醫(yī)院(yīyuàn)消毒滅菌的效果監(jiān)測

河北(héběi)醫(yī)科大學第二醫(yī)院史利克

第一頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13一、前言：1.醫(yī)院消毒是預防醫(yī)院內(nèi)感染的重要措施(cuòshī)之一2.消毒效果的監(jiān)測是評價

3.消毒設備運轉(zhuǎn)是否正常4.消毒藥劑是否有效

5.消毒方法是否合理

6.消毒效果是否達標的唯一手段第二頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13醫(yī)院消毒效果監(jiān)測(jiāncè)時需遵循以下原則

①監(jiān)測人員需經(jīng)過專業(yè)培訓，掌握一定的消毒知識；②熟悉消毒設備和藥劑性能;

③具備熟練(shúliàn)的檢驗技能;

④選擇合理的采樣時間(消毒后、使用前);

⑤遵循嚴格的無菌操作。第三頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13二、熱力滅菌效果(xiàoguǒ)的監(jiān)測方法

（一）壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測方法

1、化學監(jiān)測法:

⑴化學指示卡(管)監(jiān)測方法既能指示蒸汽溫度，又能指示溫度持續(xù)時間化學指示管(卡)放入大包和難以消毒(xiāodú)部位的物品包中央（舊版消毒技術規(guī)范是放入每一待滅菌的物品包中央）第四頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13⑵化學指示膠帶(jiāodài)監(jiān)測法：將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外第五頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13B－D試驗(shìyàn)⑶對預真空和脈動真空壓力蒸汽(zhēnɡqì)滅菌，每日進行一次B-D試驗。

設計原理

a.

使實驗包成為滅菌器內(nèi)殘留空氣的聚焦點，它相對較大的面積和可透氣布料易吸附、“捕捉”殘留空氣。

b.真空測試圖上的化學試劑對殘留空氣具有敏感性。第六頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13第七頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13第八頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13B－D試驗(shìyàn)方法

①將測試圖置于實驗包中間位置；

②然后(ránhòu)，將實驗包放于滅菌器室內(nèi)排氣口處，關閉柜門；

③進行134℃⒊5分鐘滅菌處理完畢，打開柜門，觀察測試結(jié)果。第九頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13B－D實驗(shíyàn)包的制備實驗包由46~50cm×80~90cm純棉布巾組成，布巾先橫折為三層，再縱折成六層。將折好的布巾一條摞一條至25cm高度。摞放時，各層布巾按折疊側(cè)左右交替擺好，以使兩側(cè)厚度相等(xiāngděng)。布巾擺好后，將真空測試圖夾放于中央布巾之間，然后用布包巾包好，外面用化學指示膠帶固定好，成為一個實驗包。整個實驗包的大小高約25cm，寬約23cm，長約27cm，重約5kg。第十頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13B——D實驗(shíyàn)條件

⒈實驗規(guī)定在134℃蒸汽條件下，使用3.5分鐘觀察結(jié)果(jiēguǒ)，最長不超4分鐘。⒉測試圖必須夾放于布包的中央層位置。⒊實驗包放在滅菌器底層，靠近柜門與排氣口處。

⒋實驗在每天第一次滅菌前空鍋進行。第十一頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13結(jié)果(jiēguǒ)判斷結(jié)果判斷合格：測試圖變黑且均勻，即中央部分和邊緣部分顏色一致，表示滅菌器抽真空系統(tǒng)良好。不合格：測試圖變色不均勻，通常中央比邊緣部分顏色淺，表示空氣排除不徹底(chèdǐ)，須檢查、修理后使用.第十二頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13B-D測試失敗(shībài)原因分析真空泵效果下降自控系統(tǒng)失靈,抽氣時間縮短柜室密封性能下降,不能維持規(guī)定的負壓(fùyā)空氣起始溫度低,重力作用明顯送入蒸汽動能偏高,將過多的空氣擠入試驗包試驗包與柜室容量相比過小,產(chǎn)生小裝量效應B-D試驗未按規(guī)定進行第十三頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-132、生物(shēngwù)監(jiān)測法

⑴指示菌株：指示菌株為耐熱(nairè)的嗜熱脂肪桿菌芽孢(ATCC7953或SSIK31株)，菌片含菌量為5.O×l05cfu/片~5.O×l06cfu／片，在121℃±O.5℃條件下，D值（殺滅90%微生物所需時間）為1.3min~1.9min，殺滅時間(KT值)≤19min，存活時間(ST值)為≥3.9min。⑵培養(yǎng)基：試驗用培養(yǎng)基為溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。第十四頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13

