仿制藥分析方法的驗證(yànzhèng)和藥品穩(wěn)定性的研究譚海松PhDNov27,2011第一頁，共七十六頁。主要(zhǔyào)內(nèi)容仿制(fǎngzhì)藥的GMP要求仿制藥分析方法的驗證仿制藥穩(wěn)定性的研究第二頁，共七十六頁。FDA官員(guānyuán)來制藥公司檢查時的留言我們并不期望在檢查過程中所有事情都是完美無缺的,但是我們的確希望所檢查到的東西(dōngxī)全在你們的有效控制之中.第三頁，共七十六頁。藥檢局對仿制(fǎngzhì)藥的要求仿制藥品系指仿制國家已批準(zhǔn)正式生產(chǎn)并收載于國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的品種.仿制藥與被仿制藥應(yīng)具有相同(xiānɡtónɡ)的劑型,劑量,質(zhì)量,用途,用法,效果和安全度.第四頁，共七十六頁。仿制(fǎngzhì)藥的質(zhì)量控制藥品(yàopǐn)測試分析方法分析方法驗證(yànzhèng)科學(xué)性(理論正確)藥品質(zhì)量可靠性(避免人為和儀器誤差)準(zhǔn)確性(正確反映真實值)第五頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)的前提:GMP標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)物和試劑儀器(yíqì)操作人員分析方法驗證標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序

(SOP)實驗室……第六頁，共七十六頁。標(biāo)準(zhǔn)(biāozhǔn)物和試劑的SOP要求包裝上注明(zhùmínɡ)生產(chǎn)廠家,批號和有效期如生產(chǎn)廠家沒有提供有效期,SOP要規(guī)定有效期實驗記錄要有所用到的標(biāo)準(zhǔn)物和試劑的生產(chǎn)廠家,批號和有效期第七頁，共七十六頁。分析(fēnxī)儀器的SOP要求所有分析儀器都要有使用記錄(jìlù)分析儀器在使用前要用標(biāo)準(zhǔn)物校準(zhǔn)分析儀器每半年進(jìn)行一次儀器校準(zhǔn)第八頁，共七十六頁。HPLC在使用前用標(biāo)準(zhǔn)物校準(zhǔn)(jiàozhǔn)舉例溶劑空白定量限或分離效率(xiàolǜ)檢查標(biāo)準(zhǔn)物溶液-1(注射3次)標(biāo)準(zhǔn)物溶液-2(注射3次)樣品溶液(每隔10個樣品注射標(biāo)準(zhǔn)物溶液-1,2)

. .標(biāo)準(zhǔn)物溶液-1標(biāo)準(zhǔn)物溶液-2定量限或分離效率檢查溶劑空白第九頁，共七十六頁。實驗室的SOP要求(yāoqiú)所有儀器都要有校準(zhǔn)日期或相應(yīng)的注釋所有樣品(yàngpǐn)和溶液都要有批號,有效期和來源實驗室中的工作人員要有必要的安全防護(hù)實驗室要保持整潔第十頁，共七十六頁。工作人員的SOP要求(yāoqiú)每個工作人員都要有相關(guān)SOP的培訓(xùn)(péixùn)記錄工作人員每年至少參加一次GMP培訓(xùn)第十一頁，共七十六頁。主要(zhǔyào)內(nèi)容仿制藥的GMP要求仿制藥分析方法的驗證(yànzhèng)仿制藥穩(wěn)定性的研究第十二頁，共七十六頁。仿制(fǎngzhì)藥的研發(fā)過程找到原料藥穩(wěn)定性的研究(yánjiū)專利(zhuānlì)保護(hù)將失效或?qū)＠魬?zhàn)生物等效性臨床試驗簡化新藥(ANDA)申請分析方法的研究和驗證配方和生產(chǎn)工藝的研究

