.板藍根顆粒微生物限度計數(shù)方法適用性驗證方案方案編號：VOL-QWX-012年月..驗證方案審批表板藍根顆粒微生物限度計數(shù)方法適用性驗證方案

驗證方案名稱謝謝閱讀VOL-QWX-012驗證方案編號方案起草人起草日期方案審核部門審核人審核日期審核意見化驗室質(zhì)量部批準意見批準人批準日期執(zhí)行日期..板藍根顆粒微生物限度計數(shù)方法適用性驗證方案目錄1.概述2.目的3.依據(jù)4.范圍5.驗證小組人員及職責6.驗證實施條件7.合格標準8.驗證方法9.驗證結(jié)果10.驗證報告..1.概述1.1樣品資料品名：板藍根顆粒2015版四部通則精品文檔放心下載批號：試驗日期：1.2處方：板藍根顆粒為《中國藥典》2015版一部中藥成方制劑法定標準。由板藍根制精品文檔放心下載成，輔料為：蔗糖、糊精。1.3功能主治：清熱解毒，涼血利咽。用于肺胃熱盛所致的咽喉腫痛、口咽干燥；急性扁感謝閱讀桃體炎見上述證候者。1.418個月。1.5依據(jù)《中國藥典》2015版四部通則“非無菌不含藥材原粉的中藥制劑的微生物限度標感謝閱讀謝謝閱讀菌和酵母菌總數(shù)計數(shù)，控制菌檢查大腸埃希菌；擬采用“平皿法”進行微生物計數(shù)方法檢感謝閱讀查，采用“常規(guī)法”進行控制菌檢查。2.目的：確認所采用的方法適用于該產(chǎn)品的微生物計數(shù)和控制菌檢查，以確保測定方法的感謝閱讀可靠性，確保檢驗結(jié)果的準確性。若檢驗程序或產(chǎn)品發(fā)生變化，可能影響檢驗結(jié)果時，計感謝閱讀數(shù)方法應重新進行適用性試驗。3.依據(jù)《中國藥典》2015年版四部“非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查——微生物計數(shù)法”謝謝閱讀《中國藥典》2015年版四部“非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查——控制菌檢查法”感謝閱讀《中國藥典》2015年版四部——“非無菌產(chǎn)品微生物限度標準”謝謝閱讀4.范圍：本驗證方案適用于？？制藥有限公司板藍根顆粒微生物限度計數(shù)方法的適用性試精品文檔放心下載驗。5.驗證小組人員及職責姓名所在部門職責6.驗證實施條件6.1檢驗用水：公司制備的經(jīng)檢驗合格的純化水。..6.2檢驗儀器設備：驗證涉及的檢驗儀器（設備）與檢驗方法，經(jīng)過確認或再確認后合精品文檔放心下載格。所用檢驗設備如下：SPX-250型生化培養(yǎng)箱PYX-DHS-400型隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱101-2型電熱鼓風干燥箱DHP-9272型恒溫培養(yǎng)箱DHP-9032型恒溫培養(yǎng)箱YX-400型醫(yī)用雙層普型不銹鋼雙層立式電熱蒸汽壓力消毒器謝謝閱讀DSX-280KB24立升手提式壓力蒸汽滅菌器GSP-9080型隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱6.3驗證培養(yǎng)基：驗證所使用的培養(yǎng)基經(jīng)過培養(yǎng)基的適用性檢查，結(jié)果符合藥典要求。所精品文檔放心下載用培養(yǎng)基如下：名稱來源批號胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基麥康凱液體培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基6.4驗證菌株：名稱來源批號金黃色葡萄球菌菌株枯草芽孢桿菌菌株銅綠假單胞菌菌株白色念珠菌菌株黑曲霉菌菌株大腸埃希菌菌株7.合格標準7.1在需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)的三次獨立平行試驗中，試驗組菌落數(shù)減去供試品對照精品文檔放心下載組菌落數(shù)的值與菌液對照組菌落數(shù)的比值應在0.5～2范圍內(nèi)。感謝閱讀7.2在控制菌檢查的試驗中試驗組應檢出試驗菌，陽性對照組應檢出試驗菌，陰性對照組謝謝閱讀不得檢出試驗菌。..8.驗證方法8.1菌液制備所有使用的菌株均為西林瓶包裝的定量菌株。定量菌株適用于培養(yǎng)基適用性檢查、控精品文檔放心下載制菌檢查、促生長試驗、靈敏度檢查等。使用前將金黃色葡萄球菌株西林瓶、枯草芽孢桿感謝閱讀菌株西林瓶、白色念珠菌株西林瓶、銅綠假單胞菌菌株、黑曲霉菌株西林瓶從冰箱中拿出精品文檔放心下載平衡至室溫，加入含有11ml無菌生理鹽水的試管中，蓋上瓶蓋，靜置約30s，震蕩精品文檔放心下載10s，吸取1ml加至適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得含量為10～100cfu的菌落。菌液制備后若感謝閱讀在室溫下放置，應在2小時內(nèi)使用；若保存在2～8℃，可在24小時內(nèi)使用。謝謝閱讀8.2菌液的檢驗8.2.1取上述金黃色葡萄球菌株、枯草芽孢桿菌株、大腸埃希菌菌株、銅綠假單胞菌菌株精品文檔放心下載的稀釋液各1ml，分別用45℃的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基20ml注皿，各平行測定兩皿，謝謝閱讀30℃～35℃培養(yǎng)5天，計數(shù)，應為10～100cfu/ml，結(jié)果見表1。