選修1——生物技術實踐

專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術1選修1——生物技術實踐專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術1課題1果酒和果醋制作

復習目標：

說明果酒和果醋制作的原理設計制作果酒和果醋的裝置完成果酒和果醋的制作2課題1果酒和果醋制作復習目標：2精品資料3精品資料3你怎么稱呼老師？如果老師最后沒有總結一節(jié)課的重點的難點，你是否會認為老師的教學方法需要改進？你所經(jīng)歷的課堂，是講座式還是討論式？教師的教鞭“不怕太陽曬，也不怕那風雨狂，只怕先生罵我笨，沒有學問無顏見爹娘……”“太陽當空照，花兒對我笑，小鳥說早早早……”44一、基礎知識（一）、果酒制作1、發(fā)酵菌種：

（1）分類地位：單細胞

生物（真菌）（2）代謝類型：

.

（3）發(fā)酵條件：

①溫度：是酵母菌

和

的重要條件。酵母菌生長繁殖的最適溫度為

左右，酒精發(fā)酵時將溫度嚴格控制在

。②氧氣：前期需O2，后期

。（理由是

）③PH：呈

。（5.0～6.0）真核異養(yǎng)兼性厭氧型生長發(fā)酵20℃18℃～25℃不需O2酸性先有氧呼吸大量繁殖，后無氧條件酒精發(fā)酵5一、基礎知識（一）、果酒制作真核異養(yǎng)兼性厭氧型生長發(fā)酵在

、

的發(fā)酵液中，酵母菌能大量生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應這一環(huán)境而受到抑制。故在利用酵母菌自制葡萄酒的過程中，不需要進行滅菌。2、制作原理：（用反應式表示）（1）

；（2）

.缺氧呈酸性C6H12O6

＋6O26CO2

＋6H2OC6H12O62C2H5OH＋2CO2

6在、的發(fā)酵液中，酵母菌能大量例：有釀制葡萄酒的兩個簡易裝置，請分析回答（1）果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌在有氧無氧條件下都能生存，所以，它屬于________微生物。（2）在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，酵母菌的來源是

。（3）制作果酒，需將溫度嚴格控制在_____℃。制作果酒后制果醋，應將溫度控制在_______。（4）葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約1/3的空間，這是因為_________。既為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出兼性厭氧型附著在葡萄皮上的野生型酵母菌

18－2530—35℃7例：有釀制葡萄酒的兩個簡易裝置，請分析回答（1）果酒的制作離（5）甲裝置中，A液體是_____，NaHCO3溶液的作用是

；葡萄汁若用乙裝置，在發(fā)酵過程中，必須進行的操作是

。與乙裝置相比，甲裝置的優(yōu)點是

。（6）果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用

來檢驗。在酸性條件下，該試劑與酒精反應呈現(xiàn)

。在果酒釀造過程中，如果果汁滅菌不嚴格，含有醋酸桿菌，在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸桿菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸?

?；揖G色不能吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2每隔12小時左右（一定的時間）將瓶蓋擰松一次既能及時吸收（發(fā)酵產(chǎn)生的）CO2，又能減少被雜菌污染的機會重鉻酸鉀8（5）甲裝置中，A液體是_____，NaHCO3溶液的作用是（二）、果醋制作1、菌種：

（1）分類地位：單細胞

生物（2）代謝類型：

.

（3）發(fā)酵條件：①溫度：醋酸菌的最適生長溫度為

，醋酸發(fā)酵時將溫度嚴格控制在此范圍內(nèi)。②氧氣：醋酸菌是好氧細菌，要供應充足，要

不斷通入氧氣。③PH：呈

。原核異養(yǎng)需氧型30℃～35℃酸性9（二）、果醋制作1、菌種：原核異養(yǎng)需氧型302、原理：（用反應式表示）（1）氧氣、糖源都

：醋酸菌將葡萄汁中的

分解成

。（糖制醋）（2）氧氣充足、糖源不足：醋酸菌將

→乙醛→

。（酒變醋）果酒制作果醋的反應式為:

。充足糖醋酸乙醇醋酸C2H5OH＋O2

CH3COOH＋H2O102、原理：（用反應式表示）充足糖醋酸乙醇醋酸C2H5OH＋（三）、菌種來源

1、酵母菌菌種的來源葡萄酒自然發(fā)酵的酵母菌主要是附著在

的酵母菌，放久的葡萄有酒味就是這個道理；為提高果酒品質(zhì)，可以直接在果汁中加入人工培養(yǎng)的酵母菌或適當接種食品發(fā)酵的酵母菌。葡萄皮上11（三）、菌種來源1、酵母菌菌種的來源葡萄皮上112、醋酸菌菌種的來源通入的空氣中會有一些醋酸菌，帶到發(fā)酵液中，大量繁殖，而其他的菌因不適應這種條件而不能繁殖；也可以直接在果酒中加入醋酸菌。（可以先買一瓶醋，打開蓋暴露于空氣中，一段時間后在醋的表面有一層薄膜（實際是醋酸菌），可以用這層薄膜進行接種，這樣可以明顯縮短制作醋的時間。）122、醋酸菌菌種的來源12二、實驗設計(一)制作流程挑選葡萄果酒果醋酵母菌醋酸菌

沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵13二、實驗設計挑選葡萄果酒果醋酵母菌醋酸菌(二)發(fā)酵裝置甲1、裝置甲(帶蓋的瓶子)制葡萄酒，在發(fā)酵制酒過程中，每隔12h左右將瓶蓋擰松一次，但又不打開，這樣做的目的是