第十三頁，共七十六頁。成品藥片分析樣品(yàngpǐn)的制備實例把10片藥品放于500毫升容量瓶中,加入400毫升溶劑,以200rpm搖30分鐘,然后加入溶劑到刻度.搖勻后,以8,000rpm高速(ɡāosù)離心10分鐘,取上清液用高壓液相色譜(HPLC)進(jìn)行分析.分析方法的驗證API全部溶于溶劑HPLC正確分析出樣品溶液的濃度分析結(jié)果的可靠性第十四頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)的內(nèi)容API全部溶于溶劑 準(zhǔn)確度,精密度正確分析出樣品溶液(róngyè)的濃度 專屬性,線性,范圍,檢測限,定量限分析結(jié)果可靠性

耐用性,精密度第十五頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)內(nèi)容專屬性線性準(zhǔn)確度精密度范圍(fànwéi)檢測限,定量限耐用性樣品溶液穩(wěn)定性第十六頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)-專屬性專屬性的定義

在其它成分可能存在下,分析方法能夠正確(zhèngquè)檢測出被分析物的特性.專屬性的測定舉例:高壓液相色譜第十七頁，共七十六頁。高壓(gāoyā)液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜峰的容量因子:1<k<20色譜峰分辨率:R>=1.5色譜峰的拖尾系數(shù)(xìshù):T<2.0主要成分色譜峰純度:>=99.9%(LC/MS,DAD,UV)第十八頁，共七十六頁。高壓(gāoyā)液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜(sèpǔ)峰的容量因子:k=t/tM-1色譜峰分辨率:R=2(t2-t1)/(W1+W2)第十九頁，共七十六頁。高壓液相色譜(sèpǔ)的系統(tǒng)適用性色譜(sèpǔ)峰的拖尾系數(shù):T=W0.05/(2f)第二十頁，共七十六頁。高壓(gāoyā)液相色譜的系統(tǒng)適用性色譜(sèpǔ)峰分辨率:2.0色譜峰的拖尾系數(shù):1.0第二十一頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)-線性線性的定義

在測定范圍內(nèi),檢測結(jié)果與被分析物濃度呈線性關(guān)系的程度(chéngdù).線性的測定 在被分析物濃度20%-150%內(nèi),至少測5個濃度.例如20%,80%,100%,120%,150%

最小二乘法線性回歸,R>=0.999第二十二頁，共七十六頁。線性舉例(jǔlì)-HPLC第二十三頁，共七十六頁。線性舉例(jǔlì)-HPLC第二十四頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)-準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度的定義

測定結(jié)果與真實值之間的接近(jiējìn)程度.向制劑中加入已知量的被測物進(jìn)行回收率測定來驗證.

準(zhǔn)確度的測定 在3個濃度(80%,100%,120%)中,每個濃度制備3個樣品.每個濃度3個樣品的平均回收率必須在98-102%.第二十五頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)-精密度精密度的定義

同一樣品多次取樣測試結(jié)果的接近程度

精密度的測定:%RSD<=2%(6個樣品) 重復(fù)性:同一分析人所得結(jié)果的精密度 中間(zhōngjiān)精密度:同一實驗室,不同的日期,設(shè)備和人員所得結(jié)果的精密度 重現(xiàn)性:不同實驗室,不同人員所得結(jié)果的精密度第二十六頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)-范圍范圍的定義

分析藥品達(dá)到一定準(zhǔn)確(zhǔnquè)度,精密度和線性的區(qū)間.范圍的要求 含量測定:80-120%

含量均勻度測定:70-130% 溶出度:50-150%

雜質(zhì)測定:規(guī)定限度±20%第二十七頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)-檢測限和定量限

檢測限:試樣中被分析(fēnxī)物能被檢測到的最低量,一般定義為信噪比大于3:1定量限:試樣中被分析物能被定量測定的最低量,一般定義為信噪比大于10:1

第二十八頁，共七十六頁。檢測(jiǎncè)限和定量限信噪比的測量第二十九頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)-耐用性

耐用性的定義

測定條件發(fā)生小的變動(biàndòng)時,測定結(jié)果不受影響的承受程度

耐用性測定的舉例:高壓液相色譜 流動相:組成,pH值,流速的變動

色譜柱:廠家,批號,柱溫的變動

第三十頁，共七十六頁。分析方法驗證-樣品(yàngpǐn)溶液穩(wěn)定性

樣品溶液穩(wěn)定性的定義

樣品溶液在一定儲藏條件下可被重復(fù)使用的時間樣品溶液穩(wěn)定性的測定 樣品溶液穩(wěn)定性測定結(jié)果(jiēguǒ)是初始結(jié)果(jiēguǒ)%.

