月之后，全身皮膚、粘膜發(fā)生對(duì)稱泛發(fā)皮疹、斑疹、丘疹、膿皰疹等。粘膜可發(fā)生粘膜斑、扁平濕疣，傳染性強(qiáng)。.9三期梅毒：發(fā)生在感染后23年乃至10年，皮膚為樹膠樣腫，還可涉及骨、關(guān)節(jié)、心、血管，表現(xiàn)為主動(dòng)脈炎、主動(dòng)脈瓣閉鎖不全和主動(dòng)脈瘤等，侵及神經(jīng)為脊髓癆，全身麻痹。10梅毒流行簡(jiǎn)況（1） 全球每年約有1200萬(wàn)新發(fā)病例，主要集中在南亞、東南亞和非洲。 于1505年經(jīng)印度傳入我廣東，至今已500多年。

6、 解放前是中國(guó)四大性病之首，60年代初基本被消滅，80年代再次發(fā)生和流行。 1991年報(bào)告病例數(shù)為1870例，1995年11336例，1997年33668例。呈明顯增多趨勢(shì)，臨床經(jīng)?？梢娨?、二期梅毒，也已發(fā)現(xiàn)三期梅毒和先天梅毒。 在義務(wù)獻(xiàn)血員中發(fā)現(xiàn)隱性梅毒。11梅毒流行簡(jiǎn)況（2） 梅毒患者的皮膚、粘膜中含梅毒螺旋體，未患病者在與梅毒患者的性接觸中，皮膚或粘膜若有細(xì)微破損則可得病。 極少數(shù)可通過(guò)輸血或其它途徑傳染。 獲得性梅毒 （后天）的早期梅毒病人是傳染源，95%是通過(guò)不潔性交傳染，少數(shù)通過(guò)接吻、握手、輸血、接觸污染的內(nèi)衣、濕毛巾、茶杯、煙斗、哺乳、尿布等傳染。 胎兒梅毒（先天 ）：孕婦體內(nèi)螺

7、旋體，一般在妊娠34月通過(guò)胎盤感染嬰兒。12 病因：梅毒螺旋體侵入人體后經(jīng)過(guò)23周潛伏期，即發(fā)生皮膚損害(典型損害為硬下疳)這是一期梅毒。發(fā)生皮膚損害后機(jī)體產(chǎn)生抗體，梅毒初期的組織學(xué)特征是單核細(xì)胞侵潤(rùn)，在感染的第6天，即有淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，此時(shí)梅毒螺旋體見于硬下疳中的上皮細(xì)胞間隙中，以及位于上皮細(xì)胞的內(nèi)陷或吞噬體內(nèi)，或成纖維細(xì)胞、漿細(xì)胞、小的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞之間及淋巴管和局部淋巴結(jié)中。由于免疫的作用使梅毒螺旋體迅速地從病灶中消除。感染的第24天后，免疫熒光檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)梅毒螺旋體的存在，螺旋體大部分被殺死，進(jìn)入無(wú)癥狀的潛伏期此即一期潛伏梅毒。13梅毒的暗視野顯微鏡檢查（1） 暗視野顯微鏡檢查：是一種檢

8、查梅毒螺旋體的方法。暗視野，顧名思義即是顯微鏡下沒(méi)有明亮的光線，它便于檢查蒼白的螺旋體。這是一種病原體檢查，對(duì)早期梅毒的診斷有十分重要的意義。 早期皮膚粘膜損害（一期、二期）可查到蒼白螺旋體。一期梅毒蒼白螺旋體多在硬下疳的硬結(jié)、潰瘍的分泌物和滲出液中存在，腫大的淋巴結(jié)穿刺也可檢出。二期梅毒蒼白螺旋體可在全身血液和組織中檢出，但以皮膚檢出率最高。早期先天性梅毒，可以通過(guò)皮膚或粘膜損害處刮片發(fā)現(xiàn)梅毒蒼白螺旋體。14基本原理：皮損滲出液、淋巴結(jié)穿刺液涂片暗視野顯微鏡下觀察形態(tài)，運(yùn)動(dòng)方式。暗視野顯微鏡（darkfieldmicroscope）：聚光鏡中央有擋光片，使照明光線不直接進(jìn)人物鏡，只允許被標(biāo)本

