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凝血系統(tǒng)的臨床應(yīng)用正常生理凝血與抗凝血的動(dòng)態(tài)平衡凝血因子是參與血液凝固過程的各種蛋白質(zhì)組分。它的生理作用是,在血管出血時(shí)被激活,和血小板粘連在一起并且補(bǔ)塞血管上的漏口。這個(gè)過程被稱為凝血。它們部分由肝生成??梢詾橄愣顾厮种?。為統(tǒng)一命名,世界衛(wèi)生組織按其被發(fā)現(xiàn)的先后次序用羅馬數(shù)字編號(hào),有凝血因子Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅶ,Ⅷ,Ⅸ,Ⅹ,Ⅺ,Ⅻ,Ⅻi等。什么是凝血因子?【一】凝血酶時(shí)間測(cè)定(prothrombintimePT)(一)方法學(xué)溯源:在受檢血漿中加入過量的組織凝血活酶(人腦、兔腦、胎盤及肺組織等制品的浸出液)和鈣離子,使凝血酶原變?yōu)槟?,凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。觀察血漿凝固所需時(shí)間即凝血酶原時(shí)間。該實(shí)驗(yàn)是反映外源凝血系統(tǒng)最常用的篩選試驗(yàn)。(二)參考值及報(bào)告方式:PT:直接報(bào)告患者及正常對(duì)照的PT秒數(shù)。參考值為11~14s,超過正常3s為異常。PTR:報(bào)告凝血酶原時(shí)間比值比值(PTR)。PTR=受檢值/正常值。PA:百分活動(dòng)度:由PT的標(biāo)準(zhǔn)曲線(凝血時(shí)間vs百分活動(dòng)度)讀取。
PA為PT的相對(duì)值指標(biāo),其臨床意義基本同PTINR:國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)。INR=PTRISIISI值為國(guó)際敏感度指數(shù),由試劑廠商提供。ISI越高表示試劑的靈敏度越低,ISI越接近于1試劑的靈敏度越高。
INR值主要用于口服抗凝劑監(jiān)測(cè)。濃度或者活性百分比(對(duì)數(shù))【二】活化部分凝血活酶時(shí)間
(activatedpartialthromboplastintime,APTT)(一)方法學(xué)溯源:
37℃條件下,以白陶土激活因子Ⅻ和Ⅺ,以腦磷脂(部分凝血活酶)代替血小板,在Ca2+參與下,觀察貧血小板血漿凝固所需時(shí)間,即為活化部分凝血活酶時(shí)間,是內(nèi)源凝血系統(tǒng)較敏感和常用的篩選試驗(yàn)。(二)參考范圍:APTT(sec):27—45s(三)臨床意義:
延長(zhǎng)受檢者的測(cè)定值較正常對(duì)照延長(zhǎng)超過10s以上才有病理意義。對(duì)內(nèi)源凝血途徑因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)缺乏較敏感(血小板異常不影響APTT)能檢出Ⅷ:C小于25%的輕型血友病。對(duì)凝血酶原、纖維蛋白原缺乏則不夠敏感,最常見疾病為血友病。在使用肝素治療時(shí),多用APTT監(jiān)測(cè)藥物用量,一般以維持結(jié)果為基礎(chǔ)值的2倍左右(1.5—3.0倍)為宜(75—100s之間)。血管性血友病:由于患者vWF缺乏,使FⅧ不穩(wěn)定,活性下降,APTT延長(zhǎng)異??鼓镔|(zhì)增多:長(zhǎng)期輸注FⅧ可產(chǎn)生FⅧ抑制物,或患者存在狼瘡抗凝物(LAC),使APTT延長(zhǎng)。纖溶亢進(jìn):原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)產(chǎn)生大量FDP,使APTT延長(zhǎng)??s短:DIC早期、血栓前狀態(tài)及血栓性疾病?!舅摹磕笗r(shí)間(thrombintime,TT)原理:受檢血漿中加入“標(biāo)準(zhǔn)化”凝血酶溶液,測(cè)定開始出現(xiàn)纖維蛋白絲所需時(shí)間。