。當發(fā)酵產(chǎn)生酒精后，再將瓶蓋打開，蓋上一層紗布，進行制果醋的發(fā)酵。(如圖)用帶一層紗布的瓶子制醋紗布擰松是為了及時放出CO2氣體，防止爆裂；不打開是為了防止雜菌污染14(二)發(fā)酵裝置甲1、裝置甲(帶蓋的瓶子)制出料口充氣口排氣口乙

2、裝置乙的充氣口在

時關閉，在

時連接充氣泵不斷向內(nèi)

；排氣口主要是排出

；排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連，這樣做的目的是

；出料口的作用是

。酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵充入空氣CO2防止雜菌污染對發(fā)酵情況進行及時的監(jiān)測15出料口充氣口排氣口乙2、裝置乙的充氣口在時關三、操作提示

（一）材料的

：選擇

的葡萄，榨汁前先將葡萄進行

，除去

。1、沖洗的主要目的是

；沖洗應注意不能

，以防止

。2、先沖洗后除去枝梗的理由是

。選擇和處理新鮮沖洗枝梗除去污物反復沖洗菌種流失避免除去枝梗時使葡萄破損，增加被雜菌污染的機會16三、操作提示（一）材料的：選擇（二）防止

.

1、

要清洗干凈，并晾干。2、

要清洗干凈，用體積分數(shù)為70%的

消毒。3、裝入葡萄汁后，

。發(fā)酵液被污染榨汁機發(fā)酵瓶酒精封閉充氣口17（二）防止.（三）控制好

.

1、葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約

的空間。

2、制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在

，時間控制在

左右，可通過出料口

。

3、制葡萄醋的過程中，將溫度嚴格控制在

，時間控制在

左右，并注意適時通過

。發(fā)酵的條件1/318℃～25℃10～12d對發(fā)酵情況進行及時監(jiān)測30℃～35℃7～8d充氣口充氣18（三）控制好.發(fā)四、結果分析、檢驗與評價

1、在果酒發(fā)酵中，生產(chǎn)出的葡萄酒呈深紅色的原因是

。2、果汁發(fā)酵產(chǎn)物的檢驗：（1）檢驗有無酒精產(chǎn)生：用

（在

條件下），反應呈現(xiàn)

。（2）檢驗有無醋酸產(chǎn)生：可通過觀察菌膜、嗅味和品嘗、

檢測等。紅葡萄皮的色素進入發(fā)酵液重鉻酸鉀酸性灰綠色PH試紙19四、結果分析、檢驗與評價1、在果酒發(fā)酵中，生產(chǎn)出的葡萄酒呈[試題精選]1.（2008年南通市四縣市高三聯(lián)合試卷）下列關于果醋制作的說法正確的是（）A．醋酸菌是好氧菌，在制作過程中要一直打開發(fā)酵瓶B．在制作葡萄醋的過程中，溫度應嚴格控制在18～25℃C．當糖源不足時，醋酸菌先將酒精轉(zhuǎn)變成乙醛，再將乙醛變?yōu)榇姿酓．醋酸菌在糖源和氧氣充足時，能將葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳C20[試題精選]1.（2008年南通市四縣市高三聯(lián)合試卷）下列關2．（2008屆五市三區(qū)調(diào)研卷）一位學生將葡萄糖和酵母菌溶液放入一個保溫瓶中，并用帶有兩個孔的塞子封口，酵母—葡萄糖溶液的溫度隨時間慢慢地升高，指示劑的顏色也開始改變（該指示劑遇酸變紅）。下列判斷正確的是（）（多選題）A．保溫瓶內(nèi)的溫度將一直保持穩(wěn)定不變B．保溫瓶中氧氣的含量對酵母菌呼吸作用的類型有重要的影響C．實驗可用來測定酵母菌呼吸作用釋放熱量的變化D．指示劑變色的情況與保溫瓶中空氣的量無關，與葡萄糖的量有關BC212．（2008屆五市三區(qū)調(diào)研卷）一位學生將葡萄糖和酵母菌溶液

3．回答下列有關果酒和果醋制作的小題：（1）果酒和果醋制作時，用到菌種的代謝類型分別是

、

。（2）在果酒制作中，生產(chǎn)出的葡萄酒呈深紅色，這種有色物質(zhì)來源于

。在利用酵母菌自制葡萄酒的過程中，不需要進行滅菌，因為發(fā)酵液中的

能抑制絕大多數(shù)其他微生物的繁殖。異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型紅葡萄皮缺氧、酸性條件223．回答下列有關果酒和果醋制作的小題：異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需（3）可通過

證明醋酸的產(chǎn)生。為進一步確定酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物，可以再用

檢測發(fā)酵瓶中有無酒精產(chǎn)生，正確的操作步驟是：先在試管中加入2mL

，然后加入3mol/L的

，振蕩混勻后滴加

，若實驗組反應呈現(xiàn)

，對照組試管中溶液無顏色變化，則可確定被鑒定物為酒精。重鉻酸鉀PH試紙發(fā)酵液H2SO4

重鉻酸鉀灰綠色23（3）可通過證明醋酸的產(chǎn)生。為進一步確定酵（4）在果酒制作中，若酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸消耗了等量的葡萄糖，則它們放出的CO2之和與它們消耗的O2之和比為（）

A．1：1B．3：0C．6：0D．4：3（5）若酒精發(fā)酵中，經(jīng)檢測發(fā)酵裝置活菌數(shù)量適宜但卻不產(chǎn)生酒精，可能的原因是