9、反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見到小至 4200 nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高50倍。標(biāo)本采集： 皮膚黏膜組織液：帶乳膠手套，擦去去污物，鈍刀輕刮、擠壓，避免出血，取滲出液，預(yù)先有生理鹽水的載玻片上，加蓋玻片。 淋巴液：無(wú)菌穿刺，注入生理鹽水，反復(fù)抽吸，取少量淋巴液，滴加至載玻片上，加蓋玻片。Generated by Foxit PDF Creator Foxit Software For evaluation only.暗視野顯微鏡檢查（2）15操作步驟： 加鏡油至聚光器上(不要將鏡油加載蓋玻片上) 聚光 鏡檢結(jié)果判讀： 形態(tài)：纖細(xì)

10、、白色、有折光、螺旋狀 運(yùn)動(dòng)方式：旋轉(zhuǎn)、蛇行、伸縮結(jié)果報(bào)告：陽(yáng)性：見到上述特征的螺旋體陰性：未見到上述特征的螺旋體.暗視野顯微鏡檢查（3）16.暗視野顯微鏡檢查（4） 臨床意義： 陽(yáng)性：確診梅毒 陰性：復(fù)檢，血清學(xué)檢查 注意事項(xiàng): 避免出血 及時(shí) 對(duì)廢棄物及時(shí)處理，梅毒病原體為蒼白螺旋體，對(duì)外界抵抗力弱，離體后一般1-2小時(shí)內(nèi)死亡，對(duì)干燥和熱敏感，但對(duì)冷抵抗力較強(qiáng)，低效消毒劑也可將其消滅。17鍍銀染色法（1） 基本原理：梅毒螺旋體親銀性銀溶液染色鏡下觀察。 標(biāo)本采集（同暗視野顯微鏡檢查）：皮膚黏膜組織液淋巴液18Generated by Foxit PDF Creator Foxit Soft

11、ware For evaluation only.鍍銀染色法（2） 操作步驟：涂片干燥（空氣中自然干燥）固定：羅吉固定液（甲醛，乙酸）23 min洗滌：無(wú)水酒精媒染：鞣酸媒染劑，微加熱，染30sec，水洗銀染：銀染液，微加熱，染30sec，水洗鏡檢：油鏡19鍍銀染色法（3） 結(jié)果判讀：棕褐色梅毒螺旋體 結(jié)果報(bào)告：陽(yáng)性：見到棕褐色梅毒螺旋體陰性：未見到棕褐色梅毒螺旋體 臨床意義：陽(yáng)性：確診梅毒陰性：復(fù)檢，血清學(xué)檢查 注意事項(xiàng):與其它螺旋體的鑒別20.21.梅毒的血清學(xué)檢測(cè)方法 梅毒血清學(xué)檢查對(duì)于診斷二期、三期梅毒，以及判定梅毒的發(fā)展和痊愈，判斷藥物的療效都有十分重要的意義。梅毒血清學(xué)檢查包括非梅

12、毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)。前者常用于臨床篩選及判定治療的效果，抽血后1小時(shí)即可出結(jié)果，費(fèi)用也低廉。后者主要是用于判定試驗(yàn)，但是它不能判定治療效果，一旦患有梅毒，這一試驗(yàn)將終身陽(yáng)性。22.梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法的分類 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) VDRL試驗(yàn) RPR試驗(yàn) TRUST試驗(yàn) 梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) TPPA試驗(yàn) TPHA試驗(yàn) FTA-ABS試驗(yàn) TP-ELISA試驗(yàn) TP-WB試驗(yàn)23Venereal Disease ResearchLaboratory基本原理：梅毒螺旋體感染宿主產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體與心磷脂、卵磷脂、膽固醇混合物（抗原）凝集反應(yīng)標(biāo)本采集: 血清：靜

