1、（ 2021 楊浦模生物程13 分）蘋果切開或咬開后不久顏色便會加深，這種現(xiàn)象稱為“褐變變是由位于細(xì)胞器中 的多酚氧化酶）化位于液泡中的多酚類物質(zhì)（如綠原酸等）生成棕色色素所致。據(jù) 此，科研人員培育出了褐變能力顯著降低的轉(zhuǎn)基因蘋果，其工作流程如圖 3 所。目的基因愈傷組織pCLY14pBI121KmrKmr蘋果嫩葉轉(zhuǎn)基因蘋果樹苗Kmr為卡那霉素抗性基因圖 13 分 根題干信息判斷，要想構(gòu)建褐變能力顯著降低的轉(zhuǎn)基因蘋果，目的基因應(yīng) 選 選A. 卡霉素抗性基因 C. 棕色素降解基因 E. 抑 PPO 表的基因B. 綠原酸合成基因D. 提高液泡滲透壓的基因42. 分實圖 13 中驟所需要的酶是 。（

2、 分在步驟進(jìn)行之前，要用氯化汞或次氯酸鈣溶液對蘋果嫩葉碎片（外植體）進(jìn) 行處理，目的是 。A. 消B. 滅菌C. 清洗D. 誘分化2 分步驟是植物組織培的重要階段，這個階段稱為 。階段使用的 MS 培 養(yǎng)基中除了含有必要的植物激素外，從基因工程流程的角度考慮，還需要添加 。 分般而言在歷步驟后培育出來的轉(zhuǎn)基因植株中，目的基因插在一條染色體 上。要想培育轉(zhuǎn)基因純合子的蘋果植株，較為合理可行的方案是 。 分了評估目的基因?qū)σ种铺O果褐變的效果，需要選擇無目的基因的對照植株，如 野生樣進(jìn)行步驟質(zhì) pBI121 植株中佳的是 ， 理由是 。41.（ 分（選選 分全選 2 分漏選 1 個得 分42.（ 分

3、限制酶和 DNA 連酶43.（ 分A44.（ 分脫分化 卡那霉素45.（ 分讓轉(zhuǎn)基因植株雜交（ 分含粒 pBI121 的（ ）相比野生株含粒 pBI121 的株作為對照，（ 分）可以排除質(zhì)粒 pBI121 中基因?qū)嶒灲Y(jié)果的干擾1 分）（四 徐一模）苗與生物工（ 14 分）新型冠狀病毒肆虐全球給們?nèi)粘Ｉa(chǎn)生活等帶來很大的影響因研發(fā)新型冠 狀病毒疫苗受到廣泛關(guān)注。圖 12 中 AC 表示結(jié)構(gòu)或物質(zhì)，虛線箭頭表示 Nco、 、 Nhe 、 的酶切位點（四種酶的識別序列詳見下表 13 是苗的研的幾種 途徑和方法，表示過程。圖 40 12 中結(jié)構(gòu) A 表_過程需_酶。41據(jù) C 分可確定需要用限_割質(zhì)

4、粒 圖 42 13 中表示篩選的過程是_填編號選所用的培養(yǎng)基是 （體 / 液 體 ） 培 養(yǎng) 基 ， 其 所 用 的 接 種 方 法 是 _ 菌 與 調(diào) 節(jié) pH 的 先 后 順 序 是 。43 13 中一是 DNA 疫的制備過程序出該制備過程 （寫編號44研出的疫苗需進(jìn)行動物實驗實驗動物注射疫苗后在實驗動物體內(nèi)檢測到了針對 S 抗蛋白的特異性抗體。據(jù)此斷下列說法正確的_多選AS 蛋白為抗原，引發(fā)了特異免疫B抗體大多是蛋白質(zhì)，少數(shù)是類、脂質(zhì)CB 淋巴胞一定參與了上述免過程DT 淋巴胞可能參與了上述免過程45疫苗 疫 接到體后，其表達(dá)產(chǎn)物均會刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。據(jù)13 和 學(xué)知識，描述兩者在人

