微生物檢驗的質(zhì)量控制

1微生物檢驗的質(zhì)量控制質(zhì)量控制（Qualitycontrol）

是臨床微生物學(xué)實驗室為了保證檢驗結(jié)果實事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。室內(nèi)質(zhì)量控制

室內(nèi)質(zhì)量控制是由實驗室內(nèi)部制定并實施的，是質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)。室間質(zhì)量控制評價

室間質(zhì)量控制評價是由實驗室外部的組織或機構(gòu)對實驗室進行的質(zhì)量評價。

2檢驗前的質(zhì)量保證

檢驗前程序：又叫分析前期。

指從臨床醫(yī)生開醫(yī)囑開始，到分析檢驗程序啟動時終止的步驟。包括

檢驗申請標(biāo)本的采集、運送與接收3微生物檢驗中的質(zhì)量保證人員的組織與管理規(guī)范的操作規(guī)程試劑培養(yǎng)基設(shè)備檢驗過程4試劑、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

有效期外觀性能測試保存5各種試劑的監(jiān)控菌種試劑“x+v”因子試劑條流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌嗜沫嗜血桿菌硝酸鹽還原試劑大腸埃希菌醋酸鈣不動桿菌每批，以后每次靛基質(zhì)試劑大腸埃希菌產(chǎn)氣腸桿菌每批，以后每天甲基紅試劑大腸埃希菌產(chǎn)氣腸桿菌每批，以后每周V-P試劑產(chǎn)氣腸桿菌大腸埃希菌每批，以后每周6常用試驗、染液的推薦菌株

試驗名稱陽性對照菌陰性對照菌血漿凝固酶試驗金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌觸酶試驗金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌氧化酶試驗銅綠假單胞菌大腸埃希菌桿菌肽試驗A群鏈球菌B群鏈球菌奧普托欣試驗肺炎鏈球菌草綠色鏈球菌革蘭染液金黃色葡萄球菌大腸埃希菌抗酸染液結(jié)核分枝桿菌混合非抗酸菌7測定各種培養(yǎng)基性能的菌種

培養(yǎng)基質(zhì)控菌株判定標(biāo)準(zhǔn)羊血瓊脂平板

金黃色葡萄球菌ATCC25923

生長

生長試驗

大腸埃希菌ATCC25922生長溶血反應(yīng)

肺炎鏈球菌ATCC19615生長，α溶血化膿性鏈球菌ATCC6305生長，β溶血

桿菌肽敏感（紙片法）化膿性鏈球菌ATCC6305>10mm，敏感

B群鏈球菌<10mm，耐藥Optochin敏感（紙片法）

肺炎鏈球菌15∽18mm，敏感涎鏈球菌<15mm，耐藥8測定各種培養(yǎng)基性能的菌種巧克平板生長試驗淋病奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌流感嗜血桿菌肺炎鏈球菌生長SS平板鼠傷寒沙門菌傷寒沙門菌福志賀菌大腸埃希菌

腸球菌生長，黑色菌落中心生長，無色透明菌落生長，無色透明菌落部分抑制生長，紅色混濁菌落部分抑制生長9測定各種培養(yǎng)基性能的菌種麥康凱平板大腸埃希菌生長，紅色混濁菌落傷寒沙門菌生長，無色透明菌落中國藍(lán)瓊脂大腸埃希菌生長，藍(lán)色菌落傷寒沙門菌生長，無色菌落營養(yǎng)瓊脂金黃色葡萄球菌大量生長福志賀菌大量生長厭氧血平板脆弱擬桿菌生長產(chǎn)氣莢膜梭菌生長，β溶血堿性蛋白胨水霍亂弧菌大量生長大腸埃希菌抑制生長10測定各種培養(yǎng)基性能的菌種彎曲菌瓊脂空腸彎曲菌生長大腸埃希菌

部分抑制

TCBS平板霍亂弧菌生長，黃色菌落副溶血性弧菌

生長，藍(lán)綠色菌落沙保弱瓊脂白色念珠菌生長大腸埃希菌

部分或完全抑制需氧血液增菌液肺炎鏈球菌生長化膿性鏈球菌銅綠假單胞菌白色念珠菌厭氧血液增菌液脆弱擬桿菌

生長11各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種

培養(yǎng)基陽性對照菌陰性對照菌賴氨酸脫羧酶遲緩愛德華菌

費枸櫞酸桿菌鳥氨酸脫羧酶產(chǎn)氣腸桿菌

費枸櫞酸桿菌精氨酸雙水解酶陰溝腸桿菌

普通變形桿菌蛋白胨水（靛基質(zhì)）大腸埃希菌

陰溝腸桿菌12各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種

培養(yǎng)基陽性對照菌陰性對照菌

MR

大腸埃希菌

陰溝腸桿菌

V-P

陰溝腸桿菌

大腸埃希菌枸櫞酸鹽（西蒙氏）產(chǎn)氣腸桿菌

遲緩愛德華菌苯丙氨酸脫氨酶

雷極變形桿菌

費枸櫞酸桿菌O-F試驗管

銅綠假單胞菌（氧化型）洛菲不動桿菌（不利用）

大腸埃希菌（發(fā)酵型）硝酸鹽還原

大腸埃希菌

洛菲不動桿菌13各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種培養(yǎng)基陽性對照菌陰性對照菌膽汁-七葉苷糞腸球菌