⑶檢測(jiǎncè)方法將兩個嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標準試驗包中心(zhōngxīn)部位。在下排氣壓力蒸汽滅菌柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個標準試驗包(由3件平紋長袖手術衣，4塊小手術巾，2塊中手術巾，1塊大毛巾，30塊lOcm×lOcm8層紗布敷料包裹成(25cm×30cm×30cm大小)。第十五頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13預真空和脈動真空壓力(yālì)蒸汽滅菌器

預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內(nèi)，排氣門上方放置一個標準測試包(由16條全棉手術巾4lcm×66cm，將每條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層然后(ránhòu)疊放，作成23cm×23cm×l5cm大小的測試包)。第十六頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13手提壓力(yālì)蒸汽滅菌器

手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒(22cm×l3cm×6cm)代替標準試驗包，盒內(nèi)盛滿中試管，指示菌片放于中心(zhōngxīn)部位的兩只滅菌試管內(nèi)(試管口用滅菌牛皮紙包封)，將貯物盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。第十七頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13檢測(jiǎncè)方法經(jīng)一個滅菌周期后，在無菌條件下，取出標準試驗包或通氣貯物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)56℃±1℃培養(yǎng)7d(自含式生物指示物按說明書執(zhí)行)，觀察培養(yǎng)基顏色變化(biànhuà)。檢測時設陰性對照和陽性對照。第十八頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13快速檢測(24小時(xiǎoshí)出結(jié)果)第十九頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13⑷結(jié)果(jiēguǒ)判定

每個指示菌片接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色，判定為滅菌(mièjūn)合格：指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基，由紫色變?yōu)辄S色時，則滅菌(mièjūn)過程不合格。

注意事項：監(jiān)測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認可，并在有效期內(nèi)使用，生物指示物監(jiān)測應1月1次。第二十頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13㈡、干熱滅菌效果監(jiān)測(jiāncè)方法

1、化學檢測法

⑴檢測方法：將既能指示溫度又能指示溫度持續(xù)時間的化學指示劑3個～5個分別放入待滅菌的物品中，并置于滅菌器最難達到滅菌的部位。經(jīng)一個(yīɡè)滅菌周期后，取出化學指示劑，據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。第二十一頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13⑵結(jié)果(jiēguǒ)判定

檢測時，所放置(fàngzhì)的指示管的顏色及性狀均變至規(guī)定的條件，則判為達到滅菌條件；若其中之一未達到規(guī)定的條件，則判為未達到滅菌條件。

第二十二頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13

2、物理(wùlǐ)檢測法：(熱電偶檢測法)

⑴檢測方法：檢測時，將多點溫度檢測儀的多個探頭(tàntóu)分別放于滅菌器各層內(nèi)、中、外各點。關好柜門，將導線引出，由記錄儀中觀察溫度上升與持續(xù)時間。⑵結(jié)果判定：若所示溫度(曲線)達到頂置溫度，則滅菌溫度合格。

第二十三頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13⑶生物(shēngwù)檢測法

①指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372)，菌片含菌量為5.0×105cfu/片~5.0×106cfu/片。其抗力要求同上。

②檢測(jiǎncè)方法：將枯草桿菌芽孢菌片分別裝入滅菌中試管內(nèi)(1片/管)。滅菌器與每層門把手對角線內(nèi)，外角處放置2個含菌片的試管，試管帽置于試管旁，關好柜門，經(jīng)一個滅菌周期后，待溫度降至80℃時，加蓋試管帽后取出試管。第二十四頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13在無菌條件下，加入普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(5ml／管)，以36℃±1℃培養(yǎng)48h，觀察初步結(jié)果(jiēguǒ)，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第七日。

③結(jié)果判定:若每個指示菌片接種的肉湯管均澄清，判為滅菌合格，若指示菌片之一接種的肉湯管混濁，判為不合格。對難以判定的肉湯管，取o．1ml接種于營養(yǎng)瓊脂甲板，用滅菌L棒涂勻，放36℃±1℃培養(yǎng)48h，觀察菌落形態(tài)，并做涂片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長，若有指示菌生長，判為滅菌不合格；若無指示菌生長，判為滅菌合格。第二十五頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13

三、環(huán)氧乙烷(EO)滅菌(mièjūn)效果監(jiān)測㈠滅菌效果監(jiān)測每次滅菌均應進行程序監(jiān)測每個滅菌物品的外包裝應粘貼包外化學指示膠帶，作為滅菌過程的標志；包內(nèi)放置化學指示卡，作為滅菌效果的參考。每月應做生物監(jiān)測，移植物必須等生物監(jiān)測結(jié)果為陰性(yīnxìng)時方可使用。