。D裝置密封性差，空氣進入裝置24（4）在果酒制作中，若酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸消耗了等量的4.（08南京零模）下圖是兩位同學制果酒和果醋的裝置。同學甲用A(帶蓋的瓶子)裝置制葡萄酒，在瓶中加入適量葡萄汁，溫度控制在18～25℃，每隔12h左右將瓶蓋擰松一次(注意不是打開瓶蓋)。當發(fā)酵產(chǎn)生酒精后，再將瓶蓋打開，蓋上一層紗布，溫度控制在30～35℃，進行果醋發(fā)酵。同學乙用B裝置，溫度控制與甲相同，不同的是除制果酒時充氣口用夾子夾緊外,排氣的橡膠管也用夾子夾住，并且每隔12h左右松一松夾子

放出多余的氣體。制果醋時打開夾子適時向充氣口充氣。經(jīng)過20天左右；兩位同學各自完成發(fā)酵制作據(jù)此回答有關問題：254.（08南京零模）下圖是兩位同學制果酒和果醋的裝置。同學甲

(1)酵母菌與醋酸桿菌在結構上的最大區(qū)別是后者

。從制酒和制醋兩階段對裝置的處理方式判斷，酵母菌和醋酸桿菌的細胞呼吸類型依次是

、

。(2)同學甲在制酒階段，每隔12h左右就要將瓶蓋擰松一次；但又不打開，這樣做的目的是

。(3)B裝置中排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連，這樣做的目的是

。(4)制葡萄酒時要將溫度控制在18～25℃，而制葡萄醋時要將溫度控制在30—35℃,原因是

。無成形的細胞核兼性厭氧型需氧型（有氧呼吸型）擰松是為了及時放出CO2氣體,防止爆裂;不打開是為了防止雜菌污染防止雜菌污染18～25℃是酵母菌生長和發(fā)酵的適宜溫度,30—35℃是醋酸菌生長和發(fā)酵的適宜溫度26(1)酵母菌與醋酸桿菌在結構上的最大區(qū)別是后者無成形的5．某生物興趣小組利用下圖裝置制作果酒和果醋，請分析回答下列問題。（1）制葡萄酒時，要將溫度控制在

；制葡萄醋時，要將溫度控制在

。（2）制作

時，應將2開關打開，以便

。制作果酒時，為保證發(fā)酵罐中有較多的菌體，必須先

，當達到一定數(shù)量后，應控制的培養(yǎng)條件是

，此時發(fā)酵作用的反應式是

。隨著發(fā)酵程度的加深，液體密度會逐漸

。18℃～25℃30℃～35℃果醋充入空氣（無菌）封閉充氣口C6H12O62C2H5OH＋2CO2

降低充入空氣（無菌）275．某生物興趣小組利用下圖裝置制作果酒和果醋，請分析回答下列（3）發(fā)酵過程應及時排氣，這是因為

。（4）制作葡萄酒時，將時間控制在

d左右，可通過[]

對發(fā)酵情況進行

。制作葡萄醋時，將時間控制在

d左右，并注意適時通過[]

充氣。（5）當果酒制作好之后，如果利用此裝置繼續(xù)制作果醋，為保證效果，應向發(fā)酵液中

。（6）在釀酒和釀醋的過程中都要涉及到各種微生物，在上述兩過程中主要涉及到的生物在結構上本質(zhì)區(qū)別是

。10~123出料口及時的監(jiān)測7~82充氣口發(fā)酵過程中產(chǎn)生大量CO2，及時排氣是為了防止發(fā)酵瓶爆裂通入空氣（無菌）；加入醋酸菌前者有成形的細胞核，后者沒有28（3）發(fā)酵過程應及時排氣，這是因為10~123出料口及時課題2腐乳的制作復習目標：說明腐乳制作過程的科學原理設計并完成腐乳的制作分析影響腐乳品質(zhì)的條件29課題2腐乳的制作復習目標：29一、基礎知識1.發(fā)酵菌種(主要):

(還有

等)（1）分類地位：多細胞

生物(絲狀真菌)（2）代謝類型：

.

（3）發(fā)酵條件：

①溫度：溫度控制在

。②氧氣：

。③濕度：用保鮮膜控制濕度，并定期換氣。

④豆腐的品質(zhì)（含水量）：

。

毛霉真核異養(yǎng)需氧型15℃～18℃需要70%青霉、酵母、曲霉、30一、基礎知識1.發(fā)酵菌種(主要):(還有（4）分布:廣泛,常見于

、水果、

、谷物上（5）特點：生長迅速，具有發(fā)達的白色

，

如下圖。（實際上還有匍匐菌絲，可形成腐乳外面的“皮”）土壤蔬菜菌絲31（4）分布:廣泛,常見于、水果、、2、制作原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成

；脂肪酶可將脂肪水解為

。在多種微生物的協(xié)同作用下，普通的豆腐轉(zhuǎn)變成我們愛吃的腐乳。思考：腐乳味道鮮美，營養(yǎng)價值較高，原因主要有（1）

；（2）

。小分子的肽和氨基酸甘油和脂肪酸大分子分解成小分子，易吸收大分子分解成小分子，營養(yǎng)物質(zhì)種類增加322、制作原理：小分子的肽和氨基酸甘油和脂肪酸大分子分解成小分先創(chuàng)造條件讓毛霉生長再加鹽控制毛霉的生長

控制毛霉的生長，同時增加風味和口感前期發(fā)酵二、實驗設計后期發(fā)酵讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制33先創(chuàng)造條件讓毛霉生長再加鹽控制毛霉的生長控制毛霉的生長相關資料1．毛霉的生長：溫度控制在

