恬心湯對壓力超負荷性心肌肥厚大鼠心功能的影響吳明華，趙志國，吳俊喜，楚立【摘要】目的研究中藥復方恬心湯對壓力超負荷性心肌肥厚模型大鼠的作用及機理。方法采用大鼠腹主動脈縮窄法復制壓力超負荷性心肌肥厚模型。于術后第8周測定心臟重量指數及血液生化指標，包括血管緊張素Ⅱ〔AngⅡ〕、內皮素(ET)、醛固酮〔ALD〕、心房鈉尿肽(ANP〕、一氧化氮〔N〕、一氧化氮合酶〔NS〕、超氧化物歧化酶〔SD〕。結果模型對照組與假手術組比擬,心臟重量指數顯著增加〔P0.01〕；AngⅡ、ALD、ET、ANP顯著升高，而NS、N、SD顯著降低?？ㄍ衅绽M、恬心湯干預組分別與模型對照組比擬，心臟重量指數顯著降低〔P0.01〕；AngⅡ、ALD、ET、ANP顯著降低，而NS、N、SD顯著升高。結論恬心湯可明顯抑制壓力超負荷性心肌肥厚大鼠心肌肥厚的開展，可能通過腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS〕以及N系統(tǒng)而發(fā)揮作用?！娟P鍵詞】恬心湯；壓力超負荷；心肌肥厚；大鼠心肌肥大是心肌細胞對持續(xù)性負荷增加的一種適應性反響。初期的心肌肥大有一定代償意義，但心肌肥大引起的心肌肥厚及心肌重構最終可導致心力衰竭，因此防止心肌肥厚對治療心力衰竭有重要的意義。我們在長期臨床理論和理論探究的根底上，研制出治療心衰行之有效的益氣活血中藥復方恬心湯，臨床應用于各類心臟病所導致的心力衰竭，獲得了良好的臨床療效。本研究旨在討論恬心湯對壓力超負荷性心肌肥厚的作用，為臨床應用提供實驗根據。1材料與儀器1.1藥物恬心湯由人參、當歸、白芍、川芎、赤芍、丹參、炙黃芪、丹皮等組成，用水提醇沉法制成煎劑〔1g生藥/l〕，河北醫(yī)科大學中醫(yī)學院提供，實驗時稀釋至所需濃度。1.2動物安康雄性SD大鼠40只，體質量220～280g，購于河北醫(yī)科大學實驗動物中心。1.3試劑與儀器卡托普利，常州制藥廠消費，批號：0602281。FA2022型電子天平，上海良平儀器儀表。722光柵分光光度計，上海第三儀器廠。N-1001型EYELA旋轉蒸發(fā)儀、SB-2000型EYELA水浴鍋，上海愛郎儀器。FJ-2021型γ-放射免疫計數器，西安二六二廠。2方法大鼠隨機分為5組：假手術組、模型對照組、卡托普利組、恬心湯干預組〔孝大劑量組〕，每組10只，按照以下方法復制壓力負荷性心肌肥厚模型：用20g/L戊巴比妥40g/kg腹腔注射麻醉大鼠，翻開腹腔，在腎動脈分支以上，鈍性別離暴露腹主動脈。用5號醫(yī)用絲線將直徑約0.6的6號去尖注射針頭與腹主動脈一起平行結扎，抽出針頭，即可形成腹主動脈狹窄。假手術組同樣別離腹主動脈，但不結扎。手術后第6周起，假手術組、模型對照組每天生理鹽水腹腔注射1l/100g；卡托普利組給予卡托普利灌胃30g/kg；恬心湯孝大劑量組分別灌胃給藥〔1，3g/kg〕，1次/d。第8周時用25%烏拉坦4l/kg麻醉后稱重，股動脈取血，測定血管緊張素Ⅱ〔AngⅡ〕、內皮素〔ET)、醛固酮〔ALD〕、心房鈉尿肽〔ANP)、一氧化氮〔N〕、一氧化氮合酶〔NS〕、超氧化物歧化酶〔SD〕；取其心臟，滿意臟重量及心室重量，計算心臟重量指數〔心臟重/體質量〕、心室重量指數〔心室重/體質量〕。3結果3.1實驗動物數量分析參加實驗50只大鼠，在實驗期間模型對照組大鼠因急性心衰死亡2只，卡托普利組因急性心衰死亡1只；恬心湯小劑量組因急性心衰死亡1只，恬心湯大劑量組和假手術組大鼠沒有死亡。在實驗觀察終點時，存活大鼠共46只。3.2各組大鼠體質量、心臟重量指數、心室重量指數比擬各組大鼠體質量比擬，差異無顯著意義〔P0.05)，模型組心臟重量指數、心室重量指數較假手術組明顯增加〔P0.01)，說明模型組大鼠心肌明顯肥厚?？ㄍ衅绽M與恬心湯組心臟重量指數、心室重量指數較模型組明顯降低〔P0.01〕。見表1。表1各組大鼠的體質量、心臟重量指數、心室重量指數比擬(略)轉貼于論文聯盟.ll.3.3各組大鼠血液生化指標比擬模型對照組與假手術組比擬，AngⅡ，ALD，ET，ANP顯著升高，而NS、N、SD顯著降低?？ㄍ衅绽M、恬心湯干預組分別與模型對照組比擬，AngⅡ、ALD、ET、ANP顯著降低，而NS、N、SD顯著升高。結果見表2。表2各組大鼠血液生化指標比擬(略)3.4統(tǒng)計學處理實驗數據以±s表示，使用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進展數據處理和統(tǒng)計分析，組間比擬采用單因素方差分析。4討論本實驗結果顯示，模型組心臟重量指數較假手術組明顯增加，說明模型組大鼠心肌明顯肥厚，復制模型成功。而經卡托普利、恬心湯干預后心肌肥厚明顯減輕。