5、體內(nèi)表達(dá)過程的差異 。46疫苗 I 相，疫苗 III 安全性更高，其原因_ _。40.衣殼（只回答蛋白質(zhì)不得分逆轉(zhuǎn)錄41. Nco 42. 固體培養(yǎng)基，接種方法是劃線法先調(diào)節(jié) pH 后菌43. 4445. DNA 疫接種到人體后，經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄和翻譯表達(dá)出病毒的抗原結(jié)構(gòu)，而 RNA 疫接種到 人體后，直接翻譯出病毒的抗原結(jié)構(gòu)（二 2021 靜安一模）生物工程12 分） 11 HE rr -3- EcoR BamH Bam 矮牽牛花 HE 大分子 A 農(nóng)桿菌Bam r玫瑰莖尖愈傷組織EcoR Pvu Ap圖 11（ 分圖 11 中大分子 A 一被_，獲取大分 A 需用限制酶_ 時作用于含 HE 的 片

6、和質(zhì)粒，再酶連接。27.（ 分圖 11 表示篩選過程的（填圖中數(shù)字），該過程需配制的培基有 （多選）。A四素的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基B含四環(huán)素的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基C含氨芐青霉素的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基D 含芐青霉素的肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基28.（ 分圖 11 過稱（填文字后生過程_A部因復(fù)制，全部基因表達(dá)B部分基因復(fù)制，部分基因表達(dá)C全部基因復(fù)制，部分基因表達(dá)D 部基因復(fù)制，部基因表達(dá)（ 分實際操作中用農(nóng)桿感染植物愈傷組織后也需要篩選帶 NPT 基的植物 細(xì)胞對卡那霉素G418 等生素會產(chǎn)生抗性。文獻(xiàn)顯示 80mg-1 的 G418 是篩選轉(zhuǎn)基因水稻的合適濃度，因此有人推測最適合篩選轉(zhuǎn)基因玫

7、瑰的抗生素也是0 -1的 ，這種說法正確嗎？請判斷并說明理由_。26重組質(zhì)（重組 DNA Sal 2 分錯均不得分） DNA 連酶 27 AC（ 分；寫出 1 個 1 分有錯誤不得分）28分化 A2 分29正確。因為對于玫瑰G418 不一定是合適的抗生素，可能卡那霉更合適1 分 同時不同植物對 G418 的感度不同玫瑰L 不定是合適的濃 分（ 2021 黃浦?，F(xiàn)代物術(shù)生工（ 分dMAb DNA 圖 1636 分保所制備的抗體能精準(zhǔn)識別埃博拉病毒抗原人工合成目的基因時需 獲取的信息是 。A 抗體核苷酸序列 C 抗體的氨基酸序列B埃博拉病毒的核苷酸序列 D博病毒衣殼的氨基酸序列37 分圖 16 中

8、重組質(zhì)粒的構(gòu)建所需的工具酶有 、 。 38 分dMAb 也及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，下列過程描述與圖 16 中號相符的是選A取目的基因C重組 DNA 分導(dǎo)入受體細(xì)胞B目的基因與運載體重組D選含有目的基因的受體細(xì)胞39 分傳統(tǒng)的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的過程需要運用生物工程中的技術(shù)有選A A A A A胞移植技術(shù) C細(xì)胞融合B組織培養(yǎng) D物胞培養(yǎng)40 分單克隆抗體的制備所基于的免疫學(xué)基本原理是 選A髓細(xì)胞生長分裂旺盛B每個雜交瘤細(xì)胞只具備產(chǎn)一種抗體的能力C 淋細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后只剩下產(chǎn)一種抗體的能力D一原分子能刺激 B 淋細(xì)胞形成產(chǎn)單一抗體的能力41 分與傳統(tǒng)利用雜交瘤細(xì)產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)相

9、比 技術(shù)在抗體的制備上 有何優(yōu)勢？ 列兩點）36 C 分37 限酶1 分 連酶1 分） （空順序可顛倒）38 BC (2 分漏選得 1 分錯選不得)39 CD（2 分，選得 1 分錯選不得分）40 BD（2 分，選得 1 分錯選不得分）41.抗體的產(chǎn)生在生物體內(nèi)進(jìn)行，不需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)；產(chǎn)生抗體的細(xì)胞種類不局限于免疫細(xì)漿細(xì)胞備成 疫苗存儲和運輸抗體直接由 DNA 編產(chǎn)生， 省去抗原刺激免疫細(xì)胞再細(xì)胞融合和篩選的步驟（共 ，列舉兩點，每點 分表述 合理即得分）（ 2021 青浦模生物程11 ）內(nèi)皮素與黑色素細(xì)胞膜上的某受體結(jié)合后，會刺激黑色素細(xì)胞的增殖、分化并激活 酪氨酸酶的活性，從而使黑色

