第二節(jié)

血液凝固分析儀第二節(jié)

血液凝固分析儀學(xué)習(xí)目標

掌握：血凝儀的檢測原理

熟悉：半自動、全自動血凝儀的特點和基本

結(jié)構(gòu)、各種檢測方法的優(yōu)缺點

了解：血凝儀的分類、臨床應(yīng)用、儀器的維護

學(xué)習(xí)目標掌握：血凝儀的檢測原理內(nèi)容提要一、血凝儀的分型二、血凝儀的檢測原理三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)四、血凝儀的臨床應(yīng)用五、血凝儀的維護六、血凝儀的注意事項

內(nèi)容提要一、血凝儀的分型

血凝儀是采用一定分析技術(shù)，對血栓與出血有關(guān)成分自動檢測的臨床常規(guī)檢驗儀器。在血栓/出血實驗室中最基本的設(shè)備就是血液凝固分析儀（簡稱血凝儀）。血凝儀是采用一定分析技術(shù)，對血栓與出血有關(guān)成分自動一、血凝儀的分型按自動化程度分類：1.半自動血凝儀：需手工加樣加試劑、檢測方法少、速度慢，但操作簡單、價格便宜；檢測一些常規(guī)檢測項目。2.全自動血凝儀：自動化程度高、檢測方法多、通道多、速度快、精度好，但價格昂貴；檢測常規(guī)凝血項目、監(jiān)測抗凝及溶栓的治療。3.全自動血凝工作站：自動識別、接收樣本，自動離心加樣、分析等一、血凝儀的分型按自動化程度分類：二、血凝儀的檢測原理主要檢測方法：凝固法底物顯色法免疫學(xué)法干化學(xué)法

二、血凝儀的檢測原理主要檢測方法：血液凝固分析儀課件1．凝固法原理通過檢測血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列物理量（光、電、超聲、機械運動等）的變化，再由計算機分析所得最終結(jié)果，也稱生物物理法。按具體測量原理分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法和磁珠法四種。血栓/止血實驗中最常用、最基本的方法二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理（1）電流法：利用纖維蛋白原無導(dǎo)電性而纖維蛋白具有導(dǎo)電性的特點，將待測樣品作為電路的一部分，根據(jù)凝血過程中電路里電流的變化來判斷纖維蛋白的形成。

缺點：不可靠、單一二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理（2）超聲波法

依凝血過程使血漿的超聲波衰減程度判斷終點。只能進行半定量，項目少，目前已經(jīng)較少使用。二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理（3）光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化導(dǎo)致光強度變化來測定相關(guān)因子。

當(dāng)向樣品中加入凝血激活劑后，隨著樣品中纖維蛋白凝塊的形成過程，樣品的光強度逐步增加，儀器把這種光學(xué)變化描繪成凝固曲線，當(dāng)樣品完全凝固以后，光的強度不再變化。（3）光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化導(dǎo)致光纖維蛋白的形成與吸光度纖維蛋白的形成與吸光度光學(xué)法（比濁法）透射比濁法

光源、樣本、接受器成直線，接收器接收到的是很強的透射光和較弱的散射光。

當(dāng)測定物中有溶血、黃疸、脂血等干擾成分或低纖維蛋白原血癥的特殊標本時，由于樣本本身濁度的影響，測量精度變差。光學(xué)法（比濁法）透射比濁法光學(xué)法（比濁法）散射比濁法光源、樣本、接收器成直角，散射比濁法，接收器接收到的完全是散射光，不受本底濁度的影響。散射比濁法優(yōu)于透射比濁法光學(xué)法（比濁法）散射比濁法1．凝固法原理（4）磁珠法

根據(jù)磁珠運動的幅度隨血漿凝固過程中黏度的增加而變化來測量凝血功能。分為光電探測法和電磁珠探測法。二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理光電探測法測量原理測試時，永久磁鐵在測試杯的下面旋轉(zhuǎn)，帶動測試杯中磁珠沿杯壁旋轉(zhuǎn)，測試杯側(cè)壁外安有紅外反射式光電探測器元件來檢測磁珠運動變化。依運動力學(xué)原理，磁珠的旋轉(zhuǎn)隨血漿黏度的增大逐漸向測試杯中心靠攏，根據(jù)磁珠運動規(guī)律來判定血漿凝固終點。（4）磁珠法光電探測法測量原理（4）磁珠法電磁探測法（雙磁路磁珠法）：