第三十一頁，共七十六頁。仿制(fǎngzhì)藥分析方法的來源中國藥典美國藥典（USP）歐洲藥典（EP）日本(rìběn)藥典（JP）原料藥廠家文獻(xiàn)第三十二頁，共七十六頁。分析方法驗證(yànzhèng)的參考文獻(xiàn)ICHQ2-ValidationofAnalyticalProcedures美國(měiɡuó)藥典（USP）第三十三頁，共七十六頁。主要(zhǔyào)內(nèi)容仿制(fǎngzhì)藥的GMP要求仿制藥分析方法的驗證仿制藥穩(wěn)定性的研究第三十四頁，共七十六頁。穩(wěn)定性測試(cèshì)目的考察原料藥或制劑的性質(zhì)在溫度,濕度,光線等條件的影響下隨時間變化的規(guī)律(guīlǜ).為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯存、運輸條件和有效期的確定提供科學(xué)依據(jù),以保證臨床用藥安全有效.第三十五頁，共七十六頁。穩(wěn)定性測試(cèshì)的趨勢包括更多的貯藏(zhùcáng)條件以使臨床實驗可在不同國家進(jìn)行提早開始穩(wěn)定性研究來附和不同國家藥檢局的要求第三十六頁，共七十六頁。穩(wěn)定性測試(cèshì)需要控制的條件測試內(nèi)容和標(biāo)準(zhǔn)貯存條件(tiáojiàn)

測試頻率測試完成時間第三十七頁，共七十六頁。原料藥的測試內(nèi)容(nèiróng)和標(biāo)準(zhǔn)外觀(wàiguān)變化:顏色物理性質(zhì)變化:晶型,熔點,熱失重,水含量主要成分含量:97-103%雜質(zhì)含量：<0.15%第三十八頁，共七十六頁。仿制(fǎngzhì)藥對原料藥的要求與被仿制藥品的原料藥具有相同的物理化學(xué)性質(zhì):如鹽,晶型和異構(gòu)體(對映體)原料藥的雜質(zhì)限度原料藥雜質(zhì)的含量應(yīng)低于質(zhì)控限度雜質(zhì)的種類和含量與被仿制藥相同如雜質(zhì)的含量明顯高于質(zhì)控限度且與被仿制藥不同,應(yīng)做必要的安全性研究原料藥中基因毒性雜質(zhì)要被有效(yǒuxiào)控制第三十九頁，共七十六頁。原料藥的雜質(zhì)(zázhì)限度最大日劑量報告限度鑒定限度質(zhì)控限度<=2g0.05%0.10%或1.0mg0.15%或1.0mg>2g0.03%0.05%0.05%第四十頁，共七十六頁。原料藥中基因毒性雜質(zhì)(zázhì)的控制基因毒性雜質(zhì)(zázhì)舉例alkylatingelectrophiliccenter,unstableepoxide,aromaticamines,aromaticnitro,azo-structure,N-nitroso-group基因毒性雜質(zhì)的控制限<1.5ug/day第四十一頁，共七十六頁。藥物制劑的測試內(nèi)容(nèiróng)和標(biāo)準(zhǔn)外觀變化:顏色主要成分含量：變化小于5%降解產(chǎn)物(chǎnwù):<0.2%溶出度:>70%at45min物理性質(zhì):水含量,顆粒度第四十二頁，共七十六頁。制劑的雜質(zhì)(zázhì)限度最大日劑量報告限度鑒定限度質(zhì)控限度<1mg0.1%1.0%,5ug1.0%,50ug1-10mg0.1%0.5%,20ug1.0%,50ug10-100mg0.1%0.2%,2mg0.5%,200ug100mg-1g0.1%0.2%,2mg0.2%,3mg1g-2g0.05%0.2%,2mg0.2%,3mg>2g0.05%0.1%0.15%第四十三頁，共七十六頁。溶出度測定模擬(mónǐ)人體的消化過程第四十四頁，共七十六頁。溶出度測定(cèdìng)的重要性控制藥物制劑質(zhì)量的一個重要指標(biāo)決定藥物制劑穩(wěn)定性的一個重要依據(jù)用來(yònɡlái)評價藥物制劑質(zhì)量是否受原料藥,配方,生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)地變化的影響