，并保持濕度。約

后，開始生長，

后菌絲生長旺盛,

后布滿菌絲。豆腐塊上的毛霉來自

，現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格

的條件下，將

直接接種在豆腐上（可避免雜菌污染，保證質(zhì)量）。２．加鹽腌制：隨著層數(shù)的加高而

，接近瓶口的鹽要

。腌制約

天左右。加鹽的作用：①使豆腐塊析出水分變硬；②

；③調(diào)味15℃～18℃空氣中的毛霉孢子優(yōu)良毛霉菌種48h3d5d無菌增加鹽量鋪厚一些8抑制微生物生長，避免豆腐腐敗變質(zhì)34相關資料1．毛霉的生長：溫度控制在，并保3.配制鹵湯：鹵湯是由

及

配制而成。酒的含量一般控制在

左右。加酒可抑制

，同時能使腐乳具有獨特的香味調(diào)味。香辛料種類多可

，也具有防腐殺菌的作用。酒香辛料12%微生物的生長調(diào)節(jié)腐乳的風味353.配制鹵湯：酒香辛料12%微生物的生長調(diào)節(jié)腐乳的風味35三、操作提示（一）控制好

的用量

1.用鹽腌制時，注意控制鹽的用量。鹽的濃度過低，不足以

，可能導致

；鹽的濃度過高，會影響

。豆腐塊與鹽的比列為。

2.鹵湯中酒的含量應控制在

左右。酒精含量過高，腐乳成熟的時間

；酒精含量過高，不足以抑制

，可能導致豆腐

。材料抑制微生物的生長豆腐腐敗變質(zhì)腐乳的口味12%延長微生物的生長腐敗變質(zhì)5:136三、操作提示（一）控制好的用量材料抑制微生物的生（二）防止

.1.用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用

消毒。2.裝瓶時，操作要

。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口

。封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的

，防止瓶口被污染。雜菌污染沸水迅速小心密封火焰3、抑制微生物的生長應加

。鹽、酒、鹵湯37（二）防止.1.用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷四、泡菜制作1、乳酸菌：原核、分裂生殖、異養(yǎng)厭氧3、流程：菜葉、鹽水、裝壇、密閉2、原理：C6H12O6→2C3H6O3+2ATP4、測定亞硝酸鹽：NO2-+對氨基苯磺酸→玫瑰紅38四、泡菜制作1、乳酸菌：原核、分裂生殖、異養(yǎng)厭氧3、流程：菜專題1-3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量一、基礎知識1、乳酸菌①____細胞的______生物；②種類（常見）：________菌和______菌③增殖方式：______生殖；④分布：空氣、_____、植物體表、人或動物的______等。單原核乳酸鏈球乳酸桿分裂土壤腸道常用于生產(chǎn)酸奶39專題1-3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量一、基礎知識1、乳酸菌⑤代謝類型：____________

在_____條件下，能分解葡萄糖為_______，可用來生產(chǎn)泡菜和______。⑥反應式：_______________________________異養(yǎng)厭氧型無氧乳酸酸奶C6H12O6酶2C3H6O3（乳酸）+少量能量制作泡菜的原理：乳酸菌無氧呼吸將葡萄糖分解成乳酸40⑤代謝類型：____________異養(yǎng)厭氧型無氧乳酸2、亞硝酸鹽①理化特性：為___色粉末，___溶于水。白易在人體內(nèi)的代謝特點：正常情況下亞硝酸鹽可以_________；只有在特定條件下（適宜的_____、___和___________作用），才會轉(zhuǎn)變?yōu)橹掳┪铩猒______。隨尿排出

PH

溫度

一定亞硝胺

的微生物

1、材料準備(1)選擇泡菜壇：標準是

、

、

、

、

，否則容易引起蔬菜腐爛。(2)選擇原料：質(zhì)地鮮嫩、無蟲咬、無爛痕斑點。火候好無裂紋無砂眼壇沿深蓋子吻合好412、亞硝酸鹽①理化特性：為___色粉末，___溶于水。白易在2、制作過程(1)原料處理：將新鮮蔬菜預先清洗、晾曬，然后切成

。(2)配制鹽水：泡菜鹽水按清水和鹽為

質(zhì)量比配制,并將鹽水

備用。(3)裝壇：將預處理的新鮮蔬菜混勻后裝壇，裝至

時，放入

等佐料，并繼續(xù)裝至

滿，再徐徐倒入配制好的鹽水，使鹽水

。(4)封壇發(fā)酵：蓋上泡菜壇蓋子，在壇蓋邊沿的__中注滿

進行密封發(fā)酵。發(fā)酵時間受到

影響。條狀或片狀4∶1煮沸冷卻半壇蒜瓣、生姜、香辛料八成浸沒全部菜料水槽水溫度422、制作過程條狀或片狀4∶1煮沸冷卻半壇蒜瓣、生姜、在______條件下，亞硝酸鹽與_________發(fā)生_________后，與________________結合形成__________。將顯色反應后的樣品與已知濃度的______進行______，可大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測定亞硝酸鹽的步驟包括：①__________；②______________；③______________；④______。配制溶液時，需要加入鹽酸的是___________________________；需要避光保存的是___________________________________________；比色時需靜置15min的原因是________________。鹽酸酸化對氨基苯磺酸重氮化反應N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽玫瑰紅色染料標準液目測比較配制溶液配制標準顯色液制備比色樣品處理液對氨基苯磺酸溶液和提取劑對氨基苯磺酸溶液；N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽使反應充分進行43在______條件下，亞硝酸鹽與________三、檢測亞硝酸鹽的含量1、實驗原理在