測試杯的兩側(cè)各有一組驅(qū)動線圈，其中一對磁路產(chǎn)生恒定的交變電磁場，使杯內(nèi)特制的去磁小鋼珠保持等幅振蕩運動；凝血激活劑加入后，隨著纖維蛋白的增多，血漿黏稠度增加，小鋼珠運動振幅逐漸減弱，將運動幅度衰減到50時確定為凝固終點。（4）磁珠法電磁探測法（雙磁路磁珠法）：（4）磁珠法雙磁路磁珠法原理雙磁路磁珠法原理雙磁路磁珠法原理用電磁檢測磁珠擺動衰減幅度雙磁路磁珠法原理用電磁檢測磁珠擺動衰減幅度磁珠法與光學(xué)比濁法原理主要區(qū)別前者是檢測血漿凝固過程中磁電信號變化后者是檢測該過程中光信號的變化磁珠法與光學(xué)比濁法原理主要區(qū)別光學(xué)法與磁珠法原理主要區(qū)別光學(xué)法原理：是用光探測凝固過程中血漿濁度的（吸光度）變化來判斷終點；光電磁珠法原理：是用光探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點；雙磁路磁珠法原理：是用電磁探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點。三、血凝儀的檢測原理光學(xué)法與磁珠法原理主要區(qū)別三、血凝儀的檢測原理2.底物顯色法

通過測定產(chǎn)色底物的吸光度變化來計算所測物質(zhì)的含量和活性，也稱生物化學(xué)法，實質(zhì)為光電比色原理。

最常用的多肽底物是對硝基苯胺，呈黃色，波長405nm。

二、血凝儀的檢測原理2.底物顯色法二、血凝儀的檢測原理3.免疫學(xué)方法

以純化的被檢物質(zhì)為抗原，制備相應(yīng)的抗體，然后利用抗原抗體反應(yīng)對被檢物進行定性或定量測定。血凝儀使用免疫比濁法。二、血凝儀的檢測原理3.免疫學(xué)方法二、血凝儀的檢測原理4.干化學(xué)法

將惰性順磁鐵氧化顆粒結(jié)合在可產(chǎn)生凝固反應(yīng)或纖溶反應(yīng)的干試劑中，在固定垂直磁場的作用下使顆粒來回移動。二、血凝儀的檢測原理4.干化學(xué)法二、血凝儀的檢測原理

血凝儀的檢測原理（二）底物顯色法生物化學(xué)法以底物釋放產(chǎn)色基團量的變化測定有關(guān)因子（一）凝固法生物物理法電流法：纖維蛋白原——纖維蛋白——導(dǎo)電性判定終點光學(xué)法散射比濁法—凝固過程中散射光變化透射比濁法—凝固過程中吸光度變化濁度變化光度變化雙磁路磁珠法—用電磁探測鋼珠振幅衰減程度判斷終點光電磁珠法——用光電探測鋼珠振幅衰減程度判斷終點超聲波法——超聲波衰減程度判斷終點（三）免疫學(xué)法抗原抗體免疫比濁血凝儀的檢測原理（二）底物顯色法以底物釋放產(chǎn)色基團三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（一）半自動血凝儀的基本結(jié)構(gòu)主要由樣本預(yù)溫槽和試劑預(yù)溫槽、加樣器、檢測系統(tǒng)（光學(xué)、磁場）及微機組成。三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（一）半自動血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（二）全自動血凝儀基本結(jié)構(gòu)包括樣本傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣本及試劑分配系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、計算機、輸出設(shè)備及附件等。三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（二）全自動血凝儀基本結(jié)構(gòu)三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)四、血凝儀的性能評價技術(shù)性能評價：重復(fù)性測定、正確度、線性范圍、攜帶污染率、干擾因素等幾方面。四、血凝儀的性能評價技術(shù)性能評價：五、血凝儀的操作與維護試劑樣本育溫將處理好的試劑和樣本放入各自育溫位進菜單，選擇測試項目，將測試杯放入測試槽中參數(shù)設(shè)置依次加入樣本、試劑，即按計時鍵，自動檢測樣本測定以標準模式打印或傳送報告結(jié)果傳送關(guān)機清洗保養(yǎng)后關(guān)機開機打開儀器開關(guān)，完成初始化和自檢，恒溫至37℃開機前準備試劑和樣本處理，做好開機前檢查半自動血凝儀的操作（一）五、血凝儀的操作與維護試劑樣本育溫將處理好的試劑和樣本放入各1.半自動血凝儀的維護①保持測試槽、樣本槽、試劑槽清潔，嚴禁有異物進②避免陽光直曬和遠離強熱物體；③放置在平穩(wěn)的工作臺面上，不得搖晃與振動；④防止受潮和腐蝕；⑤遠離強電磁場干擾源，使用一次性測試杯及鋼珠；⑥使用穩(wěn)壓器電源；⑦儀器保持恒溫37℃±0.2℃。（二）血凝儀的維護1.半自動血凝儀的維護（二）血凝儀的維護2.全自動血凝儀的維護①定期清洗或更換空氣過濾器；②定期檢查及清潔反應(yīng)槽；③定期清洗洗針池及通針；④經(jīng)常檢查冷卻劑液面水平；⑤定期清潔機械運動導(dǎo)桿和轉(zhuǎn)動部分并加潤滑油；⑥及時保養(yǎng)定量裝置；⑦定期更換樣品及試劑針；⑧定期數(shù)據(jù)備份及恢復(fù)等2.全自動血凝儀的維護六、血凝儀常用檢測項目及應(yīng)用應(yīng)用1.凝血系統(tǒng)的檢測2.抗凝系統(tǒng)的檢測3.纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢測4.臨床用藥的監(jiān)測