第四十五頁，共七十六頁。USP1:轉(zhuǎn)籃法溶出度測試過程中,藥品滯留在轉(zhuǎn)籃里可以調(diào)節(jié)緩沖液的值而不影響籃里的藥品適用(shìyòng)于片劑,膠囊等第四十六頁，共七十六頁。USP2:槳法溶出度測試過程(guòchéng)中,藥品留在容器底部的中間適用于片劑,膠囊和懸浮液等第四十七頁，共七十六頁。USPII

溶出度測定(cèdìng)儀器第四十八頁，共七十六頁。USPII溶出度測定(cèdìng)舉例第四十九頁，共七十六頁。USP3:往復(fù)式圓筒法藥品(yàopǐn)隨圓筒在溶液中做上下運動不同緩沖液可放在不同容器中適用于片劑,膠囊和緩釋藥等第五十頁，共七十六頁。USPIII

溶出度測定(cèdìng)儀器第五十一頁，共七十六頁。USPIII溶出度測定(cèdìng)舉例第五十二頁，共七十六頁。52USPIII溶出度測定(cèdìng)舉例第五十三頁，共七十六頁。溶出度測定方法的要素(yàosù)選擇適當(dāng)(shìdàng)緩沖液(pH):API在緩沖液中的溶解度是藥品100%釋放的5-10倍.設(shè)定適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)速(USPI,USPII):50rpm,75rpm,100rpm使用適當(dāng)?shù)姆治龇椒?UV,HPLC

第五十四頁，共七十六頁。海南(hǎinán)華益泰康藥業(yè)有限公司成立于2010年6月，?？谑幸M(jìn)的重大科技項目，總投資1億元人民幣。以新藥研發(fā)為主，集生產(chǎn)(shēngchǎn)、銷售于一體的綜合性國際化醫(yī)藥企業(yè)。公司關(guān)鍵核心研發(fā)人員均來自美國，有10年以上在美國著名制藥醫(yī)藥公司藥物制劑開發(fā)和技術(shù)管理的經(jīng)驗。第五十五頁，共七十六頁。海南(hǎinán)華益泰康藥業(yè)有限公司公司總建筑面積達(dá)1萬多平方米，4000平米的制劑研發(fā)和生產(chǎn)車間，2500平米的分析研發(fā)和質(zhì)量控制實驗室。生產(chǎn)車間及研發(fā)實驗室完全按照美國GMP要求標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，并引入國外藥廠的現(xiàn)代化設(shè)計和管理理念為產(chǎn)品(chǎnpǐn)把關(guān)。目前有近十個項目處于研發(fā)階段，大部分是緩釋和腸溶等復(fù)雜劑型。第五十六頁，共七十六頁。分析(fēnxī)實驗室儀器設(shè)備液相色譜(sèpǔ)：安捷倫1260和1100型氣相色譜：安捷倫7890加頂空自動進(jìn)樣紫外可見：安捷倫8453加自動進(jìn)樣器溶出儀：安捷倫708加自動進(jìn)樣器溶出儀USPIII：安捷倫(Varian)Bio-Dis傅里葉紅外：島津Prestige第五十七頁，共七十六頁。

穩(wěn)定性測試(cèshì)的貯存條件氣候帶溫度(OC)濕度(%RH)溫帶2145地中海氣候,亞熱帶2560干熱帶3025濕熱帶3070國際(guójì)氣候帶第五十八頁，共七十六頁。