條件下，亞硝酸鹽與

發(fā)生

后，與

結合形成

。將顯色反應后的樣品與已知濃度的

進行

，可大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。檢測亞硝酸鹽的方法是

。鹽酸酸化對氨基苯磺酸重氮化反應N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽玫瑰紅色染料標準液目測比較2、操作過程(1)配制溶液(2)配制標準顯色液(3)制備樣品處理液(4)比色比色法44三、檢測亞硝酸鹽的含量1、實驗原理鹽酸酸化對氨基苯磺酸重泡菜風味形成的關鍵是加入

。按照清水與鹽的質(zhì)量比是

。氫氧化鋁乳液的作用

。調(diào)味料4:1吸附樣品濾液中的雜質(zhì)腌制的條件控制腌制的時間、溫度和食鹽的用量腌制過程中亞硝酸鹽含量的變化是先增加后減少泡菜壇內(nèi)有一層白膜的原因產(chǎn)膜酵母的繁殖加鹽的作用：滅菌、滲出蔬菜中的水、調(diào)味45泡菜風味形成的關鍵是加入。按照清水與鹽的質(zhì)與傳統(tǒng)發(fā)酵有關的幾類微生物的比較酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學分類生活方式適宜溫度主要生殖方式出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖主要用途釀酒、發(fā)面釀醋制作腐乳制作酸奶、泡菜真核生物原核生物真核生物原核生物異養(yǎng)兼性厭氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)厭氧20℃左右30～35℃15～18℃室溫46與傳統(tǒng)發(fā)酵有關的幾類微生物的比較酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學果酒果醋腐乳泡菜微生物類型原理反應條件檢測方法酵母菌，真核，兼性厭氧醋酸菌，細菌，好氧菌毛霉，真菌，好氧乳酸菌，細菌，厭氧菌酵母菌的無氧呼吸產(chǎn)生酒精20℃左右，無氧酸性重鉻酸鉀與其反應呈灰綠色醋酸菌的有氧呼吸產(chǎn)生醋酸30~35℃，通入氧氣品嘗、pH試紙檢測等毛霉產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶等催化有機物分解15～18℃接種，酒精含量控制在12％左右乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸常溫，無氧條件pH檢測，亞硝酸鹽的檢測方法47果酒果醋腐乳泡菜微生物類型原理反應條件檢測方法酵母菌，真核，4848培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為

和

在液體培養(yǎng)基中加入

（是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的

。液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基。凝固劑瓊脂菌落按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為

和

.選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基的化學成分包括

、

、

、氮源。水無機鹽碳源49培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培2、成分：水、無機鹽、碳源、氮源、例如：培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加

；培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至

；培養(yǎng)細菌時需要將pH調(diào)至

；培養(yǎng)厭氧微生物時需要提供

的條件。還需要滿足微生物生長對___、____的要求PH氧氣維生素酸性中性或微堿性無氧特殊營養(yǎng)物質(zhì)502、成分：水、無機鹽、碳源、氮源、例如：還需要滿足微生物生長五.以下選擇培養(yǎng)基可以分離哪些微生物？加入青霉素的培養(yǎng)基

殺死細菌、放線菌，分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基

殺死多種微生物，分離出金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基

分離出自生固氮菌（非固氮菌因缺少氮源被淘汰）不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基

分離出自養(yǎng)型微生物（異養(yǎng)微生物因缺少有機物被淘汰）加入抗生素的培養(yǎng)基利用抗生素抗性基因作標記基因，選擇分離出導入目的基因的工程菌51五.以下選擇培養(yǎng)基可以分離哪些微生物？加入青霉素的培養(yǎng)基2、消毒：指使用較為溫和的

僅殺死物體

或

的部分對人體有害的微生物（不包括

）。常用的方法

、

、

。物理或化學方法表面內(nèi)部指使用______的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括

。常用的方法有_______、________、__________煮沸消毒法巴氏消毒法化學藥劑消毒法強烈灼燒滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌3、滅菌：芽孢和孢子芽孢和孢子522、消毒：指使用較為溫和的

無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止________污染的方法。_________必須無菌、_________也必須要無菌、___________時不能帶入其他雜菌主要包括：雜菌2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別

消毒：使用較溫和理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部的一部分對人體有害的微生物的過程。不能殺死芽孢和孢子。滅菌：使用強烈的理化因素消滅物體內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。各種器具培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移菌種53無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止_______（2）灼燒滅菌——如接種環(huán)等：接種時，用于接種工具或其他金屬用具滅菌。直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒可以迅速徹底滅菌（3）干熱滅菌：用于耐高溫需干燥物品（玻璃器皿、金屬用具）（4）高壓蒸汽滅菌——培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)基等物品的滅菌54（2）灼燒滅菌——如接種環(huán)等：（3）干熱滅菌：（4）高壓蒸汽四、純化大腸桿菌純化大腸桿菌就是為了獲得大腸桿菌的_________，這需在培養(yǎng)時，盡量使菌落中的菌體來自于____________的分裂，即這個菌落的細菌群體由___________繁殖而來，這就需要接種時盡量接種_____的大腸桿菌。一個大腸桿菌一個大腸桿菌單個最常用的方法平板劃線法稀釋涂布平板法純種菌落55四、純化大腸桿菌純化大腸桿菌就是為了獲得大腸三.大腸桿菌的純化培養(yǎng)：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計算：2.稱量：3.溶化：牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加蓋4.滅菌：5.倒平板：分散成單個細胞,形成單個菌落加入瓊脂，不斷用玻棒攪拌的原因？防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂將配置好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，放入