第二十六頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13第二十七頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13第二十八頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13生物(shēngwù)指示物監(jiān)測法

一般每月用生物指示物監(jiān)測(jiāncè)一次。生物指示物用枯草桿菌黑色變種芽孢(ATCC9372)，抗力要求為：菌量在5×105cfu／片~5×106cfu／片，在環(huán)氧乙烷劑量為600mg／L±30mg/L，作用溫度為54℃±2℃，相對濕度為60％±10％條件下，其殺滅90％該微生物的D值為2.6min～5.8min，存活時間應≥7.8min，死亡時間應≤58min。第二十九頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13生物(shēngwù)指示劑的要求

菌量為5×103cfu／片~5×104cfu／片。通常做常采用以下數(shù)量的生物指示物較為適宜：

⑴滅菌器柜室可用體積小于5m3時，至少放置10個菌片；

⑵滅菌器柜室可用體積為5m3至10m3時，每增加1m3，增加1個菌片；

⑶滅菌器柜室可用體積大于10m3時，每增加2m3，增加1個菌片。生物指示物應放在那些在性能鑒定(jiàndìng)時發(fā)現(xiàn)是最難滅菌的部位，并均勻分布于整個滅菌物品中。第三十頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13要求(yāoqiú)：每次滅菌都應進行滅菌過程監(jiān)測(jiāncè)。檢測所用化學和微生物指示物必須經(jīng)衛(wèi)生部批準，并在有效期內(nèi)使用。第三十一頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13四、紫外線消毒效果(xiàoguǒ)的監(jiān)測

㈠紫外線燈管輻照度值的測定

1、紫外線輻照計測定法：

開燈5min后，將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計探頭(tàntóu)置于被檢紫外線燈下，待儀表穩(wěn)定后，讀數(shù)。第三十二頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-132、紫外線強度照射(zhàoshè)指示卡監(jiān)測法開啟紫外線燈5min后，將指示卡置紫外燈下垂直距離lm處，有圖案一面朝上，照射lmin(紫外線照射后，圖案正中光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色)，觀察指示卡色塊的顏色，將其與標準(biāozhǔn)色塊比較，讀出照射強度。第三十三頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-133、結(jié)果(jiēguǒ)判定

普通30w直管型紫外線燈，新燈輻照強度≥90μW/cm2為合格；使用中紫外線燈輻照強度≥70μW/cm2為合格；30W高強度紫外線新燈的輻照強度≥180μW/cm2為合格。注意：測定時電壓220V±5V，溫度20℃～25℃，相對濕度<60%，紫外線輻照計必須檢定。指示卡應獲得衛(wèi)生(wèishēng)許可批件。第三十四頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13五、醫(yī)療器械滅菌效果(xiàoguǒ)的監(jiān)測

無菌檢驗是檢查無菌物品是否無菌的一種方法。

注意：

1、無菌檢驗應在潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行，應嚴格遵守無菌操作，避免微生物污染；對單向流空氣區(qū)域及工作臺面，必須進行潔凈度驗證。2、采樣時間(shíjiān)在滅菌后，保存有效期內(nèi)。第三十五頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13無菌檢驗(jiǎnyàn)前準備

洗脫液與培養(yǎng)基無菌性試驗：無菌試驗前3d，于需-厭養(yǎng)培養(yǎng)基與霉菌培養(yǎng)基內(nèi)各接種lml洗脫液，分別(fēnbié)置30℃~35℃與20℃～25℃培養(yǎng)72h，應無菌生長。第三十六頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13小件醫(yī)療器械的采樣(cǎiyànɡ)取縫合(fénghé)針、針頭、刀片等小件醫(yī)療器械5件直接浸入6管需—厭氧培養(yǎng)管(其中一管作陽性對照)與4管霉菌培養(yǎng)管。培養(yǎng)基用量為15ml/管。第三十七頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13注射器采樣(cǎiyànɡ)取5付注射器，在5ml洗脫液中反復抽吸5次，洗下管內(nèi)(ɡuǎnnèi)細菌，混和后接種需-厭養(yǎng)菌培養(yǎng)管(共6管，其中1管作陽性對照)與霉菌培養(yǎng)管(共4管)。接種量：lml注射器為0.5ml，2ml注射器為lml，5ml~10ml注射器為2ml，20ml~50ml注射器為5ml。