10、素增加。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮素的另一種主要受體 具美容功 能。科研人員通過構(gòu)建表達(dá)載體，實現(xiàn)了 基因在細(xì)胞中高效表達(dá)。其過程如圖 （中 SNAP 基因是一種熒光蛋白基，限制酶 Apa 別序列為 CCCGGG，制 Xho 識別序列為 CTCGAG圖答下列問題：的熒光檢測圖 37.（ 分圖 中程和獲取目的基因的方法_；過程所需 的原料是_ 。 （ 分表示基因工程步驟中的 該過程中用兩種限制酶切割的主要目的是_。39.（ 分關(guān)于 SNAP 基和 基及兩者的表達(dá)過程中，不同的是（ 選AA. 來的物種B. 核酸的種類C. 核苷酸的排列順序D. 轉(zhuǎn)的 mRNA 序E. 翻時對應(yīng)的密碼子表40.（ 分根據(jù)上述信息和

11、圖分，下列說法正確的是（ 選）A. 步導(dǎo)入的方法為顯微注射法 C. 步實現(xiàn)的是細(xì)胞水平的檢測B. 大桿菌篩選需添加氨芐青霉素 D. 該程屬于微生物基因工程41. （ 2分 ） 請 根 據(jù) 資 料 分 析 注 射 達(dá) 到 美 白 祛 斑 的 原 因 A_。37. 化方法人工合成 （ 分）38. 目基因與運載體重組1 分4 種氧核苷酸（ 分獲得不同的黏性末端，避免目的基因及質(zhì)粒的任意連接（避免目的基質(zhì)粒的自身環(huán)化對 得 分共 2 分39. ACD （ 分40. BD （ ）41. 注進(jìn)入的 能內(nèi)皮素結(jié)合了內(nèi)皮素與黑素細(xì)胞膜上內(nèi)皮素受體的結(jié)合， 從而抑制了黑色素細(xì)胞的增殖和黑色素的形成 分（二（20

12、21 松區(qū)模） 生工程與糖尿病的防治11 分某種 1 型尿病是因免疫系統(tǒng)將身胰島素作為抗原識別而引起的自身免疫病。小腸 黏膜長期少量吸收胰島素抗原，能誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)識別該抗原后應(yīng)答減弱，從而緩解癥狀。 科研人員利用 1 型尿病模型小進(jìn)行動物實驗，使乳酸桿菌在小鼠腸道內(nèi)持續(xù)產(chǎn)生人胰 島素抗原，為此構(gòu)建了重組表達(dá)載體，技術(shù)路線如圖 17 所示。圖 17注：信號是引導(dǎo)新合成的蛋白向分泌通路轉(zhuǎn)移的肽鏈（長度 個氨基酸）27.（2 分為使人胰島素在乳酸菌中高效表達(dá)，需改造其編碼序列。圖 18 是改前后人 胰島素 B 鏈碼序列的起始 30 核苷酸序列。據(jù)圖分析，轉(zhuǎn)錄形成的 mRNA 中該 段序列所對應(yīng)的片段

13、內(nèi)存在堿基替換的密碼子數(shù)_個第一個核苷酸|改造前單鏈 T T T G T G A A C A A C A C C T G T G C G G C T C A C A C 改造后單鏈 T T T G T C A A C A A C A T T T A T G T G G A T C A C A T圖 1828.（2 分在重組表達(dá)載體中Sac和 Xba限制酶僅有圖 的酶位點。用這兩種酶 充分酶切重組表達(dá)載體，可形_種 DNA 段。29.（2 分檢測轉(zhuǎn)化的乳酸桿菌發(fā)現(xiàn)，信號-組人胰島素分布在細(xì)胞壁上。由此推 測，信號肽的合成和運輸所經(jīng)歷的細(xì)胞結(jié)構(gòu)依次_A核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體細(xì)胞膜B核糖體、細(xì)胞質(zhì)

14、基質(zhì)、細(xì)胞、細(xì)胞壁C內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體細(xì)胞膜D核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體細(xì)胞膜、細(xì)胞壁30.（2 分用轉(zhuǎn)化的乳酸桿菌飼喂 1 型糖病模型小鼠一段時間后，小鼠體內(nèi)出現(xiàn)人胰島 素抗原，能夠識別它的免疫細(xì)胞有 選）AB 淋巴胞 B抗體 C巨噬細(xì)胞 D漿細(xì)胞31.（3 分）1 型糖尿病還有可能因人的第六號染色體短臂上的 HLA-D 基損傷引起。該 損傷基因的表達(dá)使胰島 B 細(xì)胞面出現(xiàn)異常的 HLA-D 抗， 淋巴胞被其刺激并激 活，攻擊胰島 B 細(xì)胞其裂解死亡。以下關(guān)于該 型糖病的說法錯誤是 。 （多選）A上述過程屬于體液免疫 B上述過程不產(chǎn)生記憶細(xì)胞C該病可能是由基因突變引起D該病是免疫功能缺失