，在壓力為

KPA，溫度為

度下滅菌。將培養(yǎng)皿放入

內(nèi)滅菌。

高壓蒸汽滅菌鍋100干熱滅菌箱121待培養(yǎng)基冷卻至________時在_________附近操作進行：50℃左右酒精燈火焰56三.大腸桿菌的純化培養(yǎng)：㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計算①在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出______(如圖1)。④待平板________后，將平板_______放置(如圖4)。棉塞火焰進行滅菌，防止一條縫隙皿蓋冷卻凝固倒過來瓶口微生物污染培養(yǎng)基②右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過_____，目的是____________________________________(如圖2)。③左手將培養(yǎng)皿打開_________，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上_____(如圖3)。圖1圖2圖3圖457①在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出______(如圖1)。④待3.思考討論答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以防止培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。倒過來1.平板冷凝后，要將平板

放置？583.思考討論答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基2.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；

每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。

劃線結束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。3.思考討論592.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃3.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。4.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。3.思考討論603.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？3.思考為了保持菌種的純凈，需對菌種進行保藏。對于頻繁使用的菌種，我們可以采用________法，將菌種接種到________培養(yǎng)基上，菌落長成后置于____冰箱保存，將菌種放在低溫環(huán)境中保藏的目的是_______________________，但時間長了菌種容易被_____________，因此每_____個月后需重新接種。對于需要長期保存的菌種，可以采用_________法，在3ml的甘油瓶中，裝入1ml甘油后____，將1ml菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶，充分混合，放在_____的冷凍箱保存。3．菌種的保存臨時保藏甘油管藏降低微生物的新陳代謝速率3～6固體斜面4℃污染或產(chǎn)生變異滅菌-200C61為了保持菌種的純凈，需對菌種進行保藏。3．菌種的(6)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。滅菌62(6)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及滅菌62第6課時土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當土壤中的細菌將尿素分解成

之后，才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為他們能合成

。氨脲酶63第6課時土壤中分解尿素的尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)一、研究思路(1)思路：提供有利于

生長的條件(包括

、

、

等)，同時

或

其他微生物生長。(2)實例：PCR技術利用的耐高溫的

是從生活在熱泉中的

細菌中提取的,之所以能從熱泉中篩選出該菌是因為

。(3)選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許

種類的微生物生長，同時

或

其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。1、篩選菌株目的菌株pH抑制阻止DNA聚合酶Taq熱泉的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物特定抑制阻止營養(yǎng)溫度64一、研究思路(1)思路：提供有利于2．統(tǒng)計菌落數(shù)目稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(shù)（最常用）（1）稀釋涂布平板法

①統(tǒng)計菌落數(shù)目時，當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的

。通過統(tǒng)計平板上的

，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在

平板進行計數(shù)。一個活菌菌落數(shù)30～300652．統(tǒng)計菌落數(shù)目稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(shù)（最常用）（微生物要利用尿素需要分泌

，不能分泌脲酶的微生物不能利用尿素。，其選擇機制是

。加入青霉素___________加入高濃度食鹽_____________;不加氮源________;不加含碳有機物___________。統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法有___________和___________；一般選擇菌落數(shù)在_______平板進行計數(shù)；成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關鍵是恰當?shù)腳_____；統(tǒng)計的菌落數(shù)比活菌的實際數(shù)目

是因為______________________________________酵母菌、霉菌等金黃色葡萄球菌固氮菌自養(yǎng)型微生物稀釋涂布平板法直接計數(shù)顯微鏡30～300稀釋度當兩個或多個細胞在一起時，觀察到的只是一個菌落只有能夠以分泌脲酶從而以尿素作為氮源的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長低脲酶66微生物要利用尿素需要分泌，不能分泌脲酶的微②從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的活菌數(shù)的計算方法是

。(平均菌落數(shù)÷涂布的稀釋液體積)×稀釋倍數(shù)③利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關鍵是恰當?shù)?/p>

。在實際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在

之間、適于計數(shù)的平板。測定土壤中細菌數(shù)量一般選用

。測定放線菌的數(shù)量，一般選用

。

測定真菌的數(shù)量，一般選用

。一般來說在一定的培養(yǎng)條件下同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。

。稀釋度30~300104105106103104105102103104形狀、大小、隆起程度、顏色67②從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的活菌數(shù)的計算方法是3．菌種的鑒定挑選選擇培養(yǎng)基中不同形態(tài)的菌落接入含

培養(yǎng)基的斜面中，由于細菌合成的

酶分解尿素產(chǎn)生了

，使培養(yǎng)基的堿性增強，pH上升，使指示劑變色，菌落周圍變

。酚紅脲氨紅683．菌種的鑒定挑選選擇培養(yǎng)基中不同形態(tài)的菌落接八.微生物數(shù)量測定測定土壤中的細菌數(shù)，一般選用104、105、106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)。

實驗時，每一濃度至少涂布3個平板，以增強實驗的說服力和準確性。

當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品大約含有多少個活菌。69八.微生物數(shù)量測定69課題三分解纖維素的微生物的分離1）

是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素。（2）纖維素酶是一種

酶，一般認為它至少包括三種組分，即

，前兩種酶使纖維素分解成

，第三種酶將纖維二糖分解成

。纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)。棉花復合C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖70課題三分解纖維素的微生物的分離1）是自然界中纖纖維素分解菌的篩選（1）篩選方法：

法。能夠通過顏色反應直接對微生物進行篩選。（2）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成

，但并不和水解后的

和

發(fā)生這種反應。當我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅－纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以

為中心的

。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。剛果紅染色紅色復合物纖維二糖葡萄糖纖維素分解菌透明圈71纖維素分解菌的篩選剛果紅染色紅色復合物纖維二糖葡萄糖纖維素分（1）土壤采集選擇

的環(huán)境。（2）剛果紅染色法分離纖維素分解菌的步驟倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板（3）剛果紅染色法種類一種是