(二)參考范圍:0-20s(三)臨床意義:延長(zhǎng):見于肝素增多或類肝素抗凝物質(zhì)存在、如SLE、肝病、腎病等,低(無)纖維蛋白血癥、異常纖維蛋白原血癥、纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)增多、如DIC、原發(fā)性纖溶等??s短:見于血標(biāo)本有微小凝塊或鈣離子存在時(shí)。D二聚體與FDPD二聚體:纖維蛋白單體經(jīng)活化因子ⅩⅢ交聯(lián)后,再經(jīng)纖溶酶水解產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物FDP:纖溶亢進(jìn)時(shí)產(chǎn)生的纖溶酶的作用下,纖維蛋白(原)被分解后產(chǎn)生的降解產(chǎn)物的總稱。D二聚體:繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)↑FDP:原發(fā)性、繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)↑獨(dú)特的美國(guó)FDA批準(zhǔn)標(biāo)志FDA批準(zhǔn)IL的DD產(chǎn)品可標(biāo)有“排除診斷靜脈血栓性疾病”正常人靜脈血栓栓塞VTE患者DD濃度分布結(jié)論陰性DD患者可以除外VTE,且無需影像學(xué)檢查,縮短診斷時(shí)間,減少診斷費(fèi)用。DD連續(xù)監(jiān)測(cè)有利于預(yù)防靜脈血栓疾病的復(fù)發(fā)以及監(jiān)測(cè)口服抗凝藥的使用時(shí)間。纖溶活性判斷
FDP(-)和DD(-):若是定量分析則纖溶活性偏低,見于血栓性疾病。FDP(+)和DD(+):繼發(fā)性纖溶活性亢進(jìn),見于DIC、溶栓治療。FDP(+)和DD(-):視定量分析結(jié)果而定,見于肝病,具有一定纖溶活性的健康人,原發(fā)性纖溶活性亢進(jìn)等。FDP(-)和DD(+):FDP假陰性,DD假陽性。AT抗凝系統(tǒng)AT抗凝系統(tǒng)是抗凝血系統(tǒng)的一個(gè)重要的組成成分,是體內(nèi)主要的凝血酶抑制物對(duì)絲氨酸蛋白酶如:FIXa,F(xiàn)Xa,F(xiàn)XIa,F(xiàn)XIIa等有抑制作用AT缺陷癥導(dǎo)致血栓形成,機(jī)制主要與抗凝活性和肝素結(jié)合能力降低有關(guān)。AT是凝血酶的主要抑制物,能中和血漿中2/3的凝血酶,肝素可使AT滅活凝血酶的作用增強(qiáng)1000~2000倍。AT是肝素抗凝血過程的必需物質(zhì),當(dāng)AT活性降低時(shí),肝素的抗凝活性明顯降低或失去活性,所以在肝素的治療監(jiān)測(cè)中,必須了解AT的水平,以防不必要的且危險(xiǎn)的大劑量的治療AT活性為70%時(shí),肝素作用約降低65%AT活性為50%時(shí),肝素作用只有原來的1/5,應(yīng)考慮補(bǔ)充ATAT的臨床作用:血液科:血友病、血管性血友病心內(nèi)科:心梗、溶栓和抗凝治療神經(jīng)內(nèi)科:腦梗塞、溶栓治療傳染科:重癥肝炎外科:DVT、DIC、器官移植、FXIII缺乏(傷口不愈合),VK因子缺乏(肝膽疾病)婦產(chǎn)科:DIC、反復(fù)流產(chǎn)、骨科--血友病(骨關(guān)節(jié)病變),易誤診血栓與止血涉及臨床各科
1.靜脈血1:9枸櫞酸鈉抗凝劑全血,充分混勻。血液如發(fā)現(xiàn)凝固,應(yīng)棄去不用。血量超過或不足10%以內(nèi)為可用標(biāo)本。
2.在運(yùn)送中應(yīng)避免劇烈振動(dòng)和日光直射;一般要求自采血到測(cè)定不得超過4h,不可久貯;如在室溫中貯存過久,第Ⅴ因子會(huì)破壞;另一方面,在4℃貯存過久,會(huì)導(dǎo)致第Ⅶ因子活化。實(shí)驗(yàn)室在取得血樣后應(yīng)盡快分離血漿并盡快測(cè)定。如不能完成試驗(yàn),(最好在-70℃,或者當(dāng)貯存時(shí)間較短時(shí),可以置于-20℃條件下),在實(shí)驗(yàn)前將血漿于37℃下快速融化3.血漿標(biāo)本離心:
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