六、血凝儀常用檢測項目及應(yīng)用應(yīng)用（1）凝血系統(tǒng)的檢測：凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、凝血酶時間（TT）、凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ。（2）抗凝系統(tǒng)檢測：AT-Ⅲ、蛋白C、蛋白S等。（3）纖維蛋白溶解系統(tǒng)的檢測：纖溶酶原（PLG）、纖維蛋白降解產(chǎn)物（FDP）、D-二聚體（D-Dimer）等。（4）臨床用藥的監(jiān)測：使用普通肝素（UFH）、低分子肝素（LMWH）及口服抗凝劑后。血液凝固分析儀課件任務(wù)小結(jié)

血凝儀根據(jù)自動化程度的高低，分為半自動和全自動儀器。前者需手工加樣，檢測速度較慢，原理較單一，檢測項目少，儀器配備的軟件功能也很有限。后者的特點是檢測速度快，測定項目多，檢測原理較復(fù)雜和儀器設(shè)計的智能化。使用全自動血凝儀時只要將分離出的血漿樣品放置在指定的位置，儀器便可完成加樣、預(yù)溫、檢測和報告打印等全過程。多數(shù)全自動血凝儀可任意選擇不同的項目組合進行檢測，樣品的檢測具有隨機性，儀器的數(shù)據(jù)處理和存儲功能也較強。任務(wù)小結(jié)血凝儀根據(jù)自動化程度的高低，分為半自任務(wù)小結(jié)

早期使用的血凝儀多采用凝固法（凝固法據(jù)檢測原理的不同又分為光學(xué)法、磁珠法和電流法）進行測定，儀器的檢測項目也比較有限，隨著免疫學(xué)方法（主要是免疫比濁法）和發(fā)色底物法的應(yīng)用，血凝儀的檢測項目大大增加，免疫比濁法主要用于FDP、D-二聚體和AT-Ⅲ的測定，發(fā)色底物法可用于AT-Ⅲ、蛋白C和纖溶酶原等項目的測定。凝固法、免疫比濁法和發(fā)色底物法的聯(lián)合應(yīng)用使血凝儀不僅可用于臨床的常規(guī)檢測，同時也為研究新的實驗指標在止血、血栓性疾病中的應(yīng)用提供了有利條件。任務(wù)小結(jié)早期使用的血凝儀多采用凝固法（凝固法據(jù)第二節(jié)

血液凝固分析儀第二節(jié)

血液凝固分析儀學(xué)習(xí)目標

掌握：血凝儀的檢測原理

熟悉：半自動、全自動血凝儀的特點和基本

結(jié)構(gòu)、各種檢測方法的優(yōu)缺點

了解：血凝儀的分類、臨床應(yīng)用、儀器的維護

學(xué)習(xí)目標掌握：血凝儀的檢測原理內(nèi)容提要一、血凝儀的分型二、血凝儀的檢測原理三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)四、血凝儀的臨床應(yīng)用五、血凝儀的維護六、血凝儀的注意事項