進行顏色反應，另一種是在

。課題延伸對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選后，只是分離純化的第一步，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行

的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有

和

兩種。纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的

進行定量的測定。富含纖維素先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅倒平板時就加入剛果紅發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖72（1）土壤采集選擇提示：可將菌液接種在含牛肉膏蛋白胨的基礎培養(yǎng)基與之對照,或者將纖維素改為葡萄糖。你能否設計一個對照實驗，說明選擇培養(yǎng)基的作用你能否設計一個對照實驗，說明培養(yǎng)基是否被污染73提示：可將菌液接種在含牛肉膏蛋白胨的基礎培養(yǎng)基與之對照,或者細胞分化：在生物個體發(fā)育過程中，細胞在

上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。，在培養(yǎng)了一段時間以后，會通過

，形成愈傷組織，愈傷組織的細胞

，是一種高度

的呈無定形狀態(tài)的

細胞。由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細胞的

，或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng)，又可以重新分化成

等器官，這個過程叫做

。再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植物體。形態(tài)、結構和生理功能離體的植物組織或細胞細胞分裂排列疏松而無規(guī)則液泡化薄壁脫分化再分化根芽74細胞分化：在生物個體發(fā)育過程中，細胞形態(tài)、結構和生理功能離體材料：不同的

，培養(yǎng)的難易程度差別很大。植物材料的選擇直接關系到試驗的成敗。對于同一植株材料，材料

和

的長短等都會影響實驗結果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇

作材料。一般來說，容易進行

的植物容易進行組織培養(yǎng)。選取生長旺盛嫩枝進行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導脫分化和再分化。植物組織的年齡保存時間未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝無性繁殖植物組織培養(yǎng)的必要條件：

、

、和

。細胞離體一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素其他外界條件75材料：不同的，培養(yǎng)的難易程度差別很大常用的培養(yǎng)基是

培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是

，微量元素是

，有機物有

等。激素大量元素和微量元素提供

，有機物提供

，蔗糖提供

，同時能夠

。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量

營養(yǎng)，還要加入

。MSN、P、S、K、Ca、MgFe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖生活所必須的無機鹽滿足離體的植物細胞在正常代謝途徑受一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)要求碳源維持細胞的滲透壓無機激素76常用的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基，其中含有的大量元素使用順序?qū)嶒灲Y果先生長素，后細胞分裂素先細胞分裂素，后生長素同時使用激素：植物激素中

和

是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。在生長素存在的情況下，細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強趨勢。在培養(yǎng)基中需要添加生長素和細胞分裂素等植物激素，其濃度、等

都影響結果。有利于分裂但不分化細胞既分裂也分化分化頻率提高生長素細胞分裂素使用的先后順序、用量的比例77使用順序?qū)嶒灲Y果先生長素，先細胞分裂素，同時使用激素：植物激生長素／細胞分裂素比值與結果比值高時比值低時比值適中促根分化，抑芽形成促芽分化，抑根形成促進愈傷組織生長（4）環(huán)境條件：

pH、溫度、光照pH控制在

左右，溫度控制在

。C,每日用

。5.818－22日光燈照射12h78生長素／細胞分裂素比值與結果比值高時比值低時比值適中促根分植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細胞植物體脫分化細胞分裂素≈生長素愈傷組織芽根細胞分裂素>生長素細胞分裂素<生長素再分化79植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細胞植物體脫分化細胞分裂素≈生長制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培實驗操作80制備MS固體培養(yǎng)基實驗操作80二、實驗操作（一）制備MS固體培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基包括20多種營養(yǎng)成分，實驗室一般使用4。C保存配制好的培養(yǎng)基母液來制備1、配置各種母液①無機物中大量元素濃縮

倍，微量元素濃縮

倍，常溫保存②激素類、維生素類以及用量較小的有機物一般可按1mg/ml的質(zhì)量濃度

配制成母液③用母液配制培養(yǎng)基時，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量10100單獨81二、實驗操作（一）制備MS固體培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基包括20多種營由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此

.3、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行

.不必添加植物激素高壓蒸汽滅菌82由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，3、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同外植體的消毒外植體：

片段。選取菊花莖段時，要取生長旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右。用

吸干外植體表面的水分，放入體積分數(shù)為

中搖動2~3次，持續(xù)

，立即將外植體取出，在

中清洗。取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分，放入質(zhì)量分數(shù)為

溶液中

。取出后，在無菌水中至少清洗3次，目的是

。注意：對外植體進行表面消毒時，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力。離體的組織和細胞無菌吸水紙70%的酒精6~7s無菌水0.1%的氯化汞1~2min漂洗消毒液83外植體的消毒外植體：（三）接種接種前用

將工作臺擦拭一遍。1、接種室消毒2、無菌操作要求操作要在

完成，每次使用器械后，都需要用火焰

，接種后立即蓋好瓶蓋。3、材料的切取和接種70％的酒精酒精燈火焰旁灼燒滅菌插入莖段時應注意方向，

。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分不要倒插（四）培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在

中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間應定期消毒。培養(yǎng)溫度

，每日用

。無菌箱18~22℃日光燈光照12h84（三）接種接種前用將工作臺擦拭一遍。1JLSSYBYH月季的花藥培養(yǎng)zxxkw85JLSSY月季的花藥培養(yǎng)zxxkw85

