培養(yǎng)基質(zhì)量控制一、培養(yǎng)基分類

按狀態(tài)分類：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基按用途分類運輸培養(yǎng)基：保藏培養(yǎng)基復蘇培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)基：選擇性和非選擇性分離培養(yǎng)基：選擇性和非選擇性鑒別培養(yǎng)基鑒定培養(yǎng)基多種用途培養(yǎng)基按制備方法分類：即用型培養(yǎng)基商品化脫水合成培養(yǎng)基實驗室制備個別成分培養(yǎng)基三、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

培養(yǎng)基的實驗室管理在進行培養(yǎng)基和試劑的招標采購中，必須把培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量做為最重要的關(guān)鍵控制點，以保證檢驗結(jié)果的準確性?，F(xiàn)使用的培養(yǎng)基一般為商品化脫水合成培養(yǎng)基，保存在密閉的容器中。用于選擇和鑒定的添加劑通常為凍干物和液體。培養(yǎng)基的購買要有計劃，以利于存貨的周轉(zhuǎn)，遵循先購先用的原則實驗室收到培養(yǎng)基后，應(yīng)檢查：培養(yǎng)基的名稱和批號、接收日期、有效期、包裝及其完整性。實驗室應(yīng)保存有效的培養(yǎng)基目錄清單，清單應(yīng)包括以下內(nèi)容：容器密封性復查、首次開封日期、內(nèi)容物的感官檢查。對于新開封的脫水培養(yǎng)基，通過粉末的流動性、均勻性、結(jié)塊情況和色澤變化等判斷其質(zhì)量變化，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基受潮或物理性狀發(fā)生明顯改變則不應(yīng)再使用。商品化脫水培養(yǎng)基有效期各不相同，無法統(tǒng)一。培養(yǎng)基配制應(yīng)使用蒸餾水或相同質(zhì)量的水（如去離子水）配制：排除各種抑制和影響微生物生長的物質(zhì)；（如用于制備蒸餾水的水源中氯的含量）一般培養(yǎng)基需矯正PH至7.4-7.6，也有特殊要求的酸性及堿性培養(yǎng)基；培養(yǎng)基在高壓滅菌后會有所變化，一般來說，用氫氧化鈉的調(diào)節(jié)時，滅菌后會下降0.1-0.2，用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)時，滅菌后會上升0.1左右；培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)冷卻后測定，因培養(yǎng)基所含成分不同，對冷和熱時測定酸堿度相差很大；培養(yǎng)基滅菌后冷卻到25℃時，PH的變化不應(yīng)超過0.2個單位，商品化的培養(yǎng)基高壓滅菌前后PH值可能變化很大，但采用優(yōu)質(zhì)蒸餾水或去離子水配制時，滅菌前無需調(diào)節(jié)PH值。培養(yǎng)基滅菌亮綠培養(yǎng)基等特定的培養(yǎng)基中含有對光或熱敏感的物質(zhì)，只能煮沸滅菌。煮沸后應(yīng)迅速冷卻，避光保存；明膠、血清、糖類等不耐熱高溫的物質(zhì)，應(yīng)采用高壓鍋低溫滅菌法/間歇滅菌法滅菌；有些則不需滅菌，可直接使用。高壓滅菌一般采用121℃滅菌15分鐘，高壓蒸汽滅菌器要按規(guī)定做好滅菌效果監(jiān)測。培養(yǎng)基滅菌后分裝到平皿或試管后，不能立即使用的應(yīng)避光、干燥保存。除特殊說明和標準規(guī)定，通常情況下基礎(chǔ)培養(yǎng)基應(yīng)在4℃冰箱中保存不超過3個月，或在室溫（20℃）保存不超過1個月；不穩(wěn)定的選擇性物質(zhì)或其他添加成分應(yīng)即用即配，不可二次融化；倒好的平板應(yīng)立即使用或存放于4℃-12℃冰箱保存，最多存放一周或按特殊培養(yǎng)基的要求或廠商提供的標準執(zhí)行。如果將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長保存期限。做好標記，內(nèi)容包括名稱、制備日期、有效期。理化指標理化指標通常由生產(chǎn)廠商通過對原材料、生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)過程進行質(zhì)控，使用者通常用感官檢查或pH測定進行確認。1.培養(yǎng)基的色澤2.培養(yǎng)基的水分含量3.培養(yǎng)基的澄清度4.培養(yǎng)基的pH5.固體培養(yǎng)基的凝膠強度微生物學評估方法定量法—培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家或?qū)ε囵B(yǎng)基質(zhì)量有特殊要求的實驗室對培養(yǎng)基質(zhì)控；半定量法—實驗室對培養(yǎng)基的質(zhì)控；定性法—實驗室對培養(yǎng)基的質(zhì)控。固體培養(yǎng)基的生長率測試-定性法將質(zhì)控菌株接種到非選擇性肉湯培養(yǎng)過夜。用1ul接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線（細菌），或用接種針直接挑取斜面培養(yǎng)物點種接種（霉菌）。并按標準規(guī)定的培養(yǎng)條件培養(yǎng)平板。培養(yǎng)后按以下方法對培養(yǎng)基計分：0表示無生長；1表示微弱生長；2表示生長良好。固體培養(yǎng)基生長率評價標準定性法目標菌得分應(yīng)為2。固體培養(yǎng)基選擇性測試-半定量法將質(zhì)控菌株接種到非選擇性肉湯培養(yǎng)過夜。用1μl接種環(huán)取選擇性測試工作菌懸液1環(huán)，在待測培養(yǎng)基表面劃六條平行直線(如圖)，同時接種兩個平板，劃線時可在培養(yǎng)基下面放一個模板圖，按標準規(guī)定的培養(yǎng)條件培養(yǎng)平板。計算G：每條有比較稠密菌落生長的劃線則G為1，每個培養(yǎng)皿上最多為6分。如果僅一半的線有菌落生長，則G為0.5。如果劃線上沒有菌落生長或生長量少于劃線的一半，則G為0。評價標準：G應(yīng)小于6。固體培養(yǎng)基生化特性測試-定性法分別觀察質(zhì)控菌株(包括目標菌和非目標菌)在培養(yǎng)基上形態(tài)、顏色及生化特征。評價培養(yǎng)基的指示系統(tǒng)是否正常