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認為，充血性心力衰竭病機特點為本虛標實，本虛為氣虛、陽虛，標實為血瘀水停，心氣虛是心衰早期的主要病理特征，而血瘀是心衰晚期由于氣虛陽虛帥血無力所引起的，故心衰的根本病機是“心陽不振、肺失清肅〞。治療心衰時需心肺兼治，扶正祛邪并舉。我們在長期臨床理論和理論探究的根底上，研制出治療心衰行之有效的益氣活血復方中藥恬心湯，應用于各類心臟病所導致的心衰，獲得了良好療效。其現代藥理研究諸藥可到達強心、擴血管、抗血小板、利尿及保護心肌的效果。對于壓力負荷導致心肌肥厚的作用機制有兩種觀點［1］：直接作用和間接作用。循環(huán)壓力負荷直接導致心肌肥厚的觀點認為壓力負荷〔機械信號〕本身就足以刺激心肌細胞內部的肥厚反響；間接作用那么認為還有一些自分泌、旁分泌和內分泌因子介入了這一過程，一方面直接刺激細胞生長，另一方面作為次級信號分子調節(jié)細胞對壓力負荷的適應性反響，且這些分泌因子在心肌肥厚發(fā)生中的作用多年來一直是研究的熱點，包括腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)〔RAAS〕、兒茶酚胺類、N合成系統(tǒng)等。研究證實其中許多成分直接誘導或是介入了心肌肥厚的發(fā)生和開展過程，同時各系統(tǒng)之間并非孤立而是嚴密相關的。如RAAS和N合成系統(tǒng)之間通過血管緊張素轉化酶〔AE〕和緩激肽互相影響。AE不僅決定著AngⅡ的最終產生，同時通過失活緩激肽來調節(jié)N的產生，因為活化的緩激肽可以刺激NS的活性。AngⅡ與N的作用正好相反，顯然它們之間的作用平衡將決定心肌細胞的收縮功能和能量消耗，這也是心肌肥厚發(fā)生的決定因素［2］。本次實驗結果顯示，壓力負荷后AngⅡ、ALD顯著升高，說明RAAS被激活，引起心肌肥厚?？ㄍ衅绽麑儆谘芫o張素轉換酶抑制劑〔AEi〕，可明顯抑制AngⅡ、ALD的上升，進而改善心肌肥厚。恬心湯也具有類似的作用，說明抑制RAAS的活性可能是其抗心肌肥厚的機制之一。ANP為胚胎期表達的基因，出生后在正常心肌組織中表達量很低。假如檢測到ANP含量明顯增加，那么屬于胚胎期基因重演，為病理性心肌肥大的可靠指標［3］。本實驗結果顯示，伴隨心肌肥厚的發(fā)生，ANP顯著升高，而經藥物干預后ANP含量下降，說明恬心湯在抑制RAAS并改善心肌肥厚的同時也影響著ANP的表達。ET是一種21個氨基酸組成的縮血管活性肽，具有多種生物學活性，包括促血管平滑肌增殖、纖維化、炎癥等，是一種潛在的心肌細胞生長因子和肥厚因子。N是一種極強的舒張血管的物質，心臟中的N除引起冠狀血管舒張，調節(jié)冠脈供血等一系列效用外，可通過自分泌和〔或)旁分泌的途徑抑制細胞增生和膠原合成改善心肌纖維化，故N是一種重要的抗心肌纖維化因子。N在心肌肥厚中發(fā)揮拮抗ET等縮血管物質的作用［1～5］。本實驗結果顯示伴隨心肌肥厚的產生，ET升高顯著，而N、NS顯著降低。我們的實驗結果提示，在心肌肥厚發(fā)生后的病理狀態(tài)下，舒縮血管活性物質之間的平衡狀態(tài)被打破，發(fā)生調節(jié)紊亂。而經卡托普利、恬心湯干預后，這一平衡狀態(tài)有所恢復，這可能是恬心湯抗心肌肥厚的又一機制。SD是體內去除氧自由基最主要的酶，可以有效地去除并終止2-·引發(fā)的連鎖反響，對機體的氧化和抗氧化平衡起著關鍵作用，其含量的上下間接反映了機體去除氧自由基的才能［6］。本次實驗中，恬心湯干預組大鼠SD明顯高于模型組，說明恬心湯可阻止氧自由基對細胞膜的攻擊，減輕脂質過氧化損傷，從而改善心肌肥厚。綜上所述，恬心湯可通過多途徑、多環(huán)節(jié)發(fā)揮抗心肌肥厚的作用，其中以RAAS、N系統(tǒng)最為重要，其詳細機制還有待于系統(tǒng)全面地研究?！緟⒖嘉墨I】［1］張云飛,吳先均,文秀華,等.心肌肥厚機制研究進展［J］.心血管病學進展,2022,26(2):197.［2］alderneA,Thaik,TakahashiN,etal.Nitrixide,atrialnatriuretipeptideandyliGPinhibitthegrth-prtingeffetsfnrepinephrineinardiayytesandfibrblasts［J］.JlinInvest,1998,101:812.［3］劉培慶,魯偉,潘敬運.一氧化氮抑制AngⅡ介導的心肌肥大反響的信號機制［J］.生理學報,2022,54(3):213.［4］詹昌德.一氧化氮在防止心肌肥厚反響中的作用及機制［J］.生理科學進展,2000,31(4):322.［5］TzshentkeT.eas