花粉是由

（即小孢子母細胞）經(jīng)過

而形成的，因此，花粉是

細胞。花粉的發(fā)育要經(jīng)歷：

等階段。花粉母細胞減數(shù)分裂單倍體的生殖四分體時期、單核期、雙核期86花粉是由小孢子母細胞（

）時期單核（

）期雙核期（）細胞核（

）細胞核（

）細胞（）細胞（

）個精子（

）分裂（

）分裂單核（

）期（）分裂減數(shù)小孢子四分體居中靠邊有絲生殖生殖花粉管營養(yǎng)有絲22NNNNNNNNN87小孢子母細胞（）時期單核（）期雙產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株）一般有兩種途徑，一種是花粉通過

階段發(fā)育為植物，另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成

，再將其誘導分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕對的界限，主要取決于

。胚狀體愈傷組織培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化叢芽再分化叢芽誘導生根移栽88產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株影響花藥培養(yǎng)的因素誘導花粉能否成功及誘導成功率的高低，受多種因素影響，其中

與

是主要的影響因素·親本的生理狀況：花粉早期是的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株，選擇

?！ず线m的花粉發(fā)育時期：一般來說，在

，細胞核由中央移向細胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高·花蕾：選擇

的花蕾·此外

、

以及

等對誘導成功率都有一定影響·材料的選?。哼x擇花藥時，一般要通過

來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是

。但是，某些植物的花粉細胞核不易著色，需采用

，這種方法能將花粉細胞核染成

。材料的選擇培養(yǎng)基的組成月季的初花期單核期完全未開放親本植株的生長條件材料的低溫預處理接種密度鏡檢醋酸洋紅法焙花青-鉻礬法藍黑色89影響花藥培養(yǎng)的因素誘導花粉能否成功及誘導成功率的高低，受多種（二）材料的消毒5、

沖洗3～5次

花藥的外面有花萼、花瓣保護，通常處于無菌狀態(tài)1、花蕾用

浸泡

秒2、

清洗3、

吸干花蕾表面的水分4、放入

溶液中

分鐘（質(zhì)量分數(shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液）體積分數(shù)為70%的酒精無菌水質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞無菌水無菌吸水紙302～490（二）材料的消毒5、沖洗3～5次1、花·接種和培養(yǎng)：滅菌后的花蕾，要在無菌條件下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時，要盡量

否則接種后容易從受傷部位長生愈傷組織），同時還要徹底

，因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成，通常每瓶接種花藥

個,培養(yǎng)溫度控制在

左右

光照.

才需要光照.一般經(jīng)過20～30天培養(yǎng)后,會發(fā)現(xiàn)花藥開裂,長出

。將愈傷組織及時轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進一步分化出再生植株。如果花藥開裂釋放出胚狀體，則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株，必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開，分別移植到新的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開。還需要對培養(yǎng)出來的植株做進一步的鑒定和篩選。不損傷花藥去除花絲7～1025℃,不需要幼小植株形成后愈傷組織或形成胚狀體91·接種和培養(yǎng)：滅菌后的花蕾，要在無菌條件下除去萼片和花瓣，并學習·探究區(qū)第10課時半乳糖醛酸水出汁率渾濁本課時欄目開關知識·儲備區(qū)學習·探究區(qū)自我·檢測區(qū)植物細胞壁以及胞間層

92學習·探究區(qū)第10課時半乳糖醛酸水出汁率渾濁本課學習·探究區(qū)第10課時多聚半乳糖醛酸果膠酯半乳糖醛酸出汁率澄清本課時欄目開關知識·儲備區(qū)學習·探究區(qū)自我·檢測區(qū)93學習·探究區(qū)第10課時多聚半乳糖醛酸果膠酯半乳糖醛酸學習·探究區(qū)第10課時催化一定化學反應反應速度單位時間單位體積減少量增加量提高最適下降升高下降變性本課時欄目開關知識·儲備區(qū)學習·探究區(qū)自我·檢測區(qū)94學習·探究區(qū)第10課時催化一定化學反應反應速度單位時探討加酶洗衣粉的洗劑效果(1)加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：有

，其中，應用最廣泛、效果最明顯的是酶和酶。(2)加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量，使洗滌劑朝

方向發(fā)展，

。蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶堿性蛋白堿性脂肪低磷無磷減少對環(huán)境的污染95探討加酶洗衣粉的洗劑效果蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶堿性在應用酶的過程中，發(fā)現(xiàn)一些實際問題：酶通常對

、、、和

等條件非常敏感，容易

；溶液中的酶很難回收，不能被

，提高了生產(chǎn)成本；反應后酶會混在產(chǎn)物中，

。于是有人設想，將酶固定在不溶于水的載體上，使酶既能與

接觸，又能與

分離；同時，固定在載體上的酶還可以

。在技術的基礎上，又發(fā)展出了

技術。強酸強堿高溫有機溶劑失活再次利用可能影響產(chǎn)品質(zhì)量反應物產(chǎn)物被反復利用細胞固定化技術96在應用酶的過程中，發(fā)現(xiàn)一些實際問題：酶通常對(1)高果糖漿的生產(chǎn)需要使用

酶，它將葡萄糖轉(zhuǎn)化為

。這種酶

，可以

。但是，酶溶解于葡萄糖溶液中，無法回收，造成浪費。使用固定化酶技術（如圖），將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上，再將這些酶顆粒裝到一個

內(nèi)，柱子底端裝上分布著

。

無法通過篩板的小孔，而

卻可以自由出入。反應柱能連續(xù)使用半年，大大降低了生產(chǎn)成本，提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。反應柱許多小孔的篩板酶顆粒反應溶液葡萄糖異構果糖穩(wěn)定性好持續(xù)發(fā)揮作用97(1)高果糖漿的生產(chǎn)需要使用酶，它2)固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術，包括

法、

法和

法。酶更適合采用

固定，而細胞多采用

固定化。原因是

，而