13、脈血25ml，及時(shí)離心，保存于28，長(zhǎng)期保存于-20。 腦脊液：專業(yè)人員操作，有血細(xì)胞，2000rpm離心。 操作步驟： VDRL抗原配制 VDRL玻片定性實(shí)驗(yàn) 滅活 吸樣 加抗原 反應(yīng),低倍顯微鏡觀察.VDRL試驗(yàn)（1）24弱陽(yáng)性或可疑（滴度），或陰性但有臨床癥狀時(shí)需做定量試驗(yàn)（前帶現(xiàn)象） VDRL定量試驗(yàn)加稀釋液樣本稀釋：系列稀釋加抗原反應(yīng)凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)： 3+4+：中到大絮狀物，液體清亮 2+：絮狀物較小，液體較清亮 1+：小凝集物，均勻分布，液體渾濁 ：抗原抗體復(fù)合物顆粒稍粗 -：抗原顆粒均勻、細(xì)小VDRL試驗(yàn)（2） 當(dāng)VDRL定性試驗(yàn)為陽(yáng)性、 結(jié)果判讀25VDRL試驗(yàn)（3）滅活：血

14、清是在56oC加熱30分鐘，除去非特異性抑制劑（如補(bǔ)體）。VDRL用于腦脊液的測(cè)定：對(duì)腦脊液的測(cè)定診斷神經(jīng)梅毒,首選定量VDRL。測(cè)試中有一些變化: 用等量的10鹽水稀釋樣品，腦脊液不能被加熱（或滅活），樣品體積為0.01毫升，旋轉(zhuǎn)時(shí)間為8分鐘。其余的程序同血清。26.VDRL試驗(yàn)（4） 結(jié)果報(bào)告： 定性 陽(yáng)性：1+4+ 陰性 定量 滴度：最高稀釋倍數(shù) 臨床意義： 腦脊液VDRL陽(yáng)性對(duì)神經(jīng)梅毒有診斷意義。 患有其它疾病可能產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果，包括一些病毒感染（單核細(xì)胞增多，肝炎）、藥物、懷孕、風(fēng)濕熱、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡、麻風(fēng)。 滴度與病情相關(guān)（即滴度下降表明成功的治療），用于預(yù)后判定。27Ra

15、pidPlasmaReagin(RPR)基本原理：VDRL試驗(yàn)的改良?？乖?活性炭顆粒+抗體黑色絮狀物（肉眼可見）。反應(yīng)素：Tp（梅毒病毒）侵入人體破壞組織后，組織中的磷脂粘附于螺旋體表面形成復(fù)合抗原。從而使機(jī)體產(chǎn)生抗磷脂的自身抗體，這種抗體稱為反應(yīng)素。標(biāo)本采集: 血清：新鮮分離或凍存 血漿：各種抗凝劑操作步驟： 定性實(shí)驗(yàn) 加樣 加抗原 反應(yīng)RPR試驗(yàn)（1）28RPR試驗(yàn)（2） 定量實(shí)驗(yàn) 稀釋液準(zhǔn)備 加樣：系列稀釋 加抗原 反應(yīng)（旋轉(zhuǎn)8min） 結(jié)果判讀凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)： 3+4+：中到大黑色絮狀物，液體清亮 2+：黑色絮狀物小到中，液體較清亮 1+：小黑色凝集物，液體渾濁 -：碳顆粒集中于中

16、央一點(diǎn)或均勻分散29RPR試驗(yàn)（3） 結(jié)果報(bào)告： 定性 陽(yáng)性：1+4+ 陰性 定量 滴度：最高稀釋倍數(shù) 臨床意義： 比VDRL簡(jiǎn)便（血清不需滅活，加有氯化膽堿） 適用于篩查、療效觀察、復(fù)發(fā)或再感染 未經(jīng)治療的一期、二期和潛伏梅毒的敏感性：86%、100%和98%30指示物，陽(yáng)性結(jié)果為紅色絮狀物 標(biāo)本采集：血清血漿操作步驟：定性：加樣（50L)加抗原（一滴）反應(yīng)（8min)TRUST試驗(yàn)（1） （Tolulizedredunheatedserumtest,TRUST） 基本原理：用甲苯胺紅代替RPR試驗(yàn)中的碳顆粒，作為31定量： 稀釋液（50L生理鹽水) 加樣（50L血清/血漿) ，倍比稀釋 加