內(nèi)容提要一、血凝儀的分型

血凝儀是采用一定分析技術(shù)，對血栓與出血有關(guān)成分自動檢測的臨床常規(guī)檢驗儀器。在血栓/出血實驗室中最基本的設(shè)備就是血液凝固分析儀（簡稱血凝儀）。血凝儀是采用一定分析技術(shù)，對血栓與出血有關(guān)成分自動一、血凝儀的分型按自動化程度分類：1.半自動血凝儀：需手工加樣加試劑、檢測方法少、速度慢，但操作簡單、價格便宜；檢測一些常規(guī)檢測項目。2.全自動血凝儀：自動化程度高、檢測方法多、通道多、速度快、精度好，但價格昂貴；檢測常規(guī)凝血項目、監(jiān)測抗凝及溶栓的治療。3.全自動血凝工作站：自動識別、接收樣本，自動離心加樣、分析等一、血凝儀的分型按自動化程度分類：二、血凝儀的檢測原理主要檢測方法：凝固法底物顯色法免疫學(xué)法干化學(xué)法

二、血凝儀的檢測原理主要檢測方法：血液凝固分析儀課件1．凝固法原理通過檢測血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列物理量（光、電、超聲、機械運動等）的變化，再由計算機分析所得最終結(jié)果，也稱生物物理法。按具體測量原理分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法和磁珠法四種。血栓/止血實驗中最常用、最基本的方法二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理（1）電流法：利用纖維蛋白原無導(dǎo)電性而纖維蛋白具有導(dǎo)電性的特點，將待測樣品作為電路的一部分，根據(jù)凝血過程中電路里電流的變化來判斷纖維蛋白的形成。

缺點：不可靠、單一二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理（2）超聲波法

依凝血過程使血漿的超聲波衰減程度判斷終點。只能進行半定量，項目少，目前已經(jīng)較少使用。二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理（3）光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化導(dǎo)致光強度變化來測定相關(guān)因子。

當(dāng)向樣品中加入凝血激活劑后，隨著樣品中纖維蛋白凝塊的形成過程，樣品的光強度逐步增加，儀器把這種光學(xué)變化描繪成凝固曲線，當(dāng)樣品完全凝固以后，光的強度不再變化。（3）光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化導(dǎo)致光纖維蛋白的形成與吸光度纖維蛋白的形成與吸光度光學(xué)法（比濁法）透射比濁法

光源、樣本、接受器成直線，接收器接收到的是很強的透射光和較弱的散射光。

當(dāng)測定物中有溶血、黃疸、脂血等干擾成分或低纖維蛋白原血癥的特殊標本時，由于樣本本身濁度的影響，測量精度變差。光學(xué)法（比濁法）透射比濁法光學(xué)法（比濁法）散射比濁法光源、樣本、接收器成直角，散射比濁法，接收器接收到的完全是散射光，不受本底濁度的影響。散射比濁法優(yōu)于透射比濁法光學(xué)法（比濁法）散射比濁法1．凝固法原理（4）磁珠法

根據(jù)磁珠運動的幅度隨血漿凝固過程中黏度的增加而變化來測量凝血功能。分為光電探測法和電磁珠探測法。二、血凝儀的檢測原理1．凝固法原理二、血凝儀的檢測原理光電探測法測量原理測試時，永久磁鐵在測試杯的下面旋轉(zhuǎn)，帶動測試杯中磁珠沿杯壁旋轉(zhuǎn)，測試杯側(cè)壁外安有紅外反射式光電探測器元件來檢測磁珠運動變化。依運動力學(xué)原理，磁珠的旋轉(zhuǎn)隨血漿黏度的增大逐漸向測試杯中心靠攏，根據(jù)磁珠運動規(guī)律來判定血漿凝固終點。（4）磁珠法光電探測法測量原理（4）磁珠法電磁探測法（雙磁路磁珠法）：

測試杯的兩側(cè)各有一組驅(qū)動線圈，其中一對磁路產(chǎn)生恒定的交變電磁場，使杯內(nèi)特制的去磁小鋼珠保持等幅振蕩運動；凝血激活劑加入后，隨著纖維蛋白的增多，血漿黏稠度增加，小鋼珠運動振幅逐漸減弱，將運動幅度衰減到50時確定為凝固終點。（4）磁珠法電磁探測法（雙磁路磁珠法）：（4）磁珠法雙磁路磁珠法原理雙磁路磁珠法原理雙磁路磁珠法原理用電磁檢測磁珠擺動衰減幅度雙磁路磁珠法原理用電磁檢測磁珠擺動衰減幅度磁珠法與光學(xué)比濁法原理主要區(qū)別前者是檢測血漿凝固過程中磁電信號變化后者是檢測該過程中光信號的變化磁珠法與光學(xué)比濁法原理主要區(qū)別光學(xué)法與磁珠法原理主要區(qū)別光學(xué)法原理：是用光探測凝固過程中血漿濁度的（吸光度）變化來判斷終點；光電磁珠法原理：是用光探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點；雙磁路磁珠法原理：是用電磁探測鋼珠振幅衰減程度來判斷終點。三、血凝儀的檢測原理光學(xué)法與磁珠法原理主要區(qū)別三、血凝儀的檢測原理2.底物顯色法