培養(yǎng)基用量：接種量為2ml以下為15ml/管，接種量5ml為40ml/管。第三十八頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13大件醫(yī)療器械的采樣(cǎiyànɡ)手術鉗、鑷子等大件醫(yī)療器械取2件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復涂抹采樣，將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中，將采樣液混勻，接種(jiēzhòng)于需—厭氧培養(yǎng)管(共6管，其中1管作陽性對照)與霉菌培養(yǎng)基(共4管)。接種(jiēzhòng)量為1ml/管，培養(yǎng)基用量為15ml/管。第三十九頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13培養(yǎng)(péiyǎng)時間將需—厭氧培養(yǎng)管以及陽性與陰性對照管均于30℃～35℃培養(yǎng)5d，霉菌培養(yǎng)管與陰性對照管于20℃～25℃培養(yǎng)7d，培養(yǎng)期間逐日檢查是否有菌生長。如加入供試品后培養(yǎng)基出現(xiàn)混濁或沉淀，經(jīng)培養(yǎng)后不能從外觀判斷時，可取(kěqǔ)培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種入另一支相同的培養(yǎng)基中或斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h~72h后觀察。第四十頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-133、注意事項

（1）送檢時間不得超過6h，若樣品保存于0℃～4℃，則不得超過24h。

（2）被采樣本表面積<100cm2取全部表面；被采樣本表面積≥100cm2，取100cm2。

（3）若消毒因子(yīnzǐ)為化學消毒劑，采樣液中應加入相應中和劑。

第四十一頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13六、手和皮膚黏膜消毒效果(xiàoguǒ)監(jiān)測

1、手的采樣

被檢人五指并攏，用浸有含相應(xiāngyīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面積約30cm2)，并隨之轉(zhuǎn)動采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入lOml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，立即送檢。第四十二頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13

2、皮膚粘膜(zhānmó)采樣

用5cm×5cm的標準滅菌規(guī)格板，放在被檢皮膚處，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，剪去手接觸(jiēchù)部位后，將棉拭子投入lOml含相應中和劑的無菌洗脫液的試管內(nèi)，立即送檢。不規(guī)則的粘膜皮膚處可用棉拭子直接涂擦采樣。第四十三頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13細菌(xìjūn)總數(shù)檢測

將采樣管在混勻器上振蕩(zhèndàng)20s或用力振打80次，用無菌吸管吸取1.Oml待檢樣品接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個平皿，內(nèi)加入己溶化的45℃～48℃的營養(yǎng)瓊脂15ml~18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固。置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h，計數(shù)菌落數(shù)。第四十四頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13衛(wèi)生學標準(biāozhǔn)I、Ⅱ類區(qū)域工作人員：細菌總數(shù)≤5cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單孢菌為消毒合格。Ⅲ類區(qū)域工作人員：細菌總數(shù)≤l0cfu/cm2，并未檢出金色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。Ⅳ類區(qū)域工作人員：細菌總數(shù)≤15cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房(bìngfáng)的工作人員手上，不得檢出沙門菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌為消毒合格。第四十五頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13注意事項

①在消毒后立即采樣。

②皮膚(pífū)粘膜采樣處，若表面不足5cm×5cm可用相應面積的規(guī)格板采樣。第四十六頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13七、物品(wùpǐn)和環(huán)境表面消毒效果的監(jiān)測

用5cm×5cm的標準滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，連續(xù)采樣4個，采樣面積≥lOOcm2，用浸有含相應中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎(héngshù)往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭子投入lOml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，立即送檢。門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣。

第四十七頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13衛(wèi)生學標準(biāozhǔn)I、Ⅱ類區(qū)域：細菌(xìjūn)總數(shù)≤5cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。Ⅲ類區(qū)域細菌:總數(shù)≤10cfu/cm2，并末檢出致病菌為消毒合格。

IV類區(qū)域細菌：總數(shù)≤15cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。母嬰同室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門菌。第四十八頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13八、空氣(kōngqì)消毒效果的監(jiān)測平板暴露法

1、布點(bù diǎn)方法：室內(nèi)面積≤30m2，設內(nèi)、中、外對角線3點，內(nèi)、外點布點部位距墻壁1M處；室內(nèi)面積>30m2，設4角及中央5點，4角的布點部位距墻壁lm處。

2、采樣方法：將普通營養(yǎng)瓊脂平板（直徑為9cm）放在室內(nèi)各采樣點處，采樣高度為距地面1.5m采樣時將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5min，蓋好立即送檢。第四十九頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13平板暴露(bàolù)法結(jié)果計算公式細菌總數(shù)(zǒngshù)(cfu/m3)=50000N/(A×T)

式中A為平板面積(cm2);T為平板暴露時間(min)；N為平均菌落數(shù)(cfu)。

第五十頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13衛(wèi)生學標準(biāozhǔn)