15、而導(dǎo)致的27. （2 分）628. （2 分）329. （2 分）B30. （2 分）AC（評分說明：完正確得 2 分其情況均得 分）31. （3 分）ABD（分說明：完全正確得 分漏選 1 得 分，他情況均得 0 分 （2021 寶一模）有生工問(12 分)164164枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌 菌株（ 效表達(dá)載體 HT 質(zhì)上有 Smal 和 兩酶點。. 從 B 菌中提取一種纖維素酶C 酶）基并進(jìn)行克隆，在克隆 C 酶因，需在其兩1 1端添加相關(guān)酶切位點. 將得的 C 酶因與 HT 質(zhì)連接構(gòu)成重組 DNA（圖 141. 將接形成的重組 DNA

16、再入 菌獲得降纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。26.（2 分）對克隆的 酶進(jìn)行基因測序，與數(shù)據(jù)庫中的 酶因編碼序列相比，有兩個1 1堿基對不同，但兩者編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列相同，這是因為 。A基因選擇性表達(dá)B基因中含有四種脫氧核苷酸C種密碼子決定一種氨基酸 D編碼同一種氨基酸的密碼子可以有多個 27.（ 分從階段，需要 連酶的階段是 。28.（ 分關(guān)于圖 14 中組 DNA 的兩個酶切點，有可能的是 （選）A都能被 Smal 酶別B都能被 酶別C不能被 酶 酶識別D別被 酶和 BamHI 酶識別酶切點 酶切點 酶基因酶切點SmalHT 粒酶切點20纖維素含 10量（ 8%）重組 DNA0對照組 對照組

17、 2 工程菌圖 圖 15（ 分纖素含量為 的養(yǎng)基分為三組組種工程菌照 1 不行處理， 對照組 2 進(jìn)相應(yīng)處理。在相同條件下培養(yǎng) 小時，檢測培養(yǎng)基中纖維素的含量。結(jié) 果如圖 工菌降解纖維的能力最強(qiáng) 的處理應(yīng)為 30(2 分工程菌在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著泛用途。16 是離、純化和保存該 工程菌的過程，下列敘述正確的是 （多選樣品樣品懸液涂布劃線接種圖 16A圖 16 中篩選培養(yǎng)基中是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基B在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進(jìn)一步純化菌種C離儀器等工具在操作前需要高壓滅菌殺死細(xì)菌及其芽孢D面養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在常溫長期保存菌株31.（ 分預(yù)期該工程菌在處理棄物以保護(hù)環(huán)境

18、方面可能的應(yīng)用（舉一例26. D（ 分2 分28. （ 分對 個 給 分 29. 接種等 B （ ）30. （ ，對 1 給 1 分31. 處綠化廢棄物處理農(nóng)作物處植物類濕垃圾2 。合理給分）（ 崇一模） 回答列關(guān)物程及傳息達(dá)的題12 分） EPA pfaB EPA 13 EPA/DHA 基因2A 基導(dǎo)入篩選培養(yǎng)發(fā)酵分離提純 質(zhì)粒zeoR 基因（ 抗生素抗性基因）裂殖壺菌發(fā)酵罐圖 1336 結(jié)圖 判，篩選該生物工程中所需殖壺菌的指標(biāo)有 多選）A含 zeocin 培養(yǎng)基中的生長狀況 C裂殖壺菌的生長速度B 因的表達(dá)量 D殖菌的 EPA 合量37 結(jié)合微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識推測，在酵過程中需 多）A證養(yǎng)物質(zhì)的供給 C維持適宜的溫度B調(diào)節(jié) pH D溫壓滅菌38海洋漁業(yè)資源提取上述生物工程生產(chǎn) 的勢是 。 （至少提出兩點） 13 2A R 2A ” 14 G 蛋白 基因2A 基zeoR基因zeoR蛋白2A肽開始合成mRNA自剪切圖 14翻譯延續(xù)39 圖 14 中與 結(jié)并通過移動合成肽鏈的