穩(wěn)定性測試(cèshì)的貯存條件貯存條件最短時間(月)長期試驗25°C/60%RHor30°C/65%RH12加速試驗40°C/75%RH6第五十九頁，共七十六頁。穩(wěn)定性測試(cèshì)的儲存條件貯存條件最短時間(月)長期試驗5°C±3°C12加速試驗25°C/60%RH6第六十頁，共七十六頁。穩(wěn)定性測試(cèshì)的儲存條件貯存條件最短時間(月)長期貯存-20°C±5°C12第六十一頁，共七十六頁。光照(guāngzhào)穩(wěn)定性的測試總光照：1.2millionluxhours光強(qiáng)：200watthours/㎡實驗要求(yāoqiú)：裸露在光源下放在包裝中第六十二頁，共七十六頁。成品(chéngpǐn)藥有效期的確定穩(wěn)定性好的藥品一般以長期試驗結(jié)果(jiēguǒ)來確定有效期綜合加速試驗和長期試驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析如三批統(tǒng)計分析結(jié)果差別較小,取平均值為有效期如統(tǒng)計分析結(jié)果差別較大,取最短的為有效期第六十三頁，共七十六頁。穩(wěn)定性的測試(cèshì)頻率

長期試驗第一年:每三個月測一次第二年:每六個月測一次第二年以后:每年測一次加速試驗六個月時間:至少測三次(sāncì),包括起始點和第六個月的點.第六十四頁，共七十六頁。穩(wěn)定性的測試(cèshì)時間和有效期貯存條件(°C/%RH)測試時間(月)13691218每年結(jié)束5

T

T

T30/65or25/60

TTTTTTT40/75(T)TT

50TT

光照試驗T

有效期61212182430+12結(jié)束第六十五頁，共七十六頁。

測試(cèshì)完成時間測試時間(月)完成時間(天)<1141-321>328第六十六頁，共七十六頁。穩(wěn)定性測試(cèshì)樣品的選擇最少采用三批樣品采用一定規(guī)模生產(chǎn)的樣品能夠(nénggòu)代表大規(guī)模生產(chǎn)條件下的產(chǎn)品質(zhì)量合成路線配方包裝

第六十七頁，共七十六頁。穩(wěn)定性測試樣品(yàngpǐn)生產(chǎn)規(guī)模的要求口服固體制劑:片劑,膠囊等10000個制劑單位大體積包裝(bāozhuāng)的制劑:靜脈輸液穩(wěn)定性試驗所需總量的10倍以上第六十八頁，共七十六頁。哪些(nǎxiē)變化需要重測原料藥的穩(wěn)定性改變(gǎibiàn)合成路線改變合成過程中最后的純化步驟改變大規(guī)模生產(chǎn)的步驟改變分析方法和規(guī)格要求第六十九頁，共七十六頁。哪些(nǎxiē)變化需要重測成品藥的穩(wěn)定性不同的制劑和配方改變主要添加劑的比例改變生產(chǎn)步驟,生產(chǎn)設(shè)備(shèbèi)和生產(chǎn)地改變藥品的包裝第七十頁，共七十六頁。穩(wěn)定性研究(yánjiū)的特點周期長樣品選擇(xuǎnzé)較嚴(yán)格重測率高成本較高第七十一頁，共七十六頁。穩(wěn)定性研究(yánjiū)的參考文獻(xiàn)ICHQ1A-StabilityTestingofNewDrugSubstancesandProductsICHQ1B-StabilityTesting:PhotostabilityTestingofNewDrugSubstancesandProductsICHQ3-Impurities第七十二頁，共七十六頁。FDA483舉例(jǔlì)YourfirminvalidatedanalyticaldatawithoutanyscientificjustificationYourinvestigationattributesanunknownpeaktoinjectorcontaminationbutthispeakwasnotpresentinprevioussystemsuitabilityorsampleinjectionsYourcorrectiveactionaddressesproductdispositionbutdoesnotaddresshowtopreventreoccurrenceoftheOOSresult第七十三頁，共七十六頁。FDA483舉例(jǔlì)Stabilityfailureswereattributedtoinexperiencedanalystswhenexpertanalystsrepeatedtheresultsandobtainedpassingresults.Thebatchwasreleasedonretestdatawithoutjustificationforignoringtheorig