1、Lynch綜合征的免疫組化篩查Lynch綜合征的免疫組化篩查Lynch綜合征常染色體顯性遺傳病致病基因位于常染色體上，且單個等位基因突變即可致病錯配修復基因（MLH1，MSH2，MSH6，PMS2，EPCAM）發(fā)生胚系突變免疫組化檢測顯示MMR蛋白缺失占全部CRC的3-5%Lynch綜合征常染色體顯性遺傳病常規(guī)分子篩查方法的選擇90%的LS 腫瘤表現(xiàn)為MSI-H或dMMR10-15%的散發(fā)性CRC表現(xiàn)為MSI-H或dMMR由于MLH1 基因啟動子的異常甲基化單純分子篩查不能確診LSIHC：正常情況下MMR蛋白均正常表達任意一蛋白表達缺失相關基因的突變檢測MLH1缺失排除MLH1啟動子區(qū)高度甲基

2、化MSI：MSI-H指5個微衛(wèi)星標志物中存在2個的改變IHC/MSI 假陰性率均約5%-10%常規(guī)分子篩查方法IHC或MSI均可IHC成本效益更優(yōu)常規(guī)分子篩查方法的選擇90%的LS 腫瘤表現(xiàn)為MSI-H或dLynch綜合征的IHC特征為何多數(shù)情況下MLH1和PMS2， MSH2和MSH6是成對缺失？MLH1和 PMS2 構成異二聚體，dPMS2通常由于MLH1突變所致單純PMS2 或MSH6缺失除了PMS2之外，MLH1 蛋白還有其他形成二聚體的成員，因此， PMS2基因胚系突變不一定導致MLH1表達缺失。Lynch綜合征的IHC特征為何多數(shù)情況下MLH1和PMS2MLH1 & PMS2 表達

3、缺失大概占15%80% 是由于 MLH1 過度甲基化所致其中20% 可能是 LSBRAF 突變檢測MLH1MSH2MSH6PMS2MLH1 & PMS2 表達缺失大概占15%MLH1MSH2MSH2 & MSH6 表達缺失大概約占3%大部分是由于MSH2 和 MSH6 基因突變經(jīng)常是LS患者MLH1PMS2MSH6MSH2MSH2 & MSH6 表達缺失大概約占3%MLH1PMS2IHC結果解讀:MLH1和PMS2IHC結果解讀:MLH1和PMS2IHC結果解讀: MSH2和MSH6IHC結果解讀: MSH2和MSH6IHC結果解讀IHC結果解讀Lynch綜合征的CRC形態(tài)學特征Lynch綜合

4、征的CRC形態(tài)學特征MSI-H結直腸癌組織學特征組織學低分化腫瘤異質性大MSI-H結直腸癌組織學特征組織學低分化形態(tài)上呈現(xiàn)髓樣分化低分化結直腸腺癌亞型腫瘤細胞片狀分布核空泡狀、核仁明顯淋巴細胞浸潤腫瘤細胞絕大部分CRC髓樣亞型呈現(xiàn)MSI-H,且預后比其他低分化癌好形態(tài)上呈現(xiàn)髓樣分化低分化結直腸腺癌亞型絕大部分CRC髓樣亞型重視Lynch-like形態(tài)特征重視Lynch-like形態(tài)特征分子篩查需要注意的問題分子篩查策略適用于CRC和子宮內(nèi)膜癌其他LS腫瘤分子篩查有效性的數(shù)據(jù)十分有限BRAF突變排除MLH1的過度甲基化對于CRC以外的腫瘤并不適用直腸癌組織中MSH6 缺失可能是治療后改變IHC

5、異常和/或MSI -H但相關基因檢測未發(fā)現(xiàn)胚系突變者仍有可能是Lynch 綜合征患者體細胞MMR 基因檢測來評估體細胞突變有助于解釋Lynch-like綜合征分子篩查需要注意的問題分子篩查策略適用于CRC和子宮內(nèi)膜癌免疫組化篩查相關問題免疫組化檢測技術標準化（自動vs手動）標本及時標準固定、避免修復過度IHC檢測蠟塊的選擇（有正常對照）重視lynch-like形態(tài)學特征免疫組化結果判讀（陰性與陽性）對于IHC 檢測結果不理想（重復或分子檢測）免疫組化篩查相關問題免疫組化檢測技術標準化（自動vs手動）免疫組化需重新檢測各種情況假陰性-陽性對照不表達陽性對照及腫瘤細胞表達太弱腫瘤細胞表達異質大免疫組化需重新檢測各種情況假陰性-陽性對照不表達假陽性-腫瘤細胞陽性、正常細胞陰性腫瘤細胞定位不準陽性細胞定位不清晰非特異性強染色免疫組化需重新檢測各種情況假陽性-腫瘤細胞陽性、正常細胞陰性免疫組化需重新檢測各種情況腫瘤標本固定不及時標本固定不夠充分MMR蛋白抗體不特異免疫組化檢測前后不符的原因分析抗原修復過度抗體孵育時間過長DAB染色時間過長腫瘤標本固定不及時免疫組化檢測前后不符的原因分析抗原修復過度Thank you!Thank you!Lynch綜合征常染色體顯性遺傳病致病基因位于常染色體上，且單個等位基因突變即可致病錯配修復基因（MLH1，MSH2，MSH6，PMS2，EPCAM）發(fā)生胚