17、抗原（一滴） 反應(yīng)（8 min)結(jié)果判讀 凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)： 3+4+：中到大凝集物，液體清亮 2+：小到中凝集物，液體較清亮 1+：小凝集物，液體渾濁 -：甲苯胺紅集中于中央或均勻分散.TRUST試驗(yàn)（2）32結(jié)果報(bào)告： 定性: 陽(yáng)性：1+4+; 陰性 定量: 滴度：最高稀釋倍數(shù)臨床意義： 適用于篩查、療效觀察、復(fù)發(fā)或再感染 用正常牛心肌的心類脂作為抗原，而不是用螺旋體作為抗原，來(lái)測(cè)定病人血清中的反應(yīng)素（非特異性抗體-抗心磷脂抗體）。 用來(lái)初步篩查梅毒螺旋體感染。反應(yīng)素在初期梅毒病灶出現(xiàn)后12周就可測(cè)出，在二期梅毒滴度最高，三期梅毒較低。 所用抗原不具有特異性，除梅毒病人外，一些非梅毒疾患也

18、可暫時(shí)或長(zhǎng)期地存在反應(yīng)素。例如麻風(fēng)、結(jié)核、傳染性單核細(xì)胞增多癥、紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、回歸熱、以及一些發(fā)熱性疾病。 此外，在孕婦、老年人和吸毒者有生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)。.TRUST試驗(yàn)（3）33凡確診為梅毒者，治療前最好做定量試驗(yàn)。兩次定量試驗(yàn)滴度變化相差2個(gè)稀釋度以上時(shí)，才可判定滴度下降。梅毒患者在經(jīng)過(guò)正規(guī)治療以后，頭三個(gè)月應(yīng)當(dāng)每月復(fù)查一次滴度，以后可改為每三個(gè)月復(fù)查一次，第二年每三個(gè)月或每半年復(fù)查一次，以觀察比較當(dāng)次與前幾次的滴度變化的情況。梅毒患者治療后的隨訪觀察一般在兩年的時(shí)間。如果每次檢測(cè)的RPR的滴度呈現(xiàn)不斷下降的趨勢(shì)，說(shuō)明抗梅治療是有效的。如果連續(xù)三次到四次檢測(cè)的結(jié)果都是陰性，則

19、可以認(rèn)為該患者的梅毒已經(jīng)治愈。.梅毒療效判定34前帶現(xiàn)象：一種抗原抗體反應(yīng)的現(xiàn)象。以定量抗原檢測(cè)抗體，若抗體過(guò)剩，可使所形成的免疫復(fù)合物反而減少，而不出現(xiàn)凝集。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又表現(xiàn)為二期梅毒，此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)了陽(yáng)性的結(jié)果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象。耐血清性（血清固定）：晚期耐血清性與梅毒的類型及開始治療的時(shí)間早晚有關(guān)。晚期耐血清性病人已經(jīng)足夠量的治療后，即使再予更多地或無(wú)限制地治療也不能使血清滴度降低。對(duì)于這種病人，需經(jīng)過(guò)詳細(xì)的檢查，排除神經(jīng)、心臟與其他內(nèi)臟梅毒后，作定期隨訪。.非梅毒螺旋體抗原血

20、清試驗(yàn)35 treponemapallidumparticleagglutinationassay(TPPA). 基本原理：超聲裂解梅毒抗原+明膠粒子+血清抗梅毒抗體，凝集反應(yīng) 標(biāo)本采集：血清血漿 操作步驟：試劑準(zhǔn)備加稀釋液樣品稀釋加致敏明膠粒子和對(duì)照液（4個(gè)孔）混合：震蕩30秒反應(yīng)：2小時(shí).TPPA試驗(yàn)（1）36結(jié)果判讀: 陰性對(duì)照：未致敏粒子不出現(xiàn)凝集 凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)： 4+：粒子光滑，覆蓋整個(gè)孔底 3+：粒子光滑，覆蓋大部分孔底 2+：粒子光滑覆蓋孔底，周圍有一環(huán) 1+：粒子光滑覆蓋孔底，周圍有一明顯環(huán) ：粒子沉集孔底，中央形成一個(gè)小點(diǎn) -：粒子緊密沉積孔底中央結(jié)果報(bào)告： 陽(yáng)性：第3孔