通過測定產(chǎn)色底物的吸光度變化來計算所測物質(zhì)的含量和活性，也稱生物化學(xué)法，實質(zhì)為光電比色原理。

最常用的多肽底物是對硝基苯胺，呈黃色，波長405nm。

二、血凝儀的檢測原理2.底物顯色法二、血凝儀的檢測原理3.免疫學(xué)方法

以純化的被檢物質(zhì)為抗原，制備相應(yīng)的抗體，然后利用抗原抗體反應(yīng)對被檢物進行定性或定量測定。血凝儀使用免疫比濁法。二、血凝儀的檢測原理3.免疫學(xué)方法二、血凝儀的檢測原理4.干化學(xué)法

將惰性順磁鐵氧化顆粒結(jié)合在可產(chǎn)生凝固反應(yīng)或纖溶反應(yīng)的干試劑中，在固定垂直磁場的作用下使顆粒來回移動。二、血凝儀的檢測原理4.干化學(xué)法二、血凝儀的檢測原理

血凝儀的檢測原理（二）底物顯色法生物化學(xué)法以底物釋放產(chǎn)色基團量的變化測定有關(guān)因子（一）凝固法生物物理法電流法：纖維蛋白原——纖維蛋白——導(dǎo)電性判定終點光學(xué)法散射比濁法—凝固過程中散射光變化透射比濁法—凝固過程中吸光度變化濁度變化光度變化雙磁路磁珠法—用電磁探測鋼珠振幅衰減程度判斷終點光電磁珠法——用光電探測鋼珠振幅衰減程度判斷終點超聲波法——超聲波衰減程度判斷終點（三）免疫學(xué)法抗原抗體免疫比濁血凝儀的檢測原理（二）底物顯色法以底物釋放產(chǎn)色基團三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（一）半自動血凝儀的基本結(jié)構(gòu)主要由樣本預(yù)溫槽和試劑預(yù)溫槽、加樣器、檢測系統(tǒng)（光學(xué)、磁場）及微機組成。三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（一）半自動血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（二）全自動血凝儀基本結(jié)構(gòu)包括樣本傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣本及試劑分配系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、計算機、輸出設(shè)備及附件等。三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)（二）全自動血凝儀基本結(jié)構(gòu)三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)四、血凝儀的性能評價技術(shù)性能評價：重復(fù)性測定、正確度、線性范圍、攜帶污染率、干擾因素等幾方面。四、血凝儀的性能評價技術(shù)性能評價：五、血凝儀的操作與維護試劑樣本育溫將處理好的試劑和樣本放入各自育溫位進菜單，選擇測試項目，將測試杯放入測試槽中參數(shù)設(shè)置依次加入樣本、試劑，即按計時鍵，自動檢測樣本測定以標準模式打印或傳送報告結(jié)果傳送關(guān)機清洗保養(yǎng)后關(guān)機開機打開儀器開關(guān)，完成初始化和自檢，恒溫至37℃開機前準備試劑和樣本處理，做好開機前檢查半自動血凝儀的操作（一）五、血凝儀的操作與維護試劑樣本育溫將處理好的試劑和樣本放入各1.半自動血凝儀的維護①保持測試槽、樣本槽、試劑槽清潔，嚴禁有異物進②避免陽光直曬和遠離強熱物體；③放置在平穩(wěn)的工作臺面上，不得搖晃與振動；④防止受潮和腐蝕；⑤遠離強電磁場干擾源，使用一次性測試杯及鋼珠；⑥使用穩(wěn)壓器電源；⑦儀器保持恒溫37℃±0.2℃。（二）血凝儀的維護1.半自動血凝儀的維護（二）血凝儀的維護2.全自動血凝儀的維護①定期清洗或更換空氣過濾器；②定期檢查及清潔反應(yīng)槽；③定期清洗洗針池及通針；④經(jīng)常檢查冷卻劑液面水平；⑤定期清潔機械運動導(dǎo)桿和轉(zhuǎn)動部分并加潤滑油；⑥及時保養(yǎng)定量裝置；