I類區(qū)域：細菌總數(shù)(zǒngshù)≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格；Ⅱ類區(qū)域：細菌總數(shù)≤200cfu/m3(或4cfu／平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格：Ⅲ類區(qū)域：細菌總數(shù)≤500cfu/m3(或l0cfu平板)，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。第五十一頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13注意事項1、在消毒處理(chǔlǐ)后、操作前進行采樣。2、采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min進行采樣。

第五十二頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13九、消毒液的監(jiān)測(jiāncè)

有效氯含量測定,可以用試紙法測定。

使用方法：

1、消毒劑溶液有效成分濃度在測定范圍內(nèi)時，取試紙浸于消毒液中，即刻取出，半分鐘內(nèi)在自然光下與標準色塊比較，讀值。2、消毒液濃度高于試紙測定范圍時，可先稀釋消毒劑，再測定。注意(zhùyì)：試紙浸濕后時間超過1分鐘，顏色逐漸消退，結(jié)果不準確。第五十三頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13戊二醛濃度(nóngdù)測定試紙法：1、從小瓶中取出一條；2、將指示色塊完全浸沒于戊二醛溶液，一秒內(nèi)取出；3、沾下瓶蓋上的紙墊，去除多余的液體；4、橫置于瓶蓋上，注意不要將色塊面朝下以免受到污染；5、等候5~8分鐘判讀(pàndú)結(jié)果。第五十四頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13使用(shǐyòng)中消毒液染菌量測定

1、涂抹法：用無菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含有相應中和劑的采樣管內(nèi)混勻，用無菌吸管吸取上述溶液0.2ml，滴于干燥普通瓊脂平板，每份樣品同時做2個平行樣，一平板置20℃培養(yǎng)7d，觀察霉菌(méjūn)生長情況，另一個平板置35℃溫箱培養(yǎng)72h記數(shù)菌落數(shù)，同時按十五的原則檢測致病菌。消毒液染菌量(cfu/ml)=每個平板上的菌落數(shù)×50第五十五頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-132、傾注(qīngzhù)法用無菌吸管吸取消毒液1.Oml，加入到9.0ml含相應中和劑的無菌生理鹽水采樣管中混勻，分別取0.5ml放入2只滅菌平皿內(nèi)，加入已熔化的45℃~48℃的營養(yǎng)(yíngyǎng)瓊脂15ml~18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，一平板置20℃培養(yǎng)7d，觀察霉菌生長情況；另一個平板置36℃±1℃培養(yǎng)72h，計數(shù)菌落數(shù)，同時按十五的原則檢測致病菌。消毒液染菌量(cfu/ml)=每個平板上的菌落數(shù)×20第五十六頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13注意事項①消毒液染菌量≤100cfu/ml，并未檢出致病菌為合格(hégé)。②采樣后1h內(nèi)檢測。

第五十七頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13十、餐具消毒(xiāodú)效果監(jiān)測㈠采樣時間：在消毒后、使用前進行采樣。㈡采樣方法：將2.0cm×2.5cm無菌濾紙片于無菌洗脫液中浸濕均勻，貼在食具表面，經(jīng)5min取下，每10張濾紙合為一份樣本(yàngběn)(相當于50cm2采樣面積)，投入含50m1生理鹽水的lOOml三角燒瓶中，于4h內(nèi)送檢。

第五十八頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13注意事項

①紡織品：細菌總數(shù)(zǒngshù)≤5cfu/cm2，大腸菌群末檢出。②餐具若用化學消毒劑消毒，采樣液中應加入相應中和劑。

第五十九頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13十一、衛(wèi)生潔具消毒(xiāodú)效果監(jiān)測

㈠采樣時間：在消毒后、使用前進行采樣。㈡采樣方法：便器、尿壺等容器可用沾有含相應中和劑的無菌生理鹽水的棉拭子，反復涂擦容器的內(nèi)表面及內(nèi)口處，剪占手接觸部位后，將棉拭子投入5ml無菌生理鹽水試管中，立即送檢。拖把、抹布(mābù)等物品可用無菌的方法剪取lcm×3cm，直接投入5ml含相應中和劑的無菌生理鹽水中，立即送檢。

第六十頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13結(jié)果(jiēguǒ)判定未檢出致病菌為消毒(xiāodú)合格。

第六十一頁，共六十九頁。醫(yī)院消毒滅菌的效果監(jiān)測.07-06-13十二(shíèr)、內(nèi)鏡消毒滅菌效果的監(jiān)測

㈠采樣(cǎiyànɡ)時間：在消毒滅菌后、使用前進