21、不出現(xiàn)凝集，第4孔出現(xiàn)凝集1+4+ 陰性：第3孔和第4孔均未出現(xiàn)凝集.TPPA試驗(yàn)（2）37.TPPA試驗(yàn)（3） 臨床意義：初篩陽(yáng)性的確證治療后，TPPA試驗(yàn)仍可為陽(yáng)性，不能作為療效觀察結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果，區(qū)分既往和現(xiàn)癥感染 注意事項(xiàng)：“可疑”：其他方法復(fù)檢非特異性凝集：稀釋復(fù)檢或其他方法復(fù)檢38 Treponemapallidumhaemagglutinationassay 基本原理：超聲裂解梅毒抗原+羊紅細(xì)胞+血清抗梅毒抗體-凝集反應(yīng)標(biāo)本采集： 血清 血漿 操作步驟：試劑準(zhǔn)備加稀釋液（5個(gè)孔）樣品稀釋（5個(gè)孔）加對(duì)照液混合：震蕩30秒反應(yīng)：4小時(shí)TPHA試驗(yàn)（1）39結(jié)果判讀

22、: 陰性對(duì)照：未致敏血球不出現(xiàn)凝集 凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)： 4+：凝集物光滑，覆蓋整個(gè)孔底 3+：凝集物光滑，覆蓋大部分孔底 2+：凝集物光滑覆蓋孔底，周圍有一細(xì)胞環(huán) 1+：凝集物光滑覆蓋孔底，周圍有一明顯細(xì)胞環(huán) ：凝集物沉集孔底，中央形成一個(gè)小點(diǎn) -：凝集物緊密沉積孔底中央TPHA試驗(yàn)（2）40結(jié)果報(bào)告： 陽(yáng)性：第三孔不出現(xiàn)凝集，第4孔出現(xiàn)凝集1+4+ 陰性：第3孔和第4孔均未出現(xiàn)凝集臨床意義： 初篩陽(yáng)性的確證 治療后，TPHA試驗(yàn)仍可為陽(yáng)性，不能作為療效觀察 結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果，區(qū)分既往和現(xiàn)癥感染注意事項(xiàng)： “可疑”：其他方法復(fù)檢 非特異性凝集：稀釋復(fù)檢或其他方法復(fù)檢TPHA試驗(yàn)

23、（3）41.FTA-ABS試驗(yàn)（1） Fluorescenttreponemalantibodyabsorptiontest 基本原理：血清+稀釋劑（Reiter株螺旋體制備而成）-吸收-完整梅毒抗原+第二抗體（FITC標(biāo)記)，熒光顯微鏡下觀察-蘋果綠色熒光 標(biāo)本采集：血清腦脊液42操作步驟： 血清滅活：56，30min 血清稀釋：血清用吸收劑稀釋，陽(yáng)性血清用PBS稀釋 加樣：設(shè)置6種對(duì)照(PBS,吸收劑，PBS+陽(yáng)性對(duì)照，PBS+陰性對(duì)照，吸收劑+陽(yáng)性對(duì)照，吸收劑+陰性對(duì)照；樣品血清10ul（稀釋后） 洗滌： 加熒光抗體：37，30min 洗滌： 封片、讀片F(xiàn)TA-ABS試驗(yàn)（2）43.FT