化膿性鏈球菌脫氧核糖核酸瓊脂粘質(zhì)沙雷菌

表皮葡萄球菌氰化鉀肉湯產(chǎn)氣腸桿菌

遲緩愛德華菌丙二酸鹽產(chǎn)氣腸桿菌

遲緩愛德華菌尿素瓊脂雷極變形桿菌（快）大腸埃希菌

肺炎克雷白菌（慢）半固體瓊脂動力試驗大腸埃希菌

肺炎克雷白菌14儀器設(shè)備的質(zhì)量控制設(shè)備控制范圍備注高壓滅菌器121℃

定期用嗜熱芽胞桿菌測試（每月）孵育箱35±1℃

定期加水水浴箱37±0.5℃

定期加水、清潔內(nèi)壁冰箱4±2℃

定期清潔內(nèi)部CO2箱5-10%

淋病奈瑟氏菌檢測效果厭氧箱美蘭或銅綠假單胞菌測試厭氧條件生物安全柜更換濾網(wǎng)，紫外線消毒性能檢測（每三個月）血液培養(yǎng)儀培養(yǎng)瓶進行少量生長試驗；瓶位定期校正微生物鑒定儀探測部位定期清潔；鑒定卡、條、板測試

15標(biāo)本檢驗過程的質(zhì)量控制選擇合理的檢驗項目選擇適當(dāng)?shù)臉?biāo)本正確書寫檢驗申清單16直接診斷

直接發(fā)現(xiàn)病原體

---膿、腦脊液、胸腹水等無菌部位標(biāo)本確定標(biāo)本是否合格，并推測病原體

---痰液標(biāo)本發(fā)現(xiàn)病原體并進行初步計數(shù)

---尿液標(biāo)本為培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法的選擇提供信息17病原菌的分離培養(yǎng)

呼吸道標(biāo)本

接種血瓊脂平板、巧克力平板、麥康復(fù)凱平板和沙保弱瓊脂，并將巧克力血平板置5%-10%CO235℃環(huán)境中培養(yǎng)。糞便標(biāo)本

接種SS平板、麥康凱平板或中國藍(lán)平板血液培養(yǎng)

在血液增菌培養(yǎng)期間，應(yīng)至少在24h∽48h盲目翻種一次，以后有可疑細(xì)菌生長即刻翻種，盡早發(fā)現(xiàn)病原菌。18病原菌的鑒定

菌落形態(tài)觀察--涂片染色鏡檢--生化鑒定--血清學(xué)試驗

---氧化酶試驗不應(yīng)在糖類發(fā)酵選擇性平板上進行，以免假陰性結(jié)果出現(xiàn)。

---在腸道選擇性平板上應(yīng)挑取菌落進行生化反應(yīng)，生化反應(yīng)符合，血清學(xué)凝集陽性者可確認(rèn)報告。

不能從選擇性平板上挑取菌落進行血清學(xué)凝集，會因為交叉抗原的存在或抗原的丟失而導(dǎo)致假陽性或假陰性。每次血清凝集試驗時，應(yīng)用生理鹽水作對照。防止粗糙型菌落造成的假凝集19藥敏試驗的質(zhì)量控制要點培養(yǎng)基紙片菌量操作孵育：時間、溫度、平板放置結(jié)果判斷質(zhì)控菌株20紙片擴散法的質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923大腸埃希菌ATCC25922大腸埃希菌ATCC35218（用于β內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑）銅綠假單胞菌ATCC27853糞腸球菌ATCC29212流感嗜血桿菌（用于HTM培養(yǎng)基）ATCC49247、49766淋病奈瑟菌（用于GC瓊脂）ATCC49226肺炎鏈球菌（用于5%羊血MH瓊脂）ATCC4961921失控的常見的原因---質(zhì)控結(jié)果記錄錯誤---量取抑菌環(huán)直徑時讀數(shù)錯誤---標(biāo)準(zhǔn)菌株被污染或其它改變---接種的菌懸液太濃或過淡---0.5管麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)管未搖勻或已過期失效---孵育溫度或氣體環(huán)境不正確---MH培養(yǎng)基質(zhì)量有無問題---含藥紙片失效22檢驗后的質(zhì)量保證檢驗后程序：也稱分析后期。

指檢驗后全部過程。包括檢驗結(jié)果的評審與報告

---報告時間、分級報告、危急值報告及記錄

標(biāo)本的處置

---感染性廢棄物

23菌種保存方法培養(yǎng)基保存法快速冷凍法冷凍干燥法

24菌種保管定期轉(zhuǎn)種制備記錄卡專人負(fù)責(zé)25室內(nèi)全面質(zhì)量控制全面實施各項質(zhì)量控制內(nèi)容對人員要及時進行培訓(xùn)和考核嚴(yán)格審核標(biāo)本和結(jié)果報告在日常標(biāo)本中摻入模擬標(biāo)本，進行盲點試驗發(fā)現(xiàn)誤差，應(yīng)及時找出原因，進行改進

26室間質(zhì)量控制的實施組織單位：各級臨床檢驗中心和參考實驗室工作任務(wù)：定期或不定期地進行熟練程度考核和盲點試驗檢查。定期或不定期地舉辦各種學(xué)習(xí)班，提高各級技術(shù)人員的技術(shù)水平，學(xué)習(xí)新的