謝謝閱讀8.2.2取上述白色念珠菌菌株、黑曲霉菌株的稀釋液各1ml，分別用45℃的沙氏葡萄糖瓊感謝閱讀脂培養(yǎng)基20ml注皿，各平行測定兩皿，20℃～25℃培養(yǎng)7天，計數(shù)，應為10～謝謝閱讀100cfu/ml，結(jié)果見表。8.3需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法適用性試驗8.3.1供試液制備：取供試品10ml，加ph7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml，制成供精品文檔放心下載試液，作為1：10的供試液。8.3.2試驗組：取供試液分別按1ml/皿加入平皿后，加入上述10～100cfu的試驗菌，立即感謝閱讀傾注至《中國藥典》2015版規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基中，置規(guī)定的溫度培養(yǎng)3～5天，觀察結(jié)謝謝閱讀果。8.3.3菌液組：除不加供試液外，同試驗組測定方法。謝謝閱讀8.3.4供試品對照組：除不加菌液外，同試驗組測定方法。感謝閱讀8.3.5將以上平皿需氧菌置30～35℃培養(yǎng)不超過5天，霉菌、酵母菌置20～25℃培養(yǎng)不謝謝閱讀超過7天，并在5天和7天分別進行計數(shù)。8.3.6回收比值的計算：試驗組的菌落數(shù)—供試品對照組菌落數(shù)—————————————————————————菌液對照組菌落數(shù)8.3.7實驗結(jié)果：見表2～8。8.4控制菌計數(shù)方法適用性試驗8.4.1供試液制備：同“需氧菌、霉菌和酵母菌計數(shù)方法適用性試驗”供試液制備。感謝閱讀..8.4.2試驗組：取供試液10ml加入100ml胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，加入上述大腸埃希菌精品文檔放心下載菌液，置30℃～35℃培養(yǎng)24小時后，取培養(yǎng)物1ml接種至100ml麥康凱液體培養(yǎng)基中，感謝閱讀42℃～44℃培養(yǎng)24～48小時后，取麥康凱液體培養(yǎng)物劃線接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基平板感謝閱讀上，30～35℃培養(yǎng)18～72小時。8.4.3陰性對照組：以等體積的PH7.0蛋白胨緩沖液代替供試液，除不加菌液精品文檔放心下載外，其他操作同試驗組。8.4.4陽性對照組:以等體積的PH7.0蛋白胨緩沖液代替供試液，其他操作同謝謝閱讀試驗組。8.4.5供試品對照組：取供試液10ml加入100ml胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，置30℃～精品文檔放心下載35℃培養(yǎng)24小時，除不加菌液外，其他操作同試驗組。感謝閱讀8.4.6實驗結(jié)果：見表9。9.驗證結(jié)果表1、試驗用菌液檢查（菌落計數(shù)單位：cfu）試驗次數(shù)計數(shù)方法大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌銅綠假單胞菌白色念珠菌黑曲霉菌1平皿法平均2平皿法平均平皿法3平均表2、白色念珠菌計數(shù)方法的驗證（菌落計數(shù)單位：cfu，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）謝謝閱讀方法試驗次數(shù)菌液組菌落數(shù)平均試驗組菌落數(shù)平均供試品對照組菌落數(shù)平均比值1平皿法23..表3、黑曲霉計數(shù)方法的驗證（菌落計數(shù)單位：cfu，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基）精品文檔放心下載方法試驗次數(shù)菌液組菌落數(shù)平均試驗組菌落數(shù)平均供試品對照組菌落數(shù)平均比值1平皿法23表4、金黃色葡萄球菌計數(shù)方法的驗證（菌落計數(shù)單位：cfu，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基）精品文檔放心下載方法試驗次數(shù)菌液組菌落數(shù)平均試驗組菌落數(shù)平均供試品對照組菌落數(shù)平均比值1平皿法23表5、枯草芽孢桿菌計數(shù)方法的驗證（菌落計數(shù)單位：cfu，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基）謝謝閱讀方法試驗次數(shù)菌液組菌落數(shù)平均試驗組菌落數(shù)平均供試品對照組菌落數(shù)平均比值1平皿法23表6、銅綠假單胞菌計數(shù)方法的驗證（菌落計數(shù)單位：cfu，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基）感謝閱讀方法試驗次數(shù)菌液組菌落數(shù)平均試驗組菌落數(shù)平均供試品對照組菌落數(shù)平均比值1平皿法23表7、白色念珠菌計數(shù)方法的驗證（菌落計數(shù)單位：cfu，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基）感謝閱讀方法試驗次數(shù)菌