24、A-ABS試驗(yàn)（3） 結(jié)果判讀:陽(yáng)性對(duì)照：綠色熒光的螺旋體陰性對(duì)照和空白對(duì)照：不產(chǎn)生熒光 結(jié)果報(bào)告：陽(yáng)性：綠色熒光的螺旋體陰性：無(wú)熒光或淡綠色螺旋體44.FTA-ABS試驗(yàn)（4） 臨床意義： FTA-ABS:梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)” 初篩陽(yáng)性的確證 治療后， FTA-ABS 仍可為陽(yáng)性，不能作為療效觀察 結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果，區(qū)分既往和現(xiàn)癥感染 用于神經(jīng)梅毒的診斷 注意事項(xiàng)： 洗滌：干凈，除去雜質(zhì)，以免影響結(jié)果判讀 高質(zhì)量熒光顯微鏡，技術(shù)熟練45.TP-ELISA試驗(yàn)（1） 基本原理：包被抗原+血清抗體+第二抗體（酶標(biāo)記)-底物顯色 標(biāo)本采集：血清血漿46.TP-ELI

25、SA試驗(yàn)（2） 操作步驟：加稀釋液：加樣：陽(yáng)性、陰性對(duì)照，待檢血清孵育： 37，60min，洗板加酶結(jié)合物： 37，60min，洗板加顯色劑： 37，15min，終止反應(yīng)：終止，比色47TP-ELISA試驗(yàn)（3） 結(jié)果判讀:閾值：公式陽(yáng)性對(duì)照：陰性對(duì)照和空白對(duì)照 結(jié)果報(bào)告：陽(yáng)性陰性48TP-ELISA試驗(yàn)（4） 臨床意義：適用于流行病學(xué)調(diào)查和大量樣品的檢查治療后，TP-ELISA仍可為陽(yáng)性，不能作為療效觀察結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果，區(qū)分既往和現(xiàn)癥感染用于篩查 注意事項(xiàng)：不同批號(hào)試劑不能混用溫度和時(shí)間必須嚴(yán)格控制49TP-WB試驗(yàn)（1） 基本原理：抗原印跡（硝酸纖維膜）+酶聯(lián)反應(yīng)，檢測(cè)多

26、種成分的抗體 標(biāo)本采集：血清血漿50TP-WB試驗(yàn)（2） 操作步驟：反應(yīng)：工作緩沖液，樣品，搖45min洗滌：工作緩沖液，洗滌3次加酶結(jié)合物：30min洗滌顯色： 37，15min終止：51.TP-WB試驗(yàn)（3） 結(jié)果判讀:陽(yáng)性參比圖觀察45kD, 17kD, 15.5kD顯色帶 結(jié)果報(bào)告：陽(yáng)性： 45kD, 17kD, 15.5kD均出現(xiàn)顯色帶陰性： 45kD, 17kD, 15.5kD無(wú)顯色帶52535455TP-WB試驗(yàn)（4） 臨床意義：初篩陽(yáng)性的確證治療后，TP-WB試驗(yàn)仍可為陽(yáng)性，不能作為療效觀察結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果，區(qū)分既往和現(xiàn)癥感染 注意事項(xiàng)：洗滌要充分，否則背景偏深

27、對(duì)照條帶應(yīng)顯示當(dāng)45kD, 17kD, 15.5kD出現(xiàn)12個(gè)顯色帶，其他方法復(fù)檢56.快速免疫色譜法（1） 基本原理：免疫色譜原理，采用吸附有顯色標(biāo)記的梅毒螺旋體重組抗原的試劑條，快速監(jiān)測(cè)標(biāo)本中的梅毒螺旋體抗體。 標(biāo)本采集：血清血漿全血57操作步驟： 加樣： 加緩沖液： 觀察結(jié)果：結(jié)果判讀: 質(zhì)控條帶 標(biāo)本條帶結(jié)果報(bào)告： 陽(yáng)性：質(zhì)控條帶+標(biāo)本條帶 陰性： 質(zhì)控條帶快速免疫色譜法（1）58快速免疫色譜法（1） 臨床意義：用于標(biāo)本的快速篩查結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果，區(qū)分既往和現(xiàn)癥感染 注意事項(xiàng)：試劑平衡至室溫假陽(yáng)性和假陰性59梅毒IgM抗體的檢測(cè)（1） 特異性IgM類抗體的產(chǎn)生是感染梅毒和其他細(xì)菌或病毒后機(jī)體首